6±1.076 %（与对照组比较P
目前，恶性肿瘤依然是威胁人类生命的主要杀手，而且随着抗生素和免疫抑制剂的大量应用等原因，深部真菌感染也逐渐成为许多疾病死亡的原因，所以，世界各国都投入大量的人力、财力，加强对抗肿瘤、抗真菌药物的研究。海洋由于其生态环境和生物多样性与陆地有很大差别，已成为新药开发的宝贵资源；而红树林作为一种特殊的海洋生态环境，是一类尚未很好地开发和利用的微生物资源库和新化合物库。

本文在国家海洋863课题和国家自然科学基金的资助下，以福建省的红树林植物为研究对象，分离红树植物内生真菌，并在菌株鉴定基础上分离纯化其代谢产物，研究化合物的抗菌、抗肿瘤活性，试图为红树植物内生真菌资源的开发和利用提供依据。 我们从福建九龙江口浮宫镇红树植物桐花树树皮分离获得两株内生真菌。经鉴定，HTF3菌株为小穴壳菌属(Dothiorella sp．)，HTF5菌株为小孢盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)，这是首次从红树植物中分离到这两种内生真菌。我们还首次测定了Dothirella sp．的ITS序列并正准备在GenBank中登记注册。 从两个菌株的发酵液中共分离纯化得到10个单体化合物，应用NMR谱和MS谱对化合物进行结构解析，发现从HTF3菌株中分离的5个单体化合物中有4个是未见报道的新结构化合物：2-[3’，5’-二羟基-2’-(7’-羟基)辛酮基苯基]-乙酸乙酯(dothiorelone 许多 A)、2-[3’，5’-二羟基-2’-(6’-羟基)辛酮基苯基]-乙酸乙酯(dothiorelone B)、2-[3’，5’-二羟基-2’-(8’-羟基)辛酮基苯基]-乙酸乙酯(dothiorelone

C)和6，8-二羟基-1(R)(5’-羟己基)-异苯并二氢吡咯-3-酮(dothiorelone D)。另一个虽为已知的cytosporone B(dothiorelone E)，但为我们首次从红树林内生真菌中分离获到。活性检测 一摘要一 中发现5个化合物均表现出不同程度的抗肿瘤活性，其中dothioreloneE活 性最强且有较广的肿瘤谱。这5个化合物均没有抗细菌活性，但dothiorelone E有较强的抗真菌活性，真菌谱较广，且产量达到10mg/L，有作为药物开 发的前景。该成果已申请专利并已公开。本文还分析了类似化合物的结构 与活性的关系，并对可能的作用机理进行了讨论。 从内生真菌HTFS菌株发酵液和菌体中共分离出5个单体化合物，其中 有3个酚类物质，这是首次报道从红树内生真菌代谢物中同时分离到这三 种多酚化合物，推测它们是作为芳香化合物的代谢中间物被分离到的，所 以HTFS菌株可能具有分解芳香化合物的独特能力。从菌体中分离到的2个 脂类物质可能是组成细胞膜的成分。 本文的研究结果表明，红树林内生真菌确是一类值得更好地开发的真 菌资源，是新颖结构和新生理活性的次级代谢产物的一个重要来源。
第一章 地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡体外模型建立及形态学研究 目的：建立地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡体外模型并且进行凋亡形态学研究。方法：以地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型，通过流式细胞术、电镜和荧光显微镜测定模型的稳定性。结果：仅在完全RMPI PCI-24781化学结构 1640培养基培养条件下小鼠胸腺细胞自发凋亡百分率为(2.90±0.62)％，在2.5 μmol／L DEX诱导下，3小时培养组(12.70±2.44)％、6小时培养组(53.55±4.59)％发生了细胞凋亡；在1μmol／L DEX诱导下，小鼠胸腺细胞在3h、5h和7h凋亡比率分别为(18.43±0.30)％、(37.85±1.46)％和(62.53±1.81)％，对照组分别为(4.05±0.29)％、(4.81±0.24)％和(7.77±0.31)％，组间差异显著(p＜0.01)；相同时点下，DEX组坏死比率分别为(1.20±0.08)％、(3.99±0.31)％和(6.46±0.81)％，对照组分别为(0.93±0.10)％、(1.27±0.22)％和(1.55±0.19)％，组间差异显著(p＜0.01)。形态学和荧光显微观察到典型的细胞凋亡现象。结论：建立了体外DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡定量模型，并且发现影响模型稳定性的主要因素包括实验动物、温度、机械损伤和操作时间等。

GSK2118436 第二章 地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中MAPK相关信息通路研究 目的：研究在DEX影响小鼠胸腺细胞MAPK相关信号变化特点，以进一步探讨DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中的作用机制。 方法：分别用终浓度为10、25和50μmol／L的ERK1／2特异性阻断剂PD98059(PD)以及10μmol／L的p38特异性阻断剂SB203580(SB)单独和联合1μmol／L的DEX作用小鼠胸腺细胞，并通过Annexin V-FITC／PI双染流式细胞术测定3 h、5 h和7 h凋亡和坏死细胞比率；以终浓度1μmol／L的DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡，利用SDS-PAGE及Western blot检测0、30、60和180 min细胞内ERK1／2、p38、JNK1／2、c-Myc和caspase-3信号变化特点。 结果：分别在终浓度10、25和50μmol／L的PD单独刺激下，小鼠胸腺细胞凋亡比例在3、5和7 h时点均显著高于对照组(p＜0.01)，而且表现出PD剂量依赖型诱导小鼠胸腺细胞凋亡趋势；各组坏死比例均高于对照组。 在终浓度10、25和50μmol／L PD和1μmol／L DEX联合刺激下，小鼠胸腺 细胞凋亡坏死进程明显提高，结果显示PD加速DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡。 SB10林mol/L单独刺激下，小鼠胸腺细胞凋亡比例在3、5和7h时点均显 著高于对照组(p0.05)，而从sh (660.91土72.95)开始显著低于对照组(P0.05)。而在11、24和27 h，对照组△wm分别为(256.41士21.59)、(214.14士23.21)和(146.14士17.

7%，其它较多为鼻咽部（20.2%），扁桃体（10.24%），腭部（8.92%）；男女性别比例为1.53:1；②霍奇金淋巴瘤占发生于头颈颌面部恶性淋巴瘤的15.35%；非霍奇金淋巴瘤占发生于头颈颌面部恶性淋巴瘤的84.65%；其中结外非霍奇金淋巴瘤患者占发生于头颈颌面部恶性淋巴瘤的57.87%，好发部位主要有鼻咽部（46.81%），扁桃体（17.69%），腭部（15.42%），唾液腺（11.36%）；③无痛性肿块型好发部位是颈部和鼻咽部，表现为原发部位为溃疡坏死型的病变，以腭部和扁桃体较为常见；表现为弥漫性炎症浸润型在鼻咽部和腭部较多见，原发组织水肿红斑型常见于面颊部。 2．临床分期及病理分型：临床Ⅰ期和Ⅱ期较多，占58.42%，Ⅲ期和Ⅳ期占41.58%。在645例非霍奇金淋巴瘤病例中，以B细胞来源的恶性淋巴瘤多见（478例），占74.11%，常见的类型有弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、Burkitt淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关性淋巴样组织结外边缘区淋巴瘤（MALT）、套细胞淋巴瘤、小淋巴细胞样淋巴瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤和浆细胞瘤；T细胞来源的恶性淋巴瘤在非霍奇金淋巴瘤中有167例，占25.89%，最常见的是结外NK/T细胞淋巴瘤，其次是前驱T淋巴母细胞瘤、间变大细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤（PTCL）、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤和皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤。

FK866购买 3．预后分析：132例淋巴瘤患者的1、3、5年预期生存率分别为：84.85%、57.36%、34.18%；生存分析显示，不同年龄、不同病理类型、不同临床分期、是否放疗、是否化疗的患者之间生存率差异具有统计学意义；COX回归分析显示，年龄、病理类型、临床分期及原发部位是影响预后的主要因素。 结论： 1．发病年龄从3岁至85岁，平均年龄47岁，从61岁至70岁阶段达高峰;男女性别比例为1.53:1;发病部位以颈部最多见。 2．临床Ⅰ期和Ⅱ期较多；非霍奇金淋巴瘤中，B细胞型比T细胞型多见，B细胞来源的恶性淋巴瘤最常见的类型是弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL），T细胞来源的恶性淋巴瘤中最常见的是结外NK/T细胞淋巴瘤。 3．NHL1年生存率较高，但5年生存率较低；年龄、疾病分期、病理分型是NHL预后的危险性因素；年龄越高的NHL患者预后较差；早期患者预后明显较晚期患者好；B细胞型较T细胞型淋巴瘤预后好；化疗是NHL预后的保护性因素，即接受规律化疗的患者预后好于未化疗患者。

由于本组研究中病例数比较少、临床病历资料不完善，并且随访时间较短暂，致使本组研究中完整的数据缺失较多，目前只能看出存在一些差异的趋势，因此，关于影响头颈颌面部恶性淋巴瘤的预后因素还需扩展病例数，同时延长随访时间获得更具体的信息来做进一步的相关研究。
1背景及目的 selleck chemical 肺癌是全球死亡率最高的恶性肿瘤，估计到2030年，全球将有830万人死于吸烟相关性疾病，其中肺癌占3.1％。肺癌中超过80%为非小细胞肺癌(NSCLC)，5年存活率不超过10%。肺癌的高发病率和低存活率，研究其发病机制将有助于防止疾病发生发展。全球肿瘤研究者共识：开展积极有效的筛查、早期诊断、早期治疗、早期干预以降低肺癌的发病率、死亡率和提高治疗率。 肿瘤的发生是环境因素和遗传因素共同作用的结果，是一个受多因素影响、涉及多基因、表现多阶段的十分复杂的过程。肿瘤和凋亡关系密切，肿瘤发生的一个重要原因是基因水平上诱导凋亡基因失活，抑制凋亡基因过度表达。有研究表明，细胞凋亡相关基因改变与肿瘤预后有一定关系。诱导肿瘤细胞凋亡是肿瘤治疗的重要策略。随着分子生物学技术的不断发展和完善，对肿瘤发病机制的认识日益深化，基因治疗已成为继化疗、放疗、手术等治疗后极有发展前景的一种高效、特异、靶向的治疗方法。 国内外文献对凋亡基因c-myc已有研究，但caspase-8在恶性肿瘤细胞中的表达及其与细胞调亡关系的研究相对尚少，在NSCLC中的研究甚少。本文主要研究c-myc、caspase-8在NSCLC的表达及临床意义，研究两者在NSCLC中表达的相互关系。c-myc与caspase-8联合研究为临床诊断和治疗提供实验依据。

OSI 744 2对象和方法 2.1研究对象 随机收集郑州大学第一附属医院病理科2010-2012年胸外科送检的肺癌标本50例，年龄在44-77岁之间，鳞癌27例，腺癌23例，所有患者手术前未进行放化疗等其他治疗，病理诊断为NSCLC，癌组织分期按照美国联合癌症分类委员会（AJCC）和国际抗癌联盟（UICC）制定的分期标准[1]。选取NSCLC组织边缘3cm以外的经病理证实的20例正常肺组织为对照组，所有标本均被石蜡包埋，由病理科专业人员切片，NSCLC组织及正常肺组织各切3张。 2.2实验方法 检测c-myc、caspase-8在NSCLC组织及正常组织中的表达采用免疫组织化学法（S-P法），检测c-myc、caspase-8在NSCLC组织及正常组织中的细胞凋亡采用TUNEL法。 2.3结果判定 c-myc、caspase-8阳性标准：c-myc在肺鳞癌中主要表达在细胞核，肺腺癌中主要表达在细胞浆，阳性表达均表现为棕黄色颗粒。caspase-8的染色为细胞质和（或）细胞核出现棕黄色颗粒。c-myc、caspase-8在NSCLC中的表达从两方面进行定量判断：①阳性染色程度：无染色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。②染色细胞百分率：光镜（400倍）下每个视野计数100个细胞，每张切片随机挑选10个视野，计算阳性细胞数占总癌细胞数百分比，＜10%为0分，10%-25%为1分，26%-50%为2分，≥51%为3分[2]。两个定量数字相加，总分值小于4为阴性，大于等于4为阳性。 细胞凋亡：凋亡细胞经TUNEL法处理后，运用400倍光学显微镜，结合凋亡细胞染成棕黄色综合判断，计数每1000个肿瘤细胞中凋亡细胞的个数，进行统计学分析[3]。凋亡细胞指数（AI）=调亡细胞数/计数总细胞数。 2.4统计学处理 本实验所有统计均应用SPSS17.0软件进行处理，c-myc、caspase-8的表达及其与NSCLC临床病理特征的关系采用配对四格表的卡方检验。c-myc与caspase-8在NSCLC中表达的相关性应用配对资料的相关性分析，c-myc、caspase-8与凋亡的关系采用直线相关性分析。α=0.05为检验水准。 3结果 3.1c-myc在NSCLC中的表达及其与临床病理特征的关系 c-myc经免疫组化后，细胞胞质和（或）细胞胞核被染成棕黄色，肺癌组织50例，阳性率为60.0%（30/50），正常肺组织20例，阳性率为20%（4/20），两者差异有统计学意义（χ2=9.150，P=0.002），但c-myc在癌组织的染色均要深于正常组织。结果显示，c-myc在腺癌中的表达率（78.3%）高于在鳞癌中的表达率（44.4%），差异有统计学意义（χ2=5.918，P=0.015）。高分化组织的阳性表达率（88.9%）要高于中分化（65.4%）和低分化（33.3%），三者之间差异有统计学意义（χ2=7.888，P=0.

观察芩丹胶囊含药血清对TGF-β1诱导的AF增殖、迁移、平滑肌肌动蛋白-α(alpha

smooth muscle actin,α-SM actin)、Ⅰ和Ⅲ型前胶原mRNA和蛋白表达的改变,探讨芩丹胶囊对TGF-β1诱导的AF的生物活性的影响。 2.观察芩丹胶囊含药血清对TGF-β1诱导的AF Smad2、Smad3、Smad7、磷酸化Smad2 (phosphorylation-Smad2, p-Smad2)和磷酸化Smad3 (phosphorylation-Smad3, p-Smad3) mRNA和蛋白表达的影响,探讨芩丹胶囊对外膜成纤维细胞TGF-β1/Smad信号转导通路的作用。 方法 1.芩丹胶囊的制备及质量标准的研究：采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)和薄层层析法(Thin-layer chromatography, TLC),明确芩丹胶囊的有效成分。 2.成纤维细胞的复苏与传代：取出冻存管,快速解冻,用正常培养基悬浮细胞,离心后转移至培养瓶。待细胞长至90%融合时进行传代。 3.芩丹胶囊含药血清的制备：60只健康雄性Wistar大鼠随机分为3组：芩丹胶囊大剂量组(QC大剂量组)给予QC 750mg/(kg·d);芩丹胶囊小剂量组(QC小剂量组)给予QC 150mg/(kg·d);氯沙坦组给予氯沙坦30 selleck化学 mg/(kg-d)。各组均大鼠灌胃给药,最后一日禁食24h,末次给药后1h(氯沙坦组)和2h(芩丹胶囊组)后乙醚麻醉,腹主动脉取血,37℃水浴1 h,3000 rpm离心15min,取上清,过滤除菌,然后在-57℃条件下真空干燥,-20℃保存备用。 4.MTT比色法检测细胞增殖能力：制备细胞悬液,接种于96孔板,各组加入相应血清继续孵育48h,换用含20 ng/ml TGF-β1的培养基诱导24h,在刺激结束前4h加入MTT,弃上清,加入DMSO,振荡,比色。

5. Transwell法检测细胞迁移能力：细胞分组和处理同前,经过处理的细胞被消化,然后用DMEM制成细胞悬液,取0.6ml细胞悬液接种于上室,1.5ml含10%FCS的正常培养基加入下室。置入孵箱内培养6h,取出小室用湿棉签擦内侧的细胞,然后固定染色,计数。 6.实时定量PCR技术检测相关因子mRNA的表达：细胞处理同前,提取总RNA,将RNA逆转录为cDNA。观察芩丹胶囊和氯沙坦含药血清对TGF-β1诱导的Smad2、Smad3、Smad7、α-SMA、Ⅰ型及Ⅲ型前胶原肽mRNA的表达。用2-△△Ct的方法对mRNA的表达进行相对定量分析。 7. Western-blot技术检测相关因子蛋白的表达：细胞分组和处理方法同前,提取蛋白并定量,western-blot检测p-Smad2、p-Smad3、Smad2、Smad3、Smad7、α-SMA、Ⅰ型前胶原肽蛋白表达。 或者 VX-689 价格 8.统计学处理所有实验数据用x±s表示,数据资料均用SPSS 16.0进行统计处理。组间差异采用one-way ANOVA分析和t检验,设P<0.01)；各药物处理组增殖与TGF-β1刺激组相比,有非常显著性差异(P<0.05或P<0.01),其中以氯沙坦组减弱最为显著(P<0.01),其次为QC大剂量组(P<0.01),QC大剂量组和氯沙坦组较QC小剂量组有显著差异(P<0.01)；经药物处理以后,与TGF-β1刺激组相比,药物组细胞迁移数目均明显下降(P<0.05或P<0.01),其次为QC大剂量组(P<0.01)；QC大剂量组、氯沙坦组与QC小剂量组比较有显著差异(P0.05)；与氯沙坦组相比,QC小剂量组Smad3

mRNA表达差异有显著性(P0.05)；与TGF-β1刺激组相比,各药物处理组Smad7 mRNA表达均显著提高(P<0.01)；QC大剂量组、氯沙坦组与QC小剂量组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),其次为QC大剂量组(P<0.01),小剂量组与氯沙坦组比较差异具有统计学意义(P<0.01)；与TGF-β1刺激组相比,QC大剂量组和氯沙坦组Ⅰ型前胶原mRNA表达均显著下降(P0.05)。 (6)Ⅲ型前胶原mRNA表达比较：与正常对照组相比,TGF-β1刺激组细胞Ⅲ型前胶原mRNA表达表达显著升高(P<0.01)；与TGF-β1刺激组相比,各药物处理组Ⅲ型前胶原mRNA表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)；其中氯沙坦组下降最为显著(P<0.01),其次为QC大剂量组(P<0.01)；氯沙坦组与QC小剂量组比较有显著差异(P<0.01)。与TGF-β1刺激组相比,各药物组Smad2蛋白表达有所下降(P均<0.01)；氯沙坦组显著下降(P<0.01),且下降幅度大于QC大剂量组与QC小剂量组(P<0.05或P<0.01)；与TGF-β1刺激组相比,各药物处理组p-Smad2蛋白表达均显著下降(P<0.01)；QC大剂量组和氯沙坦组表达低于QC小剂量组(P<0.05或P<0.01)。与TGF-β1刺激组相比,氯沙坦组表达水平下降最明显(P<0.05),其次为QC大剂量组(P<0.

APN/CD13抑制剂抗HCC侵袭及新血管生成研究 目的：探讨APN/CD13抑制剂24F对HCC细胞侵袭和新血管生成的抑制作用 方法：选用人HCC细胞HuH-7和人脐静脉血管内皮细胞HUVEC,二者均表达APN/CD13。以L-亮氨酸对硝基苯胺为底物测定24F对APN/CD13酶活性的抑制作用。MTT法测定24F对HuH-7细胞增殖的抑制作用。Transwell细胞侵袭实验测定24F对HuH-7细胞侵袭和游走运动能力的抑制作用。微管形成实验测定24F对HUVEC细胞在Matrigel表面形成微管样结构的抑制作用。

selleck产品 结果：化合物24F对APN/CD13酶活性的半数抑制浓度为1.88mM。24F在0-200μg/mL浓度范围内对HuH-7细胞的增殖具有轻微地抑制作用,未观察到该化合物对HuH-7有明显的细胞毒效应。体外细胞侵袭实验结果表明,24F能够减少穿过Matrigel的HuH-7细胞数目,显示其对肿瘤细胞侵袭和游走运动能力的抑制作用。24F能够在体外抑制血管内皮细胞HUVEC形成微管样结构,提示24F具有潜在的抑制肿瘤新血管生成的能力。 结论：APN/CD13抑制剂24F对HCC细胞侵袭和游走运动能力具有抑制作用,对血管内皮细胞HUVEC微管形成具有抑制作用,提示APN/CD13抑制剂在抗HCC侵袭转移及新血管生成方面具有潜在的应用价值。 第二节.APN/CD13抑制剂抗卵巢癌增殖及新血管生成研究 目的：探讨APN/CD13抑制剂LYP对卵巢癌生长增殖及新血管生成的抑制作用。 方法：体外实验选用人卵巢癌细胞株ES-2和SKOV-3以及人脐静脉血管内皮细胞HUVEC。三种细胞均表达APN/CD13,表达水平由高到低依次为ES2、

SKOV-3和HUVEC。MTT实验测定LYP对细胞增殖的抑制作用。台盼蓝实验检测LYP的细胞毒效应。以L-亮氨酸对硝基苯胺为底物测定LYP对APN/CD13酶活性的抑制作用。流式细胞术和Western blot实验分别测定LYP对细胞APN/CD13表达水平的影响。划痕实验和Transwell侵袭实验观察LYP对HUVEC细胞侵袭和游走运动能力的抑制作用。微管形成实验测定LYP对HUVEC细胞在Matrigel表面形成微管结构的抑制作用。裸鼠接种ES-2细胞后尾静脉给予LYP治疗两周,观察药物对ES-2肿瘤生长的抑制作用和裸鼠对给药方案的耐受性。CD34免疫组化实验测定LYP对ES-2肿瘤组织平均血管密度和平均血管直径的影响。Western blot实验测定LYP对肿瘤组织内APN/CD13、VEGF、bFGF和TGFa表达水平的影响。 结果：MTT实验结果表明LYP能够有效的抑制ES-2细胞的增殖。LYP对ES-2细胞APN/CD13酶的活性具有显著的抑制作用。相同浓度下,LYP对APN/CD13酶活性的抑制作用大于乌苯美司。相对于ES-2细胞,LYP对SKOV-3细胞增殖的抑制作用较弱,提示LYP对ES-2细胞增殖的抑制作用可能与抑制APN/CD13有关。流式细胞术实验和Western blot实验表明LYP能够降低体外培养ES-2细胞APN/CD13的表达水平。裸鼠接种ES-2细胞后尾静脉给予LYP,连续治疗两周,ES-2肿瘤的生长受到显著的抑制作用。Western blot实验结果显示LYP能够降低肿瘤组织APN/CD13的含量。与阳性对照药乌苯美司相比,LYP对ES-2肿瘤生长的抑制作用较强。裸鼠对给药方案的耐受性良好,给药组裸鼠的体重与阴性对照组比较没有显著性差异。 为进一步研究LYP抑制体内ES-2肿瘤生长作用背后的机制,我们检测了LYP在抑制新血管生成方面的药理活性。MTT实验和台盼蓝实验结果显示在5-80μM浓度范围内,LYP对HUVEC细胞没有明显的细胞毒效应。在该浓度范围内LYP对HUVEC细胞APN/CD13酶的活性有一定的抑制作用。Transwell侵袭实验和划痕实验结果显示LYP能够明显抑制HUVEC细胞的侵袭和游走运动能力。微管形成实验表明LYP对HUVEC细胞在Matrigel表面形成微管样结构具有抑制作用。LYP对新血管生成的抑制作用在体内实验中得到了验证。对ES-2肿瘤组织进行CD34免疫染色,结果发现LYP给药组肿瘤平均血管密度和平均血管直径均小于阴性对照组。在相同给药剂量下,LYP抑制新血管生成的作用大于阳性对照药乌苯美司。LYP的抗微血管生成作用可能与其抑制与血管生成有关的分子的表达有关。Western

还有 blot实验结果显示,LYP给药组肿瘤组织内VEGF、bFGF和TGF-a的水平显著低于阴性对照组。 结论：LYP在体外和体内对卵巢癌细胞生长增殖具有较强的抑制作用,该作用可能与其降低细胞APN/CD13表达水平和抑制新血管生成有关。
目的：检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、分化型胚胎软骨表达基因1(differentiated embryo-chondrocyte expressed gene1,DEC1)、分化型胚胎软骨表达基因2(differentiated 而且 embryo-chondrocyte expressed gene2, DEC2)、低氧诱导因子1a(Hypoxia-inducible factorla,HIF1a)、信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcripton3, STAT3)及血管内皮生长因子(vascular endothelia growth factor,VEGF)信号传导分子在癌和癌旁组织的表达,探讨信号分子各自表达和不同表达模式与临床特征的关系及不同信号传导分子之间的关联。 材料与方法：选取了75例肺腺癌病人,标本收集时未进行任何治疗。病人年龄37-84岁,中位年龄为61岁；男性41例,女性34例；肿瘤直径≤3cm20例,>3cm55例；无淋巴结转移35例,有淋巴结转移的40例；有远处转移的5例,无远处转移的70例；高分化4例,中分化33例,低分化38例；TNMl期9例,TNM2期46例,TNM3-4期20例。采用免疫组织化学技术进行EGFR、DEC1、DEC2、HIF1α、STAT3及VEGF蛋白表达的检测,不同分子表达的阳性判定采用相应的评分标准；应用SPSS11.

4±0.35vs.1.3±0.19,P>0.05),但均低于ApoE-/-小鼠(10.34±1.62,P
目的探讨单纯疱疹病毒HSV-Ⅰ型载体介导白细胞介素1受体拮抗蛋白(IL-1Ra)对兔膝骨关节炎的局部治疗作用及机制。 方法48只新西兰大白兔随机分为手术造模组(n=24只)和假手术造模组(n=24只)采用改良Hulth法建立兔膝关节炎模型。构建单纯疱疹病毒Ⅰ型载体介导IL-1Ra表达的重组质粒(pHSV-IL-1Ra-LacZ)注射到实验兔模型关节腔,pHSV-LacZ空白载体设为对照。注射治疗后第1、4、8周和第12周,抽取关节腔滑膜液,采用双抗体夹心ELISA法分析IL-1Ra、IL-1的表达。第12周后取实验兔膝关节股骨内侧髁软骨和滑膜囊常规石蜡切片,HE染色和甲苯胺蓝染色检查病理改变,并进行大体标本评分和Mankin’s关节软骨病理组织学评分,评估pHSV-IL-1Ra-LacZ基因治疗兔膝关节炎的效果。体外原代培养关节软骨细胞,pHSV-IL-1Ra-LacZ转染细胞,流式细胞仪检测IL-1Ra过表达对关节软骨细胞的凋亡状态。不同浓度的细胞因子TNF-α(Ong/mL、5ng/mL、10ng/mL、15ng/mL、25ng/mL)刺激IL-1Ra过表达的关节软骨细胞,采用实时荧光定量PCR和Westernblot方法检测TNF-α刺激IL-1Ra过表达恢复的作用机制。分别用对应的信号通路特异性抑制剂阻断P38、ERK、JNK和P13K信号通路(U0126,SB203580,SP600125,LY294002),然后用荧光定量PCR和Western

点击此处 Blot检测相关炎症因子的表达变化水平。 结果手术成功造模后,手术造模组注射pHSV-IL-1Ra-LacZ后能明显持续抑制IL-1表达水平,且对膝关节软骨炎进展显著性抑制,大体评分结果显示,手术造模pHSV-IL-1Ra-LacZ治疗组较pHSV-LacZ治疗组差异存在显著性(2.21±1.05vs3.95±0.32,P<0.05),软骨组织评分结果显示pHSV-IL-1Ra-LacZ基因治疗组与对照组组兔滑膜相比(2.08±0.87vs3.89±0.12,P<0.05)。但对滑膜炎无明显治疗作用。体外原代培养兔膝关节炎模型关节软骨细胞,利用基因重组技术获得IL-1Ra过表达的细胞模型。在转染pHSV-IL-1Ra-LacZ后,我们采用流式细胞仪检测发现IL-1Ra过表达促进关节软骨细胞的凋亡,较pHSV-LacZ存在显著性差异(7.45±2.32vs2.76±0.87,P
目的和背景：目前，对于神经胶质瘤尤其是高度恶性的胶质母细胞瘤尚无较好的治疗方法。恶性脑胶质瘤化疗作为手术、放疗的补充近几年有所发展，然而，血脑屏障等脑组织结构的特殊性使之可选择的化疗药物较少，而且胶质瘤本身存在多重耐药，多方面的因素使得胶质瘤的化疗疗效低，对人类健康造成严重威胁，十分有必要探讨胶质瘤新的化疗药物及方案。环氧化物水解酶（solubleepoxide

hydrolase, sEH）抑制剂通过抑制sEH活性稳定体内环氧二十碳三烯酸（epoxyeicosatrienoic acids, EETs）的含量，具有抗炎症、治疗高血压的作用。有研究表明，sEH抑制剂具有潜在的抑制肿瘤生长作用。本研究采用一种性能更优的新型sEH抑制剂t-AUCB，以胶质瘤母细胞瘤细胞系U251和U87作为研究对象，探讨t-AUCB对高度恶性胶质瘤细胞的生物学作用，探索sEH抑制剂可能存在的抗胶质瘤作用。 方法和材料：(1) sEH抑制剂t-AUCB由美国加利福尼亚大学Davis分校的BruceD. Hammock教授惠赠，U251及U87细胞系由南京医科大学微生物与免疫学系姚堃教授惠赠。(2)利用sEH活性检测试剂盒，以Epoxy Fluor7作为sEH的底物，通过检测产物6-methoxy-2-naphthaldehyde的荧光度值来反应U251及U87细胞内sEH活性，并用同样方法检测t-AUCB对两种细胞内sEH活性的抑制作用。(3)用CCK-8法检测药物处理对细胞增殖的影响，并利用流式细胞仪检测药物处理对U251、U87细胞周期的影响以及对细胞凋亡的诱导情况。(4)

此网站 RT-PCR法检测相关基因mRNA的表达情况，Western blot法检测相关蛋白的表达水平以及相关蛋白的磷酸化水平。(5)利用SPSS13.0软件分析数据，数据用均值±标准差来表示。P
目的：响尾蛇毒素（crotoxin，简称CrTX）是南美响尾蛇Crotalus GSI-IX溶解度 durissusterrificus毒液的主要毒素，包括一个弱毒性的碱性成分PLA2（CB）和一个无酶活性无毒性的酸性成分（crotapotin，CA），它是一个异二聚体的β-神经毒素。CrTX经典的生物活性包括神经毒性、肌肉毒性、肾毒性和心脏毒性等，近年大量研究说明它还具有免疫调节、抗炎、抗微生物、镇痛和抗肿瘤等多种作用。多篇文献报道CrTX体内外都具有抗肿瘤活性，但是其分子机制尚未完全阐明。本文以SK-MES-1肺癌细胞为模型，从体外细胞和分子水平研究了CrTX的抗肿瘤作用及其机制。 方法：首先采用MTT法检测CrTX对SK-MES-1肺癌细胞的细胞毒作用，并采用平板克隆法检测CrTX对SK-MES-1细胞克隆形成能力的影响；采用流式细胞术检测CrTX对细胞周期的影响，Western blot检测PCNA蛋白水平的变化；采用Hoechst33258染色从细胞核形态观察细胞凋亡、Annexin V-FITC/PI双染定量凋亡率，并用Western blot检测Caspase-3蛋白的活性；采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3、p62和Beclin1的变化；Western blot检测CrTX给药后P-p38和p38蛋白水平的变化，引入p38MAPK特异性阻断剂SB203580（简称SB），用MTT法检测阻断p38MAPK通路对细胞生存率的影响；采用SB阻断p38MAPK通路，观察对CrTX诱导的细胞周期阻滞、凋亡以及自噬的影响。 结果：CrTX显著抑制SK-MES-1肺癌细胞的生长，并呈现浓度和时间依赖性效应，72h的IC50为25.13μg/ml；CrTX处理细胞48h，能明显抑制SK-MES-1肺癌细胞的集落形成能力（p
目的：研究mGlu受体在阿尔茨海默病早期病理机制中的作用，并探讨Aβ介导的突触可塑性调制中的神经元内Caspase、p38MAPK、TACE、mTOR等信号通路的作用，为发现新型的药物靶点、治疗阿尔茨海默病提供理论和实验依据。 方法：所有实验均在横切脑片的海马齿状回或CA1区进行。用3周龄wistar雄性大鼠快速断头后制成350微米脑片，并置于含有95%氧气饱和的人工脑脊液的孵育槽内，室温下孵育一小时，然后将脑片转移到记录槽中，在海马齿状回或CA1区，使用标准电生理技术记录场兴奋性突触后电位和LTD。记录的fEPSP峰值用pClamp软件分析，用基础水平的相对百分数形式表示LTD的幅度。LTD值以均数±标准误(means±S.E.M.

71g/(kg.d)(相当于临床用量的30倍),SMCL组灌胃给予舒脉胶囊342mg/(kg.d)(相当于临床用量的6倍),SMCH/LY组灌胃给予舒脉胶囊1.71g/(kg.d)(相当于临床用量的30倍),腹腔注射给予PI3K抑制剂LY294002(0.3mg/kg,溶解于双蒸水中,每3天给药一次),bFGF组给予贝复剂(bFGF),于开胸结扎冠脉后立即在结扎处周围予bFGF心肌注射1次(125IU),术后始皮下注射肝素1250U/kg,每日1次,连续5天。MIR组和Sham组分别灌胃给予等量蒸馏水。灌胃给药大鼠,均为每日1次,连续给药2周和4周。末次给药后禁食24 h,不禁水。10%水合氯醛,300mg/kg,腹腔注射麻醉后进行后续实验。

2.研究内容 (1)心功能检测;(2)Western blot检测缺血心肌VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达;(3)实时定量RT-PCR(Real-time Quantitative RT-PCR)检测缺血心肌VEGF、PDGF-BB mRNA表达;(4)检测缺血心肌微血管密度(小静脉:vWF免疫组化染色法,小动脉:αSMA免疫荧光染色法);(5)Masson染色检测缺血心肌胶原含量的变化。 结果 1.心功能检测 治疗第2周后,SMCH、SMCL、bFGF组的左室射血分数(LVEF)较MIR组显著增高(P＜0.05);SMCH与SMCL、bFGF组比较差异无显著性意义(P＞0.05)。SMCH、SMCL、bFGF组左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)较MIR组显著降低(P＜0.05)。应用SMCH+LY294002(SMCH/LY)较MIR组LVEF、LVESD、LVEDD无显著性差别(P＞0.05)。进一步组间两两比较发现,应用大剂量舒脉胶囊组(SMCH)明显高于SMCH/LY组(P＜0.05)以及Sham组(P＜0.05)、MIR组(P＜0.05)。SMCH组较bFGF组或应用小剂量舒脉胶囊组(SMCL)LVEF、LVESD、LVEDD无显著性差异(P＞0.05)。 不 治疗第4周后,SMCH、SMCL、bFGF组的LVEF较MIR组显著增高(P＜0.05);LVESD、LVEDD较MIR组显著降低(P＜0.05)。但应用SMCH+LY(LY294002)较MIR组LVESD、LVEDD无显著性差异(P＞0.05);但LVEF较MIR组升高。进一步两两比较分析,SMCH组与bFGF组差别无统计学意义,SMCH治疗组较SMCL或SMCH/LY的LVEF、LVEDD显著增高(P＜0.05)。SMCH组较SMCL组LVESD无显著性差别(P＞0.05)。

2.Western blot检测分析 治疗第2周后,SMCH、SMCL、bFGF组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达较MIR组显著升高(P＜0.05)。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达与MIR组差异无显著性意义(P＞0.05)。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组与bFGF组或SMCL组之间差别无统计学意义(P＞0.05)。SMCH组较SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达明显增高。治疗第4周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达较MIR组显著升高(P＜0.005)。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达与MIR组差异无显著性意义(P＞0.05)。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组较bFGF组或SMCL组或SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白增高。与治疗2周后比较,SMCH组、SMCL组、bFGF组治疗4周后VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达降低。 可能 3.实时定量RT-PCR(Real-time Quantitative RT-PCR)检测 治疗第2周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组VEGF、PDGF-BB mRNA表达较MIR组显著升高(P＜0.05)。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB DNA Methyltransferase 抑制剂 mRNA表达与MIR组差异无显著性意义(P＞0.05)。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组与bFGF组或SMCL组之间差别无统计学意义(P＞0.05)。SMCH组较SMCH/LY组VEGF、PDGF-BBmRNA明显增高(P＜0.05)。治疗第4周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组VEGF、PDGF-BB

mRNA表达较MIR组显著升高(P＜0.05)。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BBmRNA表达与MIR组差异无显著性意义(P＞0.05)。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组较SMCL组或SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB mRNA增高。与治疗2周后比较,SMCH组、SMCL组、bFGF组治疗4周后VEGF、PDGF-BB mRNA表达降低。 4.缺血心肌微血管密度(小静脉、小动脉)的测定 治疗2周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组的毛细血管密度均较MIR组明显增高。SMCH/LY组毛细血管密度与MIR组差异无显著性意义(P＞0.05)。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组与bFGF组之间差别无统计学意义。SMCH组(36.93±5.49)较SMCH/LY组毛细血管密度明显增高。SMCH组、SMCL组、bFGF组的小动脉密度均较MIR组(17.76±5.19)明显增高。SMCH/LY组小动脉密度与MIR组差异无显著性意义。组间两两比较分析表明,SMCH组的小动脉密度显著高于SMCL(P＜0.05)或SMCH/LY(P＜0.05)组以及Sham组(9.44±2.68)(P＜0.05)。SMCH组与bFGF组之间差别无统计学意义(P＞0.05)。 治疗4周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组的毛细血管密度均较MIR组明显增高(P＜0.05)。SMCH/LY组毛细血管密度与MIR组差异无显著性意义。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组毛细血管密度较SMCH/LY组、SMCL组、bFGF组明显增高(P＜0.05)。SMCH组、SMCL组、bFGF组的小动脉密度均较MIR组明显增高(P＜0.05)。组间两两比较分析表明,SMCH组的小动脉密度显著高于SMCL(P＜0.05)或SMCH/LY(P＜0.05)组以及Sham组(P＜0.05)。PI3K抑制剂LY294002显著抑制了舒脉胶囊所致的毛细血管和微动脉的新生,说明PI3K信号通路介导舒脉胶囊促血管新生。 5.

165～10mg/L的17-AAG作用24 h、48 h后对MCF-7细胞有显著的抑制作用;1.0、2.0、3.0、5.0 mg/L的17-AAG作用48 h后,各组细胞STAT3、VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达均下调,且具有浓度依赖性;Tran-swell小室检测显示17-AAG处理后穿膜细胞数明显减少,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P
携带表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因活性突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)晚期患者使用EGFR-受体酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗后具有较好的临床获益,但大部分患者在使用该药治疗10个月后出现耐药现象。研究发现EGFR基因20号外显子T790M基因突变是导致EGFR-TKI耐药的最主要因素,但其作用机制至今未明。目前的研究结果显示T790M基因突变是一个独立的、好的预后因素,但其能否作为EGFR-TKI的疗效预测因子仍存在争议。近年来,针对NSCLC肿瘤中T790M基因突变的检测技术不断更新,针对T790M耐药的新的治疗策略也不断涌现。本文就NSCLC中T790M基因突变的耐药机制、临床意义、检测方法及应对策略等方面的最新研究进展进行综述。
目的探讨热休克蛋白90(HSP90)在进展期胃癌组织中的表达情况,并分析其与胃癌侵袭、转移及预后的关系。方法采用免疫组化染色法检测157例进展期胃癌组织中HSP90的表达情况,并分析HSP90表达与胃癌临床病理特征及预后的关系。结果胃癌组织中HSP90高表达率为68.2%(107/157)。HSP90表达与肿瘤大小、肿瘤部位、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.001)。157例进展期胃癌患者的中位无复发生存时间(RFS)为27.0个月,中位总生存时间(OS)为33.0个月;HSP90低表达患者的中位RFS和OS均为60.5个月,而HSP90高表达者分别为15.0个月和20.0个月(P均<0.001)。Cox多因素分析显示,HSP90表达为影响胃癌预后的独立因素(P
为了进一步推动中国肺癌研究的发展,中国抗癌协会肺癌专业委员会和中国抗癌协会临床肿瘤学协作专业委员会于2013年3月8-9日在广州举行了第十届中国肺癌高峰论坛。此次会议的主题是肺癌小分子靶向药物的耐药机制和应对策略。来自全国各地从事肺癌和相关学科研究的600多位专
目前对胃癌中人表皮生长因子受体(2HER2)的预测价值存有争议。当前的治疗指南已经把检测胃癌中HER2状态作为标准化操作。最近,在治疗HER2阳性进展期胃癌中,曲妥珠单抗已经成为一线靶向治疗用药,而原发与继发性药物抵抗则成为主要问题,需要新的治疗策略来克服这种抵抗。许多HER2阳性进展期胃癌患者在接受曲妥珠单抗治疗后都出现疾病进展,必须接受二线方案治疗。新的靶向药物,诸如酪氨酸激酶抑制剂(TKI)拉帕替尼、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路抑制剂依维莫司、热休克蛋白90(HSP90)抑制剂AUY922、HER二聚化抑制剂帕妥珠单抗以及抗体-药物偶联物曲妥珠单抗-emtansine(T-DM1),在以曲妥珠单抗为基础的一线治疗失败时可以成为二线治疗用药。
2013年3月8-9日,中国抗癌协会肺癌专业委员会和中国抗癌协会临床肿瘤学专业委员会(Chinese

点击此处 这个 购买Tariquidar Society of Clinical Oncology,CSCO)联合主办了第十届”中国肺癌高峰共识会”,来自全国的600多位专家,讨论了肺癌小分子靶向药物的耐药机制和应对策略。专家们认为,小分子靶向药物是肺癌治疗史上的里程碑事件,但其无可避免
目的研究格尔德霉素对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度格尔德霉素与人肝癌HepG2细胞共培养,采用MTT法检测增殖抑制率;采用流式细胞术Annexin V法检测细胞凋亡率。结果在0.2、0.4和0.8μmol/L浓度下,格尔德霉素均显著抑制HepG2细胞的增殖,在干预细胞48h后,其抑制率分别为20.36%、29.45%和42.52%,抑制率随药物浓度增加而升高;同时,细胞凋亡率分别为4.82%、24.47%和53.64%,也呈剂量依赖性,与相应对照组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论格尔德霉素可抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导其调亡。
Globally,gastric cancer is the 4thmost frequently diagnosed cancer and the 2ndleading cause of death from cancer,with an estimated 990000 new cases and738000 deaths registered in 2008.

68,8.67,9.11,8.95,6.70和6.91,克唑替尼为8.67。以化合物SMU-B为例,c-Met激酶的ATP口袋能够很好地接纳SMU-B,并与其形成多个包括氢键、π-π堆积作用、范德华力等相互作用。在c-Met激酶晶体结构中,SMU-B能与克唑替尼很好地叠合,除了靠近溶剂区的部分,SMU-B与克唑替尼几乎达到完美的重叠一致。此外,SMU-B也能与ALK激酶晶体结构的ATP口袋很好地对接。由此预测,SMU-B应该具有对c-Met和ALK激酶的双重抑制作用。于是,我们合成了六个SMU系列的螺环化合物拟进行下一步的研究。

Histone Demethylase inhibitor 二.SMU系列螺环化合物对c-Met和ALK激酶高选择性活性的确认 为了验证上述计算机分子模拟的结果,我们首先检测了化合物对细胞中c-Met激酶活性的影响。结果发现,六个化合物对MKN45胃癌细胞中c-Met激酶有显著抑制活性,IC50值依次为0.020,0.019,0.023,0.012,>10和9.0μM,克唑替尼为0.020gM,与计算机分子对接模拟的预测一致。进一步对上述化合物的生物利用度研究结果表明,SMU-B的口服生物度达到48%,因此确定该化合物进入下一步研究。 首先采用美国KINOMEscanTM公司的激酶高通量筛选技术,评价了SMU-B对人96种蛋白激酶生化活性的影响,发现SMU-B在100nM浓度下仅对c-Met,ALK和AXL三种受体酪氨酸激酶活性有显著的抑制活性,抑制率分别为94.4%,91.2%和95.4%,表明SMU-B对受体酪氨酸激酶家族的c-Met、ALK和AXL三种蛋白激酶表现出高选择性。然后,采用美国Reaction BiologyCorporation的放射蛋白激酶活性检测方法进一步测定了SMU-B对三种激酶生化活性抑制的IC50值。结果表明,SMU-B对c-Met, ALK和AXL三种激酶生化活性都有显著的抑制作用。在激酶底物ATP的存在下,c-Met酶生化活性抑制的IC50值为1.87nM,ALK的IC50值10μM。上述SMU-B在体外抗c-Met异常细胞增殖的筛选结果为下一步体内抗肿瘤实验提供了初步的依据。 四.SMU-B抑制c-Met异常的人GTL-16胃癌,U87MG脑胶质瘤和H441肺癌裸鼠异体移植瘤的生长 根据体外抗增殖作用的结果,我们采用肿瘤异体移植裸鼠模型进一步评价了SMU-B对c-Met扩增的人胃癌GTL-16细胞,c-Met高表达的人肺癌H441细胞以及有HGF自分泌功能的人脑胶质瘤U87MG细胞的生长抑制作用。结果发现,SUM-B虽然对上述三种c-Met异常的人肿瘤裸鼠异体移植瘤都有显著的抗肿瘤作用,但在裸鼠体内的作用与体外抗增殖结果不完全一致。SMU-B以20mg/kg口服灌胃给药一日一次连续14天,GTL-16胃癌的抑瘤率为56.6%,当剂量增加至40mg/kg时,抑瘤率增加至84.8%；在相同剂量下,对H441的抑瘤率分别为58.9%和78.7%,对U87MG的抑瘤率分别为60.7%和92.3。SMU-B在体外抑制U87MG细胞增殖的IC50值>101.tM,高于GTL-16和H441细胞,但在裸鼠体内的抑瘤作用却比二者好。

ARRY-162分子重量 五.SMU-B抑制HGF诱导的人肺癌A549细胞的迁移和侵袭作用 由于HGF/c-Met具有增加肿瘤细胞移动和侵袭的能力,我们以外源性HGF诱导c-Met激活的人A549肺癌细胞为模型,研究SMU-B对HGF诱导的A549细胞的迁移和侵袭的影响。A549细胞在正常条件下表达低水平的c-Met,仅在外源性HGF的刺激下c-Met才能被激活发生磷酸化,诱导细胞的移动和迁移。我们的细胞迁移实验结果表明,在无HGF刺激时,A549细胞基本上不发生迁移,但在培养细胞中加入25ng/mL

HGF作用48h后,能诱导肿瘤细胞发生移动；在此模型基础上同时加入不同浓度的SMU-B后,能明显抑制肿瘤细胞的移动。此外,细胞侵袭实验结果也表明,在无HGF刺激下,大量A549肿瘤细胞穿过滤膜,表现出明显的侵袭特性,SMU-B能显著抑制HGF诱导的肿瘤细胞的穿膜运动,显示化合物具有抗肿瘤细胞侵袭和迁移的作用。 六.SMU-B在体外能显著抑制外源性HGF诱导的A549肺癌细胞c-Met.AKT及ERK1/2蛋白的磷酸化；也能在体外抑制GTL-16胃癌细胞和在体内抑制GTL-16胃癌裸鼠异体移植瘤的c-Met、AKT和ERK1/2蛋白的磷酸化,通过抑制c-Met信号通路发挥抗肿瘤作用 为了探讨SMU-B对c-Met异常肿瘤产生抗肿瘤作用时,是否同时能抑制c-Met和下游信号分子的激活,我们以外源性HGF激活的A549肺癌和c-Met扩增的GTL-16胃癌细胞模型,研究了化合物对c-Met及其下游介导细胞增殖的信号分子AKT(蛋白激酶B)和介导细胞存活的信号分子ERK1/2(extracellular GSK2606414 signal-regulated kinase)的磷酸化的影响。我们发现,A549细胞在HGF的作用下,c-Met, AKT和ERK1/2的磷酸化明显增加；SMU-B能显著抑制HGF诱导的c-Met、AKT及ERKl/2蛋白的磷酸化。同样,SMU-B也能在体外抑制GTL-16胃癌细胞c-Met的磷酸化以及抑制GTL-16裸鼠异体移植瘤c-Met、AKT以及ERK1/2蛋白的磷酸化。上述结果表明,SMU-B通过抑制裸鼠移植肿瘤的c-Met信号通路发挥抗肿瘤作用。 结论 1.本文在设计和合成的一系列3-位苄氧基取代的2-氨基吡啶化合物中,首次发现SMU-B对c-Met生化和细胞激酶活性抑制的IC50值分别为1.87nM和22nM,对ALK激酶生化和细胞活性抑制的ICso值分别为10μM抑制作用较弱。 3.SMU-B对c-Met扩增的人胃癌GTL-16,c-Met高表达人肺癌H441以及HGF自分泌的脑胶质瘤U87MG细胞三种裸鼠异体移植肿瘤有显著的抗肿瘤生长作用。化合物在20mg/kg和40mg/kg给药时,对U87MG的抑瘤率分别为60.7%和92.3%,对GTL-16为56.6%和84.8%,而对H441的抑瘤率为58.8%和78.7%,具有比较强的抗肿瘤作用。 4. SMU-B在体外能抑制外源性HGF诱导的人A549肺癌细胞的迁移和跨膜移动,具有抗肿瘤细胞的迁移和侵袭作用。 5.

比较伊马替尼(M)治疗新诊断组和干扰素治疗失败或者不耐受组的慢性髓性白血病患者的原发和继发性细胞遗传学耐药差异。 3.比较在CML的早期慢性期(early chronic phase,ECP)、晚期慢性期(late chronic phase,LCP)接受IM治疗的新诊断组和干扰素治疗失败或者不耐受组之间的疗效差异,包括6个月时的部分细胞遗传学缓解率、达到完全细胞遗传学缓解的平均时间、获得完全分子生物学反应率。

4.比较伊马替尼(IM)治疗新诊断组和干扰素治疗失败或者不耐受组的慢性髓性白血病患者的毒副作用差异,包括血液学和非血液学毒副反应。 方法 收集86例应用400mg/天IM治疗的CML-CP患者临床资料,分为两组,其中新诊断组患者61例,IFNa治疗失败或不耐受(统称为干扰素α治疗失败组)组患者25例。采用R显带技术和定量实时PCR检测细胞遗传学和bcr-abl融合基因。对两组患者应用IM治疗后疗效差异、耐药情况及药物毒副反应程度(包括血液学毒性和非血液学毒性)应用统计学方法进行分析比较。 什么 结果 1.新诊断组中,有50/61例(83%)患者IM治疗6个月时就获得部分细胞遗传学缓解(PCyR),而干扰素α治疗失败组仅为9/25例(36%),两组之间有显著差异(P0.05)。但新诊断组达到CCyR的中位时间为3.2个月(2.9-5.1个月)、干扰素α治疗失败组达到CcyR的中位时间为12.1个月(5.5-16.5个月),两组之间有显著差异(P0.05)。但新诊断组达到CCyR的中位时间为6.3个月(4.9-7.7个月)、干扰素α治疗失败组为17.0个月(5.9-28.8个月),两组之间有显著差异(P
食管癌(Esophageal Cancer)是世界上发病率和致死率较高的肿瘤之一,化疗是食管癌晚期病人的主要治疗手段。顺铂(Cisplatin,CDDP)是一种传统的食管癌化疗药物,能够抑制癌细胞DNA的复制,破坏其细胞膜结构,引起细胞DNA损伤,但是它具有对细胞毒副作用大,选择性差以及容易诱导产生耐药等局限,难以满足临床上病人的需求。因此,开发新型的分子靶向药物,探索高效低毒的食管癌药物治疗方式对食管癌病人的治疗是非常重要的。热休克蛋白90(Heat shock protein 90,Hsp90)在食管癌细胞系和食管癌组织中都特异性高表达,提示Hsp90可能是食管癌分子靶向治疗的新型靶点。SNX-2112是一种新型的Hsp90选择性抑制剂,能够显著抑制Hsp90的功能。本论文旨在研究SNX-2112与临床药物CDDP联合作用对食管鳞癌细胞生长的影响并初步阐明其作用机制,为推动SNX-2112成为临床抗食管癌药物,以及SNX-2112增强CDDP抗食管癌的效果提供理论基础。本研究采用MTT法检测SNX-2112与CDDP联用对2株食管鳞癌细胞的生长抑制作用,并计算其联合作用指数combined

有 还有 index(CI),PI单染和Quantitative Real-time PCR检测SNX-2112和CDDP联用后细胞周期及周期相关基因的变化,Annexin V/PI双染色法和Western blot检测细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达与活化,采用激光共聚焦和Western blot观察和检测两药联用后对DNA损伤及损伤修复相关蛋白影响,构建裸鼠移植瘤模型检测SNX-2112与CDDP联用体内抗食管癌效果及初步的机制研究。结果表明SNX-2112和CDDP两药联合后能够显著的抑制食管癌细胞增殖,大部分的两药联合作用系数(CI)<0.01),SNX-2112与CDDP联用在裸鼠体内能够促进食管癌发生凋亡,并且增强体内的DNA损伤。结论:Hsp90抑制剂SNX-2112在体内外都能够促进CDDP对食管癌的增殖的抑制作用,并且能够促进CDDP诱导的食管癌细胞发生凋亡。SNX-2112通过增强CDDP诱导的DNA损伤,抑制DNA损伤修复来促进食管癌细胞的凋亡。
SNX-2112是近几年筛选出的一种新型Hsp90抑制剂,它可以特异性与Hsp90家族ATPpocket结合,抑制Hsp90活性,诱导Hsp90受体蛋白降解,最终导致肿瘤细胞的凋亡,是一种具有开发前景的抗肿瘤药物,但SNX-2112作用的具体分子机制不详。

本研究以人慢性髓细胞白血病细胞系K562为细胞模型,采用MTT法、Annexin-v/PI荧光染色法、流式细胞技术和Western Blot等方法,检测SNX-2112对K562细胞增殖、凋亡及caspase家族蛋白质表达的影响,结果表明SNX-2112(0.05-10μM)可以抑制K562细胞的增殖(IC_(50)=0.92μM)并诱导其凋亡(凋亡率为10.6±2.1-75.8±7.4%)。在0.1-10μM范围内SNX-2112可以引起caspase-3,9和PARP前体活化,具有剂量依赖性。 利用全基因组表达谱芯片对1μM SNX-2112作用48 h后K562细胞的全基因组cDNA表达进行了检测,G0分析发现229个基因(占检出基因的10.75%)与线粒体功能有关,尤以线粒体代谢相关基因显著(占62.

Indeed,the key point is still the selection of patients for the right treatment,on basis of molecular tumor characterization.Since chemotherapy reached a plateau of efficacy for gastric cancer,the combination between cytotoxic therapy and

biological agents gets a better prognosis and decreases chemotherapeutic toxicity.Currently,Trastuzumab in combination with platinum and fluorouracil is the only approved targeted therapy in the first line for c-erb B2 positive patients,whereas Ramucirumab is the only approved targeted agent for patients with metastatic gastric cancer.New perspectives for an effective treatment derived from the immunotherapeutic strategies.Here,we report an overview on gastric BMS-754807 cancer treatments,with particular attention to recent advances in targeted therapies and in immunotherapeutic approach.
肺鳞癌是最主要的肺癌病理类型之一,经手术、放化疗等综合治疗后,其5年生存率仍低于15%。近年来,肺鳞癌的分子靶向治疗取得较大进展,潜在治疗靶点及相应靶向药物不断被发现并应用于临床前期阶段,如PI3K/AKT/m TOR通路及其抑制剂、表皮生长因子受体(EGFR)及EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)、纤维母细胞生长因子受体1及其抑制剂、DDR2及其抑制剂、胰岛素样生长因子受体1及其抑制剂等,使肺鳞癌的个体化靶向治疗成为可能,但仍需验证这些药物的临床疗效与安全性。
目的:为逆转三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)介导的肿瘤多重耐药提供理论参考,更好地服务于新药开发及临床合理用药。方法:以”ABCG2″”多重耐药”"耐药逆转”为关键词检索近几年中国知网、万方数据库、PubMed数据库(关键词为相对应的英文),对所获得的文献进行整理、归纳和分析,综述ABCG2对多药耐药的作用及如何逆转耐药。结果与结论:ABCG2表达水平与肿瘤化疗效果有密切关系,其过表达可使多种抗癌药物外排最终导致多重耐药。目前逆转ABCG2介导的多重耐药成为国内外医药工作者热衷研究的方向。
虽然免疫抑制剂和蛋白酶体抑制剂的应用使多发性骨髓瘤治疗领域在过去10年取得了显著进展,但该疾病仍是预后差且5年存活率最低的癌症之一。多发性骨髓瘤目前仍不可治愈,甚至连有效地维持缓解都极为困难。复杂的临床表现、多样的治疗选择以及长期、大规模比较研究数据的缺乏导致这一疾病的治疗变得更加复杂。新一代治疗药物在疗效和耐受性方面均有显著提高,并且已通过加快审批通道进入市场,用于曾接受过多次既往治疗的患者,治疗复发性/难治性多发性骨髓瘤,但目前还未获得其完整的存活率数据。在基因组学领域,已开始对患者进行更加个体化的预后和治疗,然而这一领域还仅仅处于起步阶段。随着多发性骨髓瘤发生机制的进一步阐明以及竞争前研究合作的进一步加强,希望能够在这一治疗需求远远未被满足的领域快速研发出新一代靶向治疗药物。
Gastric

NVP-BKM120购买 cancer is the second leading cause of cancerrelated deaths worldwide.Conventional cytotoxic chemotherapy has limited efficacy for metastatic gastric cancer,with an overall survival of approximately ten months.Recent advances in high-throughput technologies have enabled the implementation of personalized cancer therapy for high-risk 或者 patients.The use of such high-throughput technologies,including microarray and next generation sequencing,have promoted the discovery of novel targets that offer new treatment strategies for patients lacking other therapeutic options.Many molecular pathways are currently under investigation as therapeutic targets in gastric cancer,including those related to the epidermal growth factor receptor family,the mesenchymal-epithelial transition factor axis,and the phosphatidylinositol 3-kinase-AKTmammalian target of rapamycin factors.Advances in molecular diagnostic tools further support the discovery of new molecular targets.Limitations exist,however;not all patients can be tested for biomarkers,and numerous challenges hamper implementation of targeted therapy in clinical settings.