6±1.076 %（与对照组比较P
目前，恶性肿瘤依然是威胁人类生命的主要杀手，而且随着抗生素和免疫抑制剂的大量应用等原因，深部真菌感染也逐渐成为许多疾病死亡的原因，所以，世界各国都投入大量的人力、财力，加强对抗肿瘤、抗真菌药物的研究。海洋由于其生态环境和生物多样性与陆地有很大差别，已成为新药开发的宝贵资源；而红树林作为一种特殊的海洋生态环境，是一类尚未很好地开发和利用的微生物资源库和新化合物库。

本文在国家海洋863课题和国家自然科学基金的资助下，以福建省的红树林植物为研究对象，分离红树植物内生真菌，并在菌株鉴定基础上分离纯化其代谢产物，研究化合物的抗菌、抗肿瘤活性，试图为红树植物内生真菌资源的开发和利用提供依据。 我们从福建九龙江口浮宫镇红树植物桐花树树皮分离获得两株内生真菌。经鉴定，HTF3菌株为小穴壳菌属(Dothiorella sp．)，HTF5菌株为小孢盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)，这是首次从红树植物中分离到这两种内生真菌。我们还首次测定了Dothirella sp．的ITS序列并正准备在GenBank中登记注册。 从两个菌株的发酵液中共分离纯化得到10个单体化合物，应用NMR谱和MS谱对化合物进行结构解析，发现从HTF3菌株中分离的5个单体化合物中有4个是未见报道的新结构化合物：2-[3’，5’-二羟基-2’-(7’-羟基)辛酮基苯基]-乙酸乙酯(dothiorelone 许多 A)、2-[3’，5’-二羟基-2’-(6’-羟基)辛酮基苯基]-乙酸乙酯(dothiorelone B)、2-[3’，5’-二羟基-2’-(8’-羟基)辛酮基苯基]-乙酸乙酯(dothiorelone

C)和6，8-二羟基-1(R)(5’-羟己基)-异苯并二氢吡咯-3-酮(dothiorelone D)。另一个虽为已知的cytosporone B(dothiorelone E)，但为我们首次从红树林内生真菌中分离获到。活性检测 一摘要一 中发现5个化合物均表现出不同程度的抗肿瘤活性，其中dothioreloneE活 性最强且有较广的肿瘤谱。这5个化合物均没有抗细菌活性，但dothiorelone E有较强的抗真菌活性，真菌谱较广，且产量达到10mg/L，有作为药物开 发的前景。该成果已申请专利并已公开。本文还分析了类似化合物的结构 与活性的关系，并对可能的作用机理进行了讨论。 从内生真菌HTFS菌株发酵液和菌体中共分离出5个单体化合物，其中 有3个酚类物质，这是首次报道从红树内生真菌代谢物中同时分离到这三 种多酚化合物，推测它们是作为芳香化合物的代谢中间物被分离到的，所 以HTFS菌株可能具有分解芳香化合物的独特能力。从菌体中分离到的2个 脂类物质可能是组成细胞膜的成分。 本文的研究结果表明，红树林内生真菌确是一类值得更好地开发的真 菌资源，是新颖结构和新生理活性的次级代谢产物的一个重要来源。
第一章 地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡体外模型建立及形态学研究 目的：建立地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡体外模型并且进行凋亡形态学研究。方法：以地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型，通过流式细胞术、电镜和荧光显微镜测定模型的稳定性。结果：仅在完全RMPI PCI-24781化学结构 1640培养基培养条件下小鼠胸腺细胞自发凋亡百分率为(2.90±0.62)％，在2.5 μmol／L DEX诱导下，3小时培养组(12.70±2.44)％、6小时培养组(53.55±4.59)％发生了细胞凋亡；在1μmol／L DEX诱导下，小鼠胸腺细胞在3h、5h和7h凋亡比率分别为(18.43±0.30)％、(37.85±1.46)％和(62.53±1.81)％，对照组分别为(4.05±0.29)％、(4.81±0.24)％和(7.77±0.31)％，组间差异显著(p＜0.01)；相同时点下，DEX组坏死比率分别为(1.20±0.08)％、(3.99±0.31)％和(6.46±0.81)％，对照组分别为(0.93±0.10)％、(1.27±0.22)％和(1.55±0.19)％，组间差异显著(p＜0.01)。形态学和荧光显微观察到典型的细胞凋亡现象。结论：建立了体外DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡定量模型，并且发现影响模型稳定性的主要因素包括实验动物、温度、机械损伤和操作时间等。

GSK2118436 第二章 地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中MAPK相关信息通路研究 目的：研究在DEX影响小鼠胸腺细胞MAPK相关信号变化特点，以进一步探讨DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中的作用机制。 方法：分别用终浓度为10、25和50μmol／L的ERK1／2特异性阻断剂PD98059(PD)以及10μmol／L的p38特异性阻断剂SB203580(SB)单独和联合1μmol／L的DEX作用小鼠胸腺细胞，并通过Annexin V-FITC／PI双染流式细胞术测定3 h、5 h和7 h凋亡和坏死细胞比率；以终浓度1μmol／L的DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡，利用SDS-PAGE及Western blot检测0、30、60和180 min细胞内ERK1／2、p38、JNK1／2、c-Myc和caspase-3信号变化特点。 结果：分别在终浓度10、25和50μmol／L的PD单独刺激下，小鼠胸腺细胞凋亡比例在3、5和7 h时点均显著高于对照组(p＜0.01)，而且表现出PD剂量依赖型诱导小鼠胸腺细胞凋亡趋势；各组坏死比例均高于对照组。 在终浓度10、25和50μmol／L PD和1μmol／L DEX联合刺激下，小鼠胸腺 细胞凋亡坏死进程明显提高，结果显示PD加速DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡。 SB10林mol/L单独刺激下，小鼠胸腺细胞凋亡比例在3、5和7h时点均显 著高于对照组(p0.05)，而从sh (660.91土72.95)开始显著低于对照组(P0.05)。而在11、24和27 h，对照组△wm分别为(256.41士21.59)、(214.14士23.21)和(146.14士17.