植物细胞质雄性不育(Cytoplasmic Male Sterility, CMS)广泛应用于作物杂交育种及核质互作的分子机理研究。在缺乏线粒体遗传转化技术手段前提下，为了研究线粒体ATP合成酶基因敲除对烟草花粉育性的影响，本试验以烟草核基因atp2为研究对象，构建烟草atp2基因CRISPR/Cas9载体并进行遗传转化。结果表明，人工合成的烟草atp2Sotrastaurin基因20 bp靶序列连接入CRISPR/Cas9载体，通过农杆菌介导叶盘转化，获得8个PCR鉴定为转基因阳性的烟草株系；初步观察发现烟草atp2基因编辑T0代植株花期延迟，花冠合并，花瓣、雄蕊、雌蕊数目加倍；花粉染色结果显示atp2基因编辑植株crisp-3、crisp-4、crisp-21、crisp-22的花粉育性分别为23.60%、30.0RalimetinibDMSO溶解度3%、29.73%和24.77%，显著低于未编辑植株花粉育性92.83% (p＜0.01)；T1代转化植株表现出叶片皱缩和失绿的突变表型特征。本试验为开展烟草atp2基因敲除功能分析，以及利用基因工程创造烟草雄性不育系，奠定了后期的研究工作基础。
为研究上海进口水产品中副溶血性弧菌的耐药性、关键毒力基因携带情况以及遗传进化关系，为17-DMAGDMSO溶解度其科学预警和溯源提供数据支持，本研究针对2017-2019年从上海口岸进口水产品中分离的68株副溶血性弧菌，分析其抗生素敏感性、关键毒力基因携带情况和多位点序列分型。副溶血性弧菌对氨苄西林耐药率最高(98.53%)，对其余抗生素耐药率相对较低，对左氧氟沙星和氯霉素均敏感。对9种抗生素中介耐药，其中氨基糖苷类、哌拉西林、环丙沙星和头孢西丁中介耐药率较高。20.59%菌株耐2种及以上抗生素。发现1株携带trh，均不携带tdh。

为解决这些问题，文中提出一种对SpCas9的定向进化突变体xCas9进行优化的理性方法。首先，使用Rosetta程序进行能量最小化以优化Cas9的三维结构，获得其能量最低的构象；然后，对其定向进化所得氨基酸位点进行组合突变设计；最后，通过自由能排序从设计突变体中筛选出用于实验验证的最优变体。经DNA剪切实验验证，成功地获得了一个多PAM识别和低点击此处脱靶的新变体yCas9 (262A/324R/409N/480K/543D/694L/1219T)。该变体可识别NG、GAA和GAT序列，且其由错配sgRNA引导的脱靶DNA剪切活性低，为生物医学领域提供了一个有潜在应用价值的基因编辑工具。同时，文中还对SpCas9、xCas9和yCas9进行了分子动力学模拟，揭示了其一般PAM识别和脱靶效应的机理，可为进一步的CRISPR/Cas9蛋白优化改造提供理论指导。
原发性家族性脑钙化症(primary familial brain calcification, PFBC)是慢性进展性的神经系统遗传病,临床症状主要包括运动障碍、认知障碍及精神障碍等,其致病机制尚未完全明确。研究表明SLXH254LC20A2是该病最主要的致病基因。由于Slc20a2基因全身性敲除小鼠模型会导致胎儿生长受限,为更好地研究PFBC发病机制,本研究应用CRISPR/Cas9技术构建了纹状体Slc20a2基因条件性敲除小鼠模型。首先,针对Slc20a2基因编码区,设计3条靶向exon3的sgRNA (single guide RNA),通过构建质粒、转染细胞、Surveyor assay等实验验证sgRNA的活性。

结果研究组和对照组患者的各项基线资料比较差异均无统计学意义(P均>0.05),研究组实施干预后中老年糖尿病患者的FPG及2hPBG值均低于对照组,且自我管理能力总分高于对照组(P均<0.05)。结论 LCD联合MI的健康管理模式能够改善社区老年2型糖尿病患者的FPG和2hPBG,提升患者的自我管理能力,可在社区推广。
目的观察利拉鲁肽对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精4EGI-1半抑制浓度性脂肪肝(NAFLD)患者内质网应激(ERS)的影响,并分析其临床疗效。方法选取我院2017年6月—2019年2月收治的T2DM伴发NAFLD患者144例,使用数字表法随机分为对照组和观察组,每组72例。对照组给二甲双胍,0.5g/次,2次/d,观察组给予利拉鲁肽,0.6mg/d,连用1周,以后1.2 mg/d,疗程12周。使用荧光定量PCR法检测内质网Selleck应激蛋白(CHOP)、激活转录因子6(ATF6)和分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因表达。比较两组临床疗效和不良反应。结果治疗前两组FBG、2 h PBG、HbA1c、HOMA-IR、TG、TC和LDL-C无显著性差异(P>0.05),治疗后观察组FBG、2 h PBG、HbA1c、HOMA-IR、TG、TC和LDL-C显著低于对照组(P<0.GSK3235025细胞系05)。治疗前两组CHOP、ATF6和GRP78基因表达2-△△Ct值无显著性差异(P>0.05),治疗后观察组CHOP、ATF6和GRP78基因表达2-△△Ct值显著低于对照组(P<0.05)。观察组临床治疗有效率为81.9%(59/72),显著高于对照组的62.5%(45/72)(P<0.05)。对照组不良反应发生率为2.8%(2/72),观察组不良反应发生率为4.2%(3/72),两组不良反应发生率无显著性差异(P>0.05)。

用蛋白质印迹法检测Kca3.1蛋白在HepG2细胞中的表达;用细胞迁移侵袭实验和细胞划痕实验检测HepG2细胞的迁移能力。结果 KCa3.1钾通道蛋白在HepG2与LO2细胞(正常肝细胞)中的相对表达量为1.49±0.24,0.74±0.16,两者间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白组、TRAM-34组和联合组的HepG2细胞的SIS3订单迁移能力(Transwell实验,光密度值)分别为0.28±0.01,0.20±0.04和0.26±0.05;TRAM-34组与空白组、联合组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TRAM-34可明显抑制HepG2细胞的迁移能力,但EBIO可部分抵消此抑制作用;划痕实验也证实了这一趋势。结论阻断KCa3.1很少钾通道可抑制HepG2细胞的迁移。
林丽珠认为恶性肿瘤并发黄疸与一般内科疾病所致黄疸不同,结合黄疸与肝胆癌瘤两类疾病的病因病机特点,恶性肿瘤并发黄疸的病因病机为肝胆瘀热,可从血分论治,化湿祛瘀以退黄为辨治之本。辨阴阳为辨治关键,阳黄者应以清热化湿、凉血祛瘀为法,阴黄者应以温阳健脾、养血活血为法;辨病与更多辨证相结合为辨治精髓,遣方用药时需辨清癌种、疾病分期、脏腑气血、正邪进退等变化。治疗之本应归结于原发性癌瘤,林丽珠提倡分期论治原发性肝癌。
目的 观察经肝动脉灌注中药榄香烯乳栓塞治疗原发性肝癌肝郁脾虚、瘀毒内结证的临床疗效和安全性。方法 将60例原发性肝癌患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。治疗组采用中药榄香烯经肝动脉灌注栓塞术治疗,对照组采用化疗药物经肝动脉灌注栓塞术治疗。

结论天然来源的Sal B可发挥抗血管内皮细胞氧化损伤的作用,其作用与Keap1-Nrf2-ARE信号通路激活有关。
背景 电刺激具有促进局部组织血管再生和调节血管活性物质表达的作用,但电刺激是否能促进肌筋膜激痛点局部组织血管再生和血流状态改变尚无研究报道。目的 探讨电刺激对肌筋膜激痛点局部组织微血管再生和血浆内皮素1及一氧化氮的影响。方法 将54只SD大鼠随selleck screening library机分为正常对照组、模型组和电刺激组,每组18只。模型组和电刺激组采用打击联合离心运动法建立肌筋膜激痛点模型,电刺激组大鼠给予肌筋膜激痛点电刺激干预(参数
随着近年来超声仪器的进步,技术水平的提升,高分辨超声探头配合谐波成像,显著提高了超声对肠壁的实时分辨率,可动态评估肠蠕动。彩色多普勒可用于评价肠壁内血管化,脉冲多普勒可用于定量腹腔和肠系AZD8931DMSO溶解度膜上动脉的血流等,且具有成本低,无辐射,无侵入及安全、可重复性强等特点,以致超声在肠梗阻诊断中的应用越来越广泛。本文就超声对肠梗阻的检测方式,影像学表现特征及对临床的管理指导等方面进行综述,以探讨超声在肠梗阻诊断及管理中的应用价值。
目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清微小RNA-208(miR-208)、血管内皮生长因子-B(VLDK378 NMREGF-B)的变化与患者左室重构及炎症反应的关系。方法选取遂宁市中心医院2017年1月至2018年8月收治的90例AMI患者(AMI组)、健康对象90例作为对照组,检测对比两组的血清miR-208、VEGF-B、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)水平,采用超声心动图检测左室舒张末期容积(LVEDV)、左室舒张末期内经(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)。

试验第31天开始收集种蛋,连续5 d,计算产蛋率、料蛋比、种蛋合格率、入孵种蛋受精率、受精蛋孵化率及死胚率;出雏后检测死亡鸡胚蛋壳内膜大肠杆菌和沙门氏菌的数量,测定1日龄雏鸡血清中新城疫和法氏囊抗体效价。结果表明 与试验1组相比,试验4组的产蛋率、种蛋合格率、种蛋受精率和受精蛋孵化率均极显著提高(P<0.01),料蛋比和死购买17-AAG胚率极显著降低(P<0.01),破蛋率显著降低(P<0.05),死亡胚胎大肠杆菌数量显著降低(P<0.05),1日龄雏鸡新城疫和法氏囊抗体效价有升高的趋势(P>0.05)。结果提示,饲粮添加MOS能够提高坝上长尾鸡种鸡的繁殖性能和入孵种蛋孵化率以及雏鸡新城疫和法氏囊母源抗体效价,减少鸡胚的大肠杆菌selleck抑制剂感染,且以饲粮中添加量为2.0 g/kg效果最佳。
为研发高效的猪圆环病毒2型(PCV2)黏膜疫苗，通过口服、肌内和滴鼻途径，将表达PCV2 Cap蛋白主要抗原表位的重组复制缺陷型腺病毒（rAd/Cap/518）免疫Balb/c小鼠，同时以无外源基因的空腺病毒（wild-rAd）经滴鼻确认细节途径免疫Balb/c小鼠作为对照组，评价其黏膜免疫效果。分别检测小鼠血清中IgG和唾液、肺部、肠道灌洗液中IgA抗体水平，脾脏T淋巴细胞亚群及相关细胞因子IFN-γ和IL4的分泌水平以及淋巴结、脾脏和肺组织PCV2病毒载量。结果显示，与对照组相比，rAd/Cap/518经肌内途径免疫诱导产生的血清IgG抗体显著增加；经滴鼻和口服途径免疫诱导产生的局部黏膜部位IgA抗体显著增加。

本研究基于DNA四面体纳米结构构建的微流控平台,不仅为食源性致病菌的检测提供了一种有效的检测方法,在其它食品安全隐患、疾病早期诊断等研究领域也具有潜在应用价值。
采用简单重复序列标记(nSSR)与叶绿体DNA序列(cpDNA)分析技术,对城步峒茶群体进行了遗传多样性、遗传结构和遗传分化等研究。结果表明,15对nSSR引物在参试81份资源中共获得142个等位位点Panobinostat,平均每对引物9.47个,城步峒茶群体的观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和Nei期望杂合度(Nei)分别为0.49、0.62和0.62,具有较高的遗传多样性。Structure分析将79份峒茶资源分成3个类群,但各类群的遗传背景较为复杂,没有明显的群体结构。F检验表明,城步峒茶群体的近交系数F_(IS)为正值(F_(IS)=0.177 5),群LDN-193189价格体间的遗传分化系数F_(ST)较小(F_(ST)=0.034 5),分化程度较低,基因流Nm较高(Nm=7.01)。3对cpDNA引物分别获得了473 bp(rbc L)、704 bp(mat K)和320 bp(psb H-trn A)的片段序列,变异位点占总位点的比例分别为0.42%、0.71%和1.25%。将3个序列依次拼接,共产生了9个单倍型寻找更多,单倍型数由多到少的居群依次为TXZ(6)、DZC(4)、DPS(4)、TYS(3)、HJZ(2),群体的单倍型多样性(Hd)和核苷酸多样性(π)分别为0.732和0.001 39。9个单倍型中,单倍型H1和H5处于进化网络图的中心节点上,并且包含资源数量最多,属于比较原始的单倍型。同时,nSSR和cpDNA的AMOVA分析结果基本一致,居群内的变异百分比分别达到96.69%和80.54%,城步峒茶的遗传变异主要存在于居群内。

一、临床资料本组共16例,男性12例,女性4例,年龄5~11岁,平均7.8岁。右足9例,左足7例;车祸伤13例,重物砸压伤3
目的探讨T形血管蒂背阔肌肌皮瓣桥式移植在小腿软组织缺损中的应用。方法2003年1月至2013年8月收治16例小腿皮肤软组织缺损患者,均采用T形血管蒂背阔肌肌皮瓣桥式移植的方法修复。将肩胛下血管近端及旋肩胛血管远端嵌入健侧断开的胫后血管中,行端端吻查找更多合,胸背血管蒂通过健侧皮管桥,将背阔肌肌皮瓣覆盖患侧小腿创面,双小腿调整至合适位置后外固定架固定。结果术后3例出现血管危象,行血管探查后解除危象;2例皮瓣边缘存在浅表感染,经3周换药后好转;其余11例移植组织在术后2周全部一期愈合。术后均获6个月至5年随访,平均3.4年。移植皮瓣外形良好,肢体功能基本恢复。结论在患肢无法提供可供吻合的血管时,T形血管蒂背阔肌Barasertib生产商肌皮瓣桥式移植修复小腿软组织缺损,是一种行之有效的方法,且不牺牲健侧肢体主干血管。
目的探讨高压氧预处理对大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤模型中胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、NF-κB的表达及皮瓣存活的影响。方法采用随机数表法将18只成年雄性SD大鼠分为假手术组(SH)6只、缺血再灌注组(IR)6只和高压氧预处理并且组(HBO)6只,HBO组术前3 d开始行高压氧治疗,每天2次,间隔12 h,而IR组和SH组大鼠术前不做处理,3组大鼠均于腹部形成6 cm×9 cm右侧腹壁浅动脉为蒂的轴型皮瓣,SH组大鼠直接行皮瓣原位缝合,IR组和HBO组加行缺血处理3 h。术后第3天取存活皮瓣组织进行HE染色、免疫组化染色,以及Western Blot检测其ICAM-1、VCAM-1和NF-κB的表达。数据采用单因素方差分析,应用SPSS 18.0进行统计学分析。

通常会通过测量空腹血糖或HbA1c浓度或口服葡萄糖耐量测试来确诊，HbA1c可在糖尿病诊断、与平均血糖的关系、与糖尿病并发症危险性的关系及指导调整治疗方案发挥重要作用，然而对于儿童(<18岁)、孕妇或血红蛋白异常性疾病(如贫血)患者并不能依赖HbA1c诊断，因此需另寻一种生物标记物。CD36作为研究最广泛的清道夫受体之一，并非普遍表达，但存在于多种哺乳动物细胞类Etomoxir型中，包括造血细胞(血小板、单核细胞、巨噬细胞)、内皮细胞、乳腺和眼睛中的特化上皮细胞、味蕾细胞、肠细胞和胰岛素反应细胞(如脂肪细胞)以及心脏和骨骼肌细胞，参与炎症反应、动脉粥样硬化性疾病、肠道对脂肪吸收、脂肪组织中的脂质储存、心脏和骨骼肌的脂质利用以及糖代谢紊乱，且与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DAZD1152分子量M)发病率相关。血清可溶性CD36 (soluble CD36,sCD36)作为CD36非细胞结合循环形式，能够反映组织CD36表达程度，首次在一小部分受试者中被描述为与代谢综合征相关，随后的实验表明外周血sCD36水平与2型糖尿病患者糖脂代谢、胰岛素抵抗、糖尿病并发症相关，提示其可能成为预测糖尿病及其并发症的潜在生物标记物。
BI 10773临床试验 目的 初步研究国产电生理刺激反馈仪用于无创筛查糖代谢异常患者的有效性和安全性，并确定筛查临界值。方法 纳入95例40岁以上受试者，根据口服葡萄糖耐量试验（oral glucose tolerance test,OGTT）及既往病史分为糖耐量正常（normal glucose tolerance,NGT）组（n=55）和糖代谢异常（impaired glucose metabolism,IGM）组（n=40）。

结果 CIN组和宫颈癌组患者的hrHPV DNA和hrHPV E6/E7 mRNA载量明显高于慢性宫颈炎组(P<0.05),CIN组的hrHPV DNA和hrHPV E6/E7 mRNA载量明显低于宫颈癌组(P<0.05);hrHPV E6/E7 mRNA鉴别诊断CIN与慢性宫颈炎的AUC为0.816(P<0.Taselisib订单05),hrHPV DNA载量鉴别诊断CIN与慢性宫颈炎的AUC为0.561(P>0.05),hrHPV E6/E7mRNA和hrHPV DNA载量鉴别诊断CIN与宫颈癌的AUC分别为0.736和0.698(P<0.05);随着TBS和CIN分级增加,hrHPV DNA和hrHPV ESelleck6/E7 mRNA载量呈明显升高趋势(P<0.05),hrHPV E6/E7 mRNA和hrHPV DNA载量均与CIN病变程度具有显著的正相关关系(r=0.285,0.621;P<0.05)。结论 hrHPV E6/E7mRNA载量水平与CIN的病变程度具有显著的相关性,可用于CINEntrectinib生产商的鉴别诊断和病变评估。
近年来DNA机械技术得到了广泛的关注和深入的研究。DNA独特的分子结构和理化性质使构建DNA机械装置成为可能。通过设计更加精巧的机械装置可以产生更加复杂的机械行为或功能。DNA机械技术在研究感知、传递和产生pN力的生物分子的基本特性方面发挥了重要作用,这些力学研究对于揭示它们的功能至关重要。本文总结了近年来DNA机械技术的研究进展。