05）。心肌梗死面积和cTnI：与NDM-S组比较，DM-S组LV+RV明显降低（P0.05）；DM-SP组IS、IS/ARR和血浆cTnI浓度明显高于NDM-SP组（P 0.05）。与NDM-IR组比较，NDM-SP组和NDM-SB组GSK-3β磷酸化水平（p-GSK-3β/GSK-3β）表达增加（P
目的： 采用不同剂量阿司匹林(Aspirin/acetylsalicylic acid ASA)干预骨髓间充质干细胞（Bone marrow stromal cells BMSCs）移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤，观察各组血清TNF-α浓度、神经功能评分、caspase-3表达，探讨阿司匹林对BMSCs移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及作用机理。 方法： 利用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉阻塞(Middle

cerebral artery occlusionMCAO)模型(n=48)。根据完全随机原则分为：模型自然恢复组（A组），BMSCs移植组（B组）、阿司匹林干预组（C组）和阿司匹林干预BMSCs移植组（D组）。C、D组根据阿司匹林的剂量各分为三个亚组（阿司匹林剂量：C1、D1亚组3.75mg/kg/d，C2、D2亚组7.5mg/kg/d，C3、D3亚组22.5mg/kg/d），C、D组各亚组在再灌注120小时后开始按照分组每日予以不同剂量阿司匹林溶入0.5ml蒸馏水灌胃给药；A组为MCAO再灌注大鼠模型组；B、D组进行BMSCs移植，于缺血2小时再灌注146小时后，通过尾静脉注射2×106BMSCs每只大鼠。第14天，分别检测血清TNF-α浓度，评价神经行为学评分， 购买GDC-0941 HE染色观察细胞形态结构，测定caspase-3的表达。

结果： 1．神经行为学评分（单位：分）:A组3.76±0.42，B组2.04±0.28，C组：C1亚组3.91±0.35、C2亚组3.83±0.62、C3亚组3.92±0.60，D组：D1亚组1.69±0.16、D2亚组1.17±0.11、D3亚组2.25±0.17。A组与B组及D组各亚组相比具有统计学差异（P<0.05），B组高于D组各亚组；C组各亚组与D组各亚组按剂量两两相比均具有统计学差异（P<0.05），C组高于D组；C组各亚组间两两相比有统计学差异（P<0.05），C1组最高，C3组最低；D组各亚组间两两相比有统计学差异（P<0.05），B组高于D组各亚组；D组各亚组间两两相比有统计学差异（P
目的：近年来，血管性痴呆(vascular dementia, VD)的发病率逐年增高，已成为严重威胁老年人身心健康的原因之一，并给社会和家庭带来了沉重负担。因此，深入探讨VD的发病机制是当前医学界的研究热点。 研究表明脑源性神经营养因子（brain BYL719 derived neurotrophic factor,BDNF）作为神经生长因子的一种，在脑缺血时表达增高。其可通过与细胞膜表面的酪氨酸激酶受体B(receptor selleck激酶抑制剂 tyrosine kinases B, TrkB)结合而激活下游的PI3K-Akt信号通路。活化的Akt与其下游底物糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK3β）结合后，使GSK3β失活，发挥抗凋亡作用。但Akt、GSK3β在VD中如何发挥作用仍未明确。本研究通过对与学习记忆密切相关的海马组织病理学观察及细胞凋亡相关蛋白Akt、GSK3β表达变化的检测，以期明确Akt、GSK3β在VD中的作用，为探讨VD发病机制提供更多依据。 方法：本研究分为三部分： 第一部分以雄性C57Bl/6小鼠为研究对象，采用反复三次结扎双侧颈总动脉的方法，给予脑缺血20min(ischemia, I)-再灌注10min(reperfusion, R)处理，建立VD小鼠模型，并设立正常组、假手术组和模型组；在模型制备后的第15、29、43d，利用水迷宫试验和跳台试验对各组小鼠进行学习功能测试，在第16、30、44d进行记忆功能测试；行为学测试完毕后，HE染色观察海马组织病理学变化。

第二部分采用Western-blot方法测定小鼠海马组织Akt、p-Akt蛋白的表达变化。 第三部分采用Western-blot方法测定小鼠海马组织GSK3β、p-GSK3β蛋白的表达变化。 结果： 1术后3天小鼠体重变化 与正常组和假手术组相比，模型组小鼠术后第1d体重明显减轻(P0.05）。 2水迷宫试验 2.1术后第15、29、43d，测试各组小鼠学习成绩，结果显示： 2.1.1游完全程时间：正常组和假手术组相比无明显差异；模型组与假手术组相比时间明显延长(P<0.05)，其中以术后4周损害最严重，仅有少量细胞形态正常，正常神经元计数较术后2周和6周时显著减少(P0.05）；缺血再灌注后2周、4周、6周之间蛋白表达亦无明显变化（P>0.05）。 5.2p-Akt蛋白的表达情况： 正常组和假手术组之间无明显变化（P>0.05）。与假手术组相比，模型组p-Akt蛋白表达增高(P0.05）。 6Western-blot显示海马组织GSK3β、p-GSK3β蛋白表达情况 6.1GSK3β总蛋白的表达情况： 正常组、假手术组和模型组之间无明显变化（P>0.05）；缺血再灌注后2周、4周、6周之间蛋白表达亦无明显变化（P>0.05）。 6.2p-GSK3β蛋白的表达情况： 正常组和假手术组之间无明显变化（P>0.05）。与假手术组相比，模型组p-GSK3β蛋白表达增高(P0.

3/10万,居恶性肿瘤首位(男性首位,女性第2位);肺癌病死率为61.0/10万,同样位居恶性肿瘤首位(男、女性均为首位)~([1])。在过去的30年来,随着对肺癌发生、发展认识的不断深入以及各种综合治
AIM: To reviewing Selinexor分子量 genetic and epigenetic make-up of metastatic colorectal cancers(m CRCs) addicted to epidermal growth factor receptor(EGFR) signalling.METHODS: The present study summarizes the potential

value of prognostic and predictive biomarkers in selecting m CRC patients treated with anti-EGFR therapy. A meta-analysis was performed using a systematic search of Pub Med, Medline and Web of Science to identify eligible papers until March 21 st, 2016 using these following terms: ‘‘colorectal cancer”, “predictive biomarkers’ ‘, “anti-EGFR therapy”, “KRAS”, 也许 “NRAS”, “PIK3CA”, “TP53″, “PTEN”, ‘‘EGFR”, “MET”, “HER2″, “epiregulin”, “amphiregulin”, “prognostic biomarkers”, “BRAF”, “miR NA” and “antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity(ADCC) activity”. Two investigators independently evaluated and extracted

data from each identified studies based on selected criteria of inclusion and exclusion. RESULTS: The introduction of agents targeting EGFR such as cetuximab and panitumumab increased overall survival of mC RCs. Nevertheless, it has firstly became evident that response rates to

cetuximab regimens in unselected patient populations were typically lower than 30%. Clinical data confirmed the predictive value of RAS mutations for resistance to cetuximab and panitumumab leading to the license of these monoclonal antibodies exclusively for the management of patients with RAS-wild type colorectal cancers. So far the identification RNA Synthesis抑制剂 of predictive biomarkers have generated interesting, though preliminary and, at times, conflicting data on the importance of tumour mR NA levels of EGFR ligands, of activating mutations in other genes such as NRAS and PIK3 CA. The prognostic value of selected micro RNAs level and ADCC activity is under investigation, while the prognostic impact of BRAF status remains controversial.CONCLUSION: This review focuses on the personalized treatment of m CRC and discusses the potential of new prognostic and predictive biomarkers in selecting patients treated with anti-EGFR therapy.

05,其余为P<0.01)但显著低于H对应组(均P0.05)。结论:(1)p38、NF-B活性、IL-6 mRNA均对运动刺激敏感,急性运动后,三者变化相似,特别是大强度条件下。p38活性、NF-B活性、IL-6 Dabrafenib临床试验 mRNA上调幅度及NF-B活性、IL-6 mRNA上调时间与运动强度有关。(2)MEF2c、MyoD mRNA均对运动刺激敏感。MEF2c、MyoD mRNA的上调幅度、MEF2c mRNA的上调时间与运动强度有关。MRF4、MyoG mRNA仅对大强度运动刺激敏感,Myf-5基因表达对运动刺激敏感。(3)大强度运动后,肌肉表型转化趋势经历了慢-快、快-慢两个阶段,后再恢复正常水平。中等强度运动后早期,表型转化同样为慢-快,表型转化结束较早。
1.不同人群唾液中变形链球菌的定量检测及其意义/赵冬…//中华口腔医学杂志.-2010,45(4).-223～227针对染色体DNA印迹法检测变形链球菌中出现的14kb的Hae Ⅲ酶切片段,合成特异性引物(Sm*),运用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术定量检测变形链球菌
星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)是位于8q22的单跨膜蛋白,可表达于多种细胞的不同部位。目前认为它是一种癌基因,在多种肿瘤中表达上调,能通过多条信号转导通路影响肿瘤细胞周期,具有增强细胞的成瘤能力、促进瘤细胞增殖和生长、增强瘤细胞侵袭及转移能力等生物学功能。随着研究深入,AEG-1有望成为判断肿瘤预后和基因治疗的新靶点。
目的观察鞘内注射小胶质细胞抑制剂米诺环素、脑源性神经营养因子(BDNF)拮抗剂TrkB/Fc对大鼠神经病理性疼痛发生期脊髓背角BDNF表达的影响,探讨BDNF在神经病理性疼痛发生中的作用机制。方法成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠42只,行鞘内置管,建立L5神经根结扎(SNL)致神经病理性疼痛模型,仅切开皮肤及皮下组织暴露L5神经根者为假手术。根据手术类型及注射药物的不同分为7组,每组6只:Ⅰ组,对照基础值组,鞘内置管成功大鼠,不用任何药物;Ⅱ组,鞘内注射1g/LTrkB/Fc10μL+SNL组,观察TrkB/Fc对SNL大鼠的作用;Ⅲ组,鞘内注射1g/LTrkB/Fc10μL+假手术组,观察TrkB/Fc对假手术大鼠的作用;Ⅳ组,鞘内注射磷酸盐缓冲液(PBS)10μL+SNL组,使用溶剂PBS作为对照组,观察溶剂对SNL大鼠的作用;Ⅴ组,鞘内注射PBS10μL+假手术组,观察溶剂对假手术大鼠的作用;Ⅵ组,鞘内注射8g/L米诺环素10μL+SNL组,观察米诺环素对SNL大鼠的作用;Ⅶ组,鞘内注射8g/L米诺环素10μL+假手术组,观察米诺环素对假手术大鼠的作用。分别于术前1h、末次给药前1h用vonFrey纤维丝以up-down法测大鼠的50%机械缩爪阈值(50%PWT)。末次给药后3h取手术侧腰膨大段脊髓背角,采用Western印迹法测定BDNF。结果末次给药前1h,Ⅳ组的50%PWT较术前1h明显降低(P0.05)。末次给药后3h,Ⅳ组术侧脊髓背角BDNF的表达显著高于其余各组(P值均0.05)。结论小胶质细胞抑制剂米诺环素、BDNF拮抗剂TrkB/Fc均能有效抑制神经病理性疼痛大鼠痛觉过敏的发生,疼痛发生期脊髓背角BDNF的表达增高可能与小胶质细胞的活化相关。
目的探讨兔蛛网膜下腔出血(SAH)后丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、核转录因子-κB(NF-κB)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在脑血管痉挛(CVS)发病机制中相互间内在联系。方法新西兰纯种健康级大白兔40只,随机分为对照组、ICAM-1单克隆抗体治疗组、NF-κB拮抗剂治疗组、p38MAPK抑制组,每组10只。枕大池二次注血制作兔SAH后CVS模型。分离兔基底动脉(BA),应用形态学观察、免疫组化和原位杂交等方法,观测兔BA管径、血管壁上p38MAPK、NF-κB及ICAM-1表达变化及其相互间关系。结果对照组血管造影出现管腔狭窄,而各治疗组未见明显血管狭窄。免疫组化显示对照组p38MAPK、NF-κB、ICAM-1在内膜、中膜有强烈的表达;p38MAPK抑制组p38MAPK、NF-κB、ICAM-1的表达主要局限在内膜、内膜下,表达微弱;NF-kB拮抗剂治疗组p38MAPK、NF-κB、ICAM-1在内膜和内膜下也有微弱表达,而p38MAPK在中膜也出现表达;ICAM-1单克隆抗体治疗组p38MAPK、NF-κB在内膜、中膜均有表达,ICAM-1仅在内膜和内膜下有微弱表达。原位杂交结果与免疫组化类似。结论在兔BA血管壁上存在着由p38MAPK、NF-κB调控、ICAM-1介导的痉挛血管壁炎症反应,这一级联反应在CVS的发生、发展过程中起了重要的作用。
目的:研究异丙酚对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激的保护作用和机制。方法:体外培养的HUVECs分为对照组、异丙酚组、t-BHP组、异丙酚预处理+t-BHP组,给予相应处理后,Westernblot检测p38MAPK磷酸化水平变化,RT-PCR检测iNOS、eNOS表达。结果:t-BHP处理后,能显著诱导p38MAPK磷酸化,激活iNOS、eNOS表达,而异丙酚预处理后能减轻这些变化。结论:异丙酚通过抑制p38MAPK,减少iNOS、eNOS表达,减轻氧化应激从而起到保护HUVECs的作用。
目的观察银杏叶总黄酮(TFG)对肾缺血-再灌注(I-R)损伤大鼠p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性的影响。方法

Cobimetinib核磁共振 很少 120只SD大鼠随机均分为假手术组I、-R组和TFG预处理组(TFG 250 mg/kg,每天3次)。3 d后采用夹闭双侧肾蒂致肾缺血45 min后再灌注制作大鼠肾I-R损伤模型。Western blot检测p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK蛋白表达;免疫组化方法检测肾组织磷酸化p38 MAPK的分布情况。结果磷酸化p38 MAPK表达活性在再灌注10 min开始增加,1 h达最高峰,持续至24 h仍高于正常水平,且主要在肾小管细胞表达。TFG预处理组磷酸化p38 MAPK的表达较I-R组明显减弱(P
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对间充质干细胞(MSCs)增殖的影响及其信号机制。方法:全骨髓贴壁法培养MSCs,流式细胞仪分析其表面MSCs标记(CD45、CD34、CD90、CD29)以及成骨、成脂肪等多向诱导分化潜能,鉴定其特征。MTT法分析不同浓度bFGF对MSCs增殖的影响,确立最佳浓度bFGF诱导MSCs增殖的时间特征,分别以磷脂酰肌醇3-激酶、促分裂素原活化蛋白激酶、磷脂酶C、蛋白激酶C、钙通道和钙泵选择性抑制剂等处理P3MSCs后,观察其对bFGF介导MSCs增殖的影响。结果:培养的MSCs表现CD90、CD29强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;bFGF诱导MSCs增殖呈时间和剂量依赖特征,5.

33(48h)和43.18μmol/L(72h),而对Aspc-1细胞的IC50达到19.65(48h)和13.32μmol/L (72h),均优于环巴胺；且对Aspc-1选择性更高。化合物16、17的抑制活性也优于环巴胺。初步构效关系表明,介芬胺的11位为亚甲基时活性最优,无论是羰基还是羟基取代活性均降低；藜芦胺的哌啶环接入大小合适的基团时会有助于活性提升。该结果为环巴胺类Hh通路抑制剂的结构优化提供了依据。
目的结肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一。目前，外科切除联合化疗和/或放射治疗仍然是针对结肠癌的主要治疗方法，但是仍有很高的肿瘤复发率。虽然辅助放化疗能够在一定程度上延长患者的生存期，但同时也伴随着严重的副作用，因此急需发展更有效的治疗结肠癌的策略。近年来，临床前数据表明肿瘤干细胞（cancer stem cell，CSC）起始了肿瘤的生长并且是肿瘤自我更新、分化、复发和转移以及放化疗耐受性的关键。根据肿瘤干细胞（CSC）理论，只有靶向清除CSC，才有可能治愈肿瘤。因此，本文以CD44为筛选标志，从小鼠结肠癌细胞系CT-26中分选出CD44+细胞作为小鼠结肠癌干细胞，探讨CD44+CT-26细胞裂解物和总RNA致敏的树突状细胞（dendritic Regorafenib 价格 cell，DC）是否能诱导靶向肿瘤干细胞的抗肿瘤免疫应答。

方法用免疫磁珠法分离获得CD44+CT-26细胞，用含20ng/ml bFGF、20ng/mlEGF、2%B27的无血清DMEM/F12培养基培养扩增。将CD44+CT-26的细胞裂解物或总RNA分别作为抗原负载小鼠骨髓来源的DC，获得Pro-DC和RNA-DC疫苗，免疫接种有CD44+CT-26细胞的BALB/c小鼠，进行免疫保护实验和免疫治疗实验，每2-3天测量肿瘤大小并观察瘤体生长及小鼠存活情况。取小鼠的脾脏，体外检测T细胞的细胞毒性以及IFN-γ分泌能力。 结果（1）免疫保护组：与PBS组和未致敏DC组相比，Pro-DC组和RNA-DC组的成瘤时间延迟且肿瘤生长缓慢，尤其是Pro-DC组在接种后第15天仍未长出肿瘤。Pro-DC组和RNA-DC组的肿瘤重量显著低于对照组和未致敏DC组（P<0.05）；生存周期分析发现，Pro-DC和RNA-DC组小鼠的生存期显著长于PBS组和未致敏DC组（P<0.05），第50天时未致敏DC组和PBS组小鼠已经全部死亡，至第60天实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的生存率分别为60%和50%；Pro-DC和RNA-DC组CTL对CD44+CT-26的杀伤作用及细胞上清液中IFN-γ的分泌量显著高于PBS组和未致敏DC组（P<0.05）；另外，与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫保护作用更加显著（P<0.05）。（2）免疫治疗组：与PBS组和未致敏DC组相比，经Pro-DC和RNA-DC治疗后，肿瘤的生长受到了显著的抑制。实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的肿瘤重量显著低于对照组和未致敏DC组（P<0.05）；Pro-DC和RNA-DC组小鼠的生存期显著长于PBS组和未致敏DC组（P<0.05），第50天时未致敏DC组和PBS组小鼠已经全部死亡，至第60天实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的生存率分别为60%和10%；Pro-DC或RNA-DC组CTL对CD44+CT-26的杀伤作用以及细胞上清液中IFN-γ的分泌量显著高于PBS组和未致敏DC组（P<0.05）；另外，与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫治疗作用更加显著（P
目的：前列腺癌（Prostatic

哪里 cancer,Pca）是西方国家最常见的男性恶性肿瘤，而近年我国该病发病率亦逐年上升，大部分患者最终会进展为非雄激素依赖的Pca，但目前尚无公认可以有效的治疗非雄激素依赖Pca的手段。因此，寻求可以有效治疗非雄激素依赖前列腺癌的新的治疗手段是目前临床迫切需要解决的问题。三氧化二砷（Arsenic trioxide，As203，ATO)已被证实对于治疗复发性或难治性急性早幼粒细胞白血病（APL）具有良好疗效。但某些二期临床试验结果发现单独用ATO治疗一些实体瘤，如转移性肾细胞癌或转移性黑色素瘤，其疗效相对有限。故寻找一种辅助药物，与ATO联合使用，使低浓度的ATO发挥高浓度的作用效果，并降低潜在的毒副作用，很有可能是一种改进ATO治疗某些实体肿瘤的可行有效的方法。Hedgehog（Hh）信号通路晚期前列腺癌中呈高表达。最近研究表明ATO能够通过抑制Hh信号通路下游GLI蛋白而抑制尤文肉瘤和生神经管细胞瘤的增殖；而Smo阻滞剂Cyclopamine（CYC）亦可通过对Hh信号通路的阻滞作用而抑制前列腺癌等肿瘤的生长。故本实验选取非雄激素依赖前列腺癌PC3细胞为研究对象，观察低剂量三氧化二砷联合Cyclopamine对PC3细胞的抑制作用及其可能的分子作用机制。 购买AZD8055 方法：1.运用免疫荧光及DAPI染色鉴定PC3细胞及PC3细胞内HH-GLI信号通路的表达情况。2.采用MTT比色法检测不同浓度ATO及Cyclopamine单独或联合使用对不同的时间点PC3细胞生长的抑制。3.应用裸鼠致瘤实验进一步验证ATO联合Cyclopamine对PC3细胞生长的抑制效果。4.Real-time PCR法检测ATO联合Cyclopamine对PC3细胞内Hh信号通路中重要分子的mRNA的表达的影响。5.检测ATO联合Cyclopamine对PC3细胞内细胞凋亡及细胞周期的影响。 结果：1.免疫荧光剂DAPI染色结果显示肿瘤增殖抗原Ki67、前列腺特异性膜抗原PSAM及HH-GLI1信号通路中重要的核内转录因子GLI1均在PC3细胞中呈高表达2.MTT结果显示ATO或Cyclopamine单独使用均能抑制PC3细胞的生长，呈现明显的剂量及时间依赖性；二者联合使用则优于单剂量、甚至二倍剂量的ATO或Cyclopamine，经Chou’s公式分析二者可显著协同抑制PC3细胞生长。3.

正常对照组、吗啡组、SB216763组(10μM)、吗啡+SB216763组(SB216763提前1h加入)。置细胞培养箱孵育。 2. Western Blotting 使用Western Blot方法检测小胶质细胞phosphor-Akt、phosphor-GSK3β、cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、phosphor-p38、Bax、Bcl-2等蛋白水平变化。 3.细胞凋亡的检测 使用TUNEL染色法检测小胶质细胞凋亡。 4. RT-PCR 使用RT-PCR检测小胶质细胞Bax和Bcl-2 mRNA水平变化。 结果 1.吗啡通过阿片受体途径使小胶质细胞phosphor-Akt和phosphor-GSK3β蛋白水平降低 Western Blot结果显示,吗啡使小胶质细胞phosphor-Akt和phosphor-GSK3p蛋白水平明显降低,且表现为时间和剂量依赖性,纳洛酮可阻断吗啡的作用。 2.抑制GSK3β增加吗啡诱导的小胶质细胞凋亡

TUNEL方法检测细胞凋亡,发现特异性GSK3β抑制剂SB216763预处理显著增加了吗啡诱导的小胶质细胞凋亡。Western Selleckchem Depsipeptide Blot方法检测小胶质细胞cleaved caspase-3和cleaved caspase-8蛋白水平,发现SB216763预处理可以明显增加吗啡引起的caspase-3和caspase-8活化。 3.抑制GSK3β使吗啡处理引起的Bax/Bcl-2和phosphor-p38变化增加 Western Blot方法检测小胶质细胞Bax和Bcl-2蛋白水平变化,发现吗啡处理使小胶质细胞Bax水平升高,Bcl-2水平降低。而SB216763预处理增加了吗啡引起的Bax/Bcl-2变化。RT-PCR方法检测小胶质细胞中Bax和Bcl-2 3-deazaneplanocin A订单 mRNA表达变化,发现吗啡处理使小胶质细胞Bax mRNA水平升高,Bcl-2

mRNA水平降低,而SB216763预处理增加了吗啡引起的Bax/Bcl-2 mRNA变化,与蛋白变化一致。Western Blot方法检测小胶质细胞phosphor-p38水平,发现吗啡处理使小胶质细胞phosphor-p38水平升高,纳洛酮可阻断吗啡的作用。而SB216763预处理可显著增加吗啡引起的phosphor-p38升高。 结论 1.吗啡通过阿片受体途径使小胶质细胞phosphor-Akt和phosphor-GSK3β蛋白水平降低。 2.抑制GSK3β增加吗啡诱导的小胶质细胞凋亡。 3.抑制GSK3β增加吗啡引起的Bax/Bcl-2水平变化。 4. GSK3β对Bax和Bcl-2的表达调控发生在转录水平。 5.抑制GSK3β可增加吗啡处理引起的phosphor-p38水平升高。 第三部分P38 MAPK信号通路在吗啡诱导小胶质细胞凋亡中的作用研究 目的 使用体外培养原代小胶质细胞和BV-2小胶质细胞系探讨p38 MAPK信号通路在吗啡诱导小胶质细胞凋亡中的作用及其具体机制。 方法 1.体外培养原代小胶质细胞和BV-2小胶质细胞系并进行吗啡处理 体外培养原代小胶质细胞和BV-2小胶质细胞分别分组如下：1.正常对照组、吗啡组(10u M)、纳洛酮组(10μM)、吗啡+纳洛酮组(纳洛酮提前吗啡1h加入使之预先与阿片类受体结合)；2.正常对照组、吗啡组、SB203580组(10μM)、吗啡+SB203580组(SB203580提前1h加入)；置细胞培养箱孵育。 2. Western Blotting 使用Western Blot方法检测小胶质细胞phosphor-p38、cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、Bax、Bcl-2等蛋白水平变化。 3.细胞凋亡检测 使用TUNEL染色法检测小胶质细胞凋亡。 4. RT-PCR 使用RT-PCR方法检测小胶质细胞Bax和Bcl-2 mRNA水平变化。 结果 1.吗啡处理使小胶质细胞phosphor-p38蛋白水平升高

Western Blot结果显示,吗啡使小胶质细胞phosphor-p38水平升高,而纳洛酮可阻断吗啡的作用。 2.抑制p38 MAPK减少吗啡诱导的小胶质细胞凋亡 TUNEL方法检测细胞凋亡,发现p38 MAPK特异性阻滞剂SB203580预处理明显减少了吗啡诱导的小胶质细胞凋亡。Western Blot方法检测小胶质细胞中cleaved caspase-3和cleaved caspase-8蛋白水平,发现SB203580预处理可以明显减少吗啡引起的caspase-3和caspase-8活化。 3.抑制p38 MAPK减少吗啡处理引起的Bax/Bcl-2变化 Western Blot方法检测小胶质细胞中Bax和Bcl-2蛋白水平变化,发现吗啡处理使小胶质细胞Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低。而SB203580预处理减少了吗啡引起的Bax/Bcl-2蛋白变化。RT-PCR方法检测小胶质细胞中Bax和Bcl-2 mRNA表达变化,发现吗啡处理使小胶质细胞Bax mRNA水平升高,Bcl-2 mRNA水平降低。而SB203580预处理减少了吗啡引起的Bax/Bcl-2 mRNA变化,与蛋白变化趋势一样。 结论 1.吗啡通过阿片受体途径增加小胶质细胞phosphor-p38水平。 2.抑制p38减少吗啡诱导的小胶质细胞凋亡 3.抑制p38减少吗啡处理引起的Bax/Bcl-2变化。4.P38对Bax和Bcl-2的调控发生在转录水平。 第四部分β-arrestin 2信号通路在吗啡诱导小胶质细胞凋亡中的作用研究 目的 使用体外培养原代小胶质细胞和BV-2小胶质细胞系探讨β-arrestin 2信号通路在吗啡诱导小胶质细胞凋亡中的作用及其机制。 哪里 方法 1.体外培养原代小胶质细胞和BV-2小胶质细胞系并进行吗啡处理 体外培养原代小胶质细胞和BV-2小胶质细胞分别分组如下：1.正常对照组、吗啡组(2,10μM)；2.正常对照组、吗啡组(10μM)、纳洛酮组(10μM)、吗啡+纳洛酮组(纳洛酮提前吗啡1h加入使之预先与阿片类受体结合)；置细胞培养箱孵育。 2.基因转染 将携带P-arrestin 2全长质粒、RNAi质粒和空白对照质粒转染入BV-2小胶质细胞实验各组细胞。转染48h后,将培养基更换为不含血清的DMEM培养基,并进行后续实验。 3.细胞存活率的检测 使用MTT方法检测小胶质细胞存活率。4.细胞凋亡检测 使用TUNEL染色法检测小胶质细胞凋亡。5. Western Blotting 使用Western Blot方法检测小胶质细胞phosphor-Akt和cleaved caspase-3等蛋白水平变化。 结果 1.吗啡处理引起小胶质细胞P-arrestin 2蛋白水平降低 Western Blot结果显示,吗啡使小胶质细胞β-arrestin 2蛋白水平明显降低,而P-arrestin 1蛋白水平无明显变化。纳洛酮可阻断吗啡的作用。 2.

5%、48%。NALP3-siRNA组IL-1β mRNA表达降低23%、ASC-siRNA组降低了39%。ELISA结果显示NALP3-siRNA组IL-1β和IL-18的表达分别减少27.7%、21%，ASC-siRNA组IL-1β和IL-18的表达分别减少44.1%、40.1%。Western

3-deazaneplanocin A blotting结果发现p38磷酸化水平与对照组无明显差异。 （5） Caspase-1抑制剂能降低IL-1β、IL-18的表达，分别降低41.9%和37.2%；p38抑制剂使IL-1β、IL-18表达降低，分别降低29.6%和37.8%，NALP3、ASC、Caspase-1及IL-1β的mRNA表达分别减少23%、31%、13%和23%。 结论: （1）pORF5质粒蛋白可通过激活NALP3炎性复合体诱导THP-1细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-18。 （2）pORF5质粒蛋白激活的p38MAPK信号通路能够影响NALP3炎性复合体的激活。
胃癌是世界各地最为常见的恶性肿瘤之一，在我国，其发生率和死亡率占恶性肿瘤的第二位，侵袭和转移是导致胃癌患者死亡的主要原因。因此，深入探讨引起增加胃癌侵袭与转移的作用及机制,进一步抑制胃癌细胞的侵袭转移,对于胃癌的临床治疗与预后具有深远的意义。白细胞介素-1β（IL-1β）已被证实与胃腺癌的发生、发展密切相关，但其分子机制尚不清楚。p38蛋白激酶是丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族的主要成员之一，是调控IL-1β信号通路的主要激酶。因此，我们着眼于研究p38蛋白激酶在IL-1β介导的胃腺癌细胞侵袭和转移中的作用及其机制。目前尚未见相关文献报道。 目的：探讨IL-1β介导的p38蛋白激酶在胃腺癌细胞侵袭和转移中的作用，并从细胞水平、临床样本、动物水平三方面初步探讨其作用机制，旨在阐明其作用及机制并为胃腺癌患者寻找一种新的治疗方法提供良好的实验依据。 方法： 1、应用Western blot技术在胃腺癌细胞株中验证IL-1β是否能激活p38蛋白激酶； 2、应用RNA干扰技术(siRNA技术)结合p38信号途径特异性抑制剂SB202190和Transwell迁移侵袭实验检测IL-1β激活p38蛋白激酶对胃腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响；

3、应用siRNA技术结合p38信号途径特异性抑制剂SB202190和RT-PCR检测IL-1β激活p38蛋白激酶对胃腺癌细胞中MMP2、MMP9mRNA表达的影响； 4、应用siRNA技术，通过转染MMP2siRNA、MMP9siRNA以及MMP2/MMP9siRNA和应用MMP2/9抑制剂BiPS进一步检测IL-1β增加胃腺癌细胞迁移和侵袭的可能机制是否涉及MMP2和MMP9； 所以 5、应用免疫组化技术检测人胃腺癌组织样本中磷酸化p38（p-p38）的表达及其表达强度与IL-1β、MMP2、MMP9表达强度之间的相关性； 6、应用siRNA技术结合动物实验、RT-PCR和免疫组化技术检测敲减p38再接受IL-1β刺激前后裸鼠胃癌肺转移结节数及裸鼠胃癌肺转移组织中p38/p-p38、MMP2、MMP9mRNA和蛋白质的表达。 结果： 1、IL-1β的刺激，可激活胃腺癌细胞AGS和MKN-45的p38蛋白激酶Western blot结果显示：在IL-1β刺激后30min，两株胃腺癌细胞AGS和MKN-45中的p38蛋白激酶均可被IL-1β激活，发生磷酸化；p38抑制剂SB202190预作用于细胞3h后再用IL-1β刺激，

p38蛋白激酶磷酸化则被抑制，表明IL-1β激活p38蛋白激酶具有较强的特异性。 2、IL-1β激活p38蛋白激酶可增加胃腺癌细胞AGS和MKN-45迁移和侵袭能力Transwell测定结果表明：接受IL-1β刺激后，胃腺癌细胞AGS和MKN-45迁移和侵袭作用增强，与未接受刺激的细胞相比，差异具有统计学意义(p﹤0.05)；转染p38siRNA或用p38抑制剂SB202190预处理细胞，则胃腺癌细胞上述作用明显减弱，表明IL-1β增加胃腺癌细胞迁移和侵袭的作用是通过激活p38蛋白激酶。 3、IL-1β激活p38蛋白激酶通过上调MMP2和MMP9的表达增加胃腺癌细胞迁移和侵袭RT-PCR测定结果表明，IL-1β刺激后，胃腺癌AGS和MKN-45细胞中的MMP2和MMP9的mRNA表达增加，与未接受刺激的细胞相比，差异具有统计学意义(p﹤0.05)；转染p38siRNA和用p38抑制剂SB202190预处理的胃腺癌细胞接受IL-1β刺激后，MMP2和MMP9的mRNA表达降低。上述结果初步表明IL-1β激活p38蛋白激酶增加胃腺癌细胞迁移和侵袭的机制涉及上调MMP2和MMP9。 Wortmannin 4、Transwell测定结果表明：与siRNA阴性对照转染组比较，MMP2siRNA转染组和MMP9siRNA转染组以及MMP2/MMP9抑制剂BiPS预处理组的胃腺癌细胞接受IL-1β刺激后迁移和侵袭能力明显减弱，结果进一步表明：IL-1β增加胃腺癌细胞迁移和侵袭的机制涉及上调MMP2和MMP9。 5、免疫组化结果表明：在105例测定的胃腺癌样本中，与配对非癌组织样本比较，53例胃腺癌组织(50.48%)过表达磷酸化的p38(p-p38)。p-p38的过表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型和肿瘤分化程度无关(p﹥0.05)，但与淋巴结转移和肿瘤侵袭程度（至浆膜外）密切相关(p﹤0.05)。同时，p38的过表达与IL-1β, MMP2, MMP9的高表达具有显著的相关性(r=0.72, p﹤0.01; r=0.63, p﹤0.01; r=0.58, p﹤0.

The potential utility of epigenetic targets and the further evaluation of micro RNA signaling seem to have potential for the development of novel treatment strategies in the future.
目的观察婴幼儿炎症性肌纤维母细胞肿瘤(IMT)的临床病理特征、免疫表型,探讨婴幼儿IMT的诊断、鉴别诊断、治疗及预后。方法收集5例婴幼儿IMT,分析其临床病理特征、免疫表型并随访。结果患儿5例,男1例,女4例,年龄8~22个月,中位年龄14个月。发生于肺部2例,腹腔3例。镜下表现为胖梭形纤维母细胞/肌纤维母细胞增生,呈束状或旋涡状排列,间质内伴有数量不等的炎细胞浸润,主要为成熟的浆细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞。肿瘤细胞排列疏松或致密,2例均可见体积较大的神经节样细胞。免疫组化:3例ALK胞质(+),2例(-)。随访3例ALK阳性病例中2例复发,1例失访。2例ALK阴性病例无复发。结论

IMT是一种少见的中间型肿瘤,好发于儿童,婴幼儿期罕见,需与其它梭形细胞肿瘤鉴别,该瘤具有复发潜能,偶可转移,术后需密切随访观察。
目的探讨VENTANA全自动免疫组化法(VENTANA Selleck Pomalidomide IHC)与手工免疫组化法(手工IHC)检测肺腺癌中间变性淋巴瘤激酶(ALK)突变的差异性。方法采用VENTANA IHC和手工IHC分别检测120例肺腺癌肿瘤组织中ALK基因突变,并用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行验证。结果采用VENTANA IHC、手工IHC和RT-PCR检测,120例中EML4-ALK阳性例数分别为14例(11.7%)、19例(15.8%)和15例(11.6%),与RT-CPR相比,VENTANA IHC检测的敏感性和特异性分别为93.3%和100%,二者之间总符合率为99.1%;手工IHC的敏感性和特异性分别为82.4%和95.1%,二者之间总符合率为93.3%。结论 VENTANA IHC和手工IHC检测EML4-ALK的结果与RT-PCR具有一致性,都可以作为肺腺癌患者EML4-ALK的检测方法,但VENTANA IHC的一致性高于手工IHC。
2007年在肺腺癌一个小亚群中发现的间变性淋巴瘤激酶(anaplastic

lymphoma kinase,ALK)基因重排界定了一类新的非小细胞肺癌(non-small-cellcarcinoma,NSCLC)分子亚型[1]。这些ALK-重排的肿瘤中腺癌最常见,经常可见印戒黏液细胞,无表皮生长因子受体(EGFR)或结直肠癌基因——K R A S突变,更多出现于不吸烟或轻度吸烟患者中,但一些ALK-重排的NSCLC不符合以上描述。目前已确定多种基因融合变异;最常见的为2号染色体短臂发生倒位形成的EML4-ALK基因融合。
1病例报告患者男,55岁。以”左侧颌后肿物1个月余”为主诉于2010-11-19入我院。1个月前患者发现左侧颌后长一肿物,逐渐增大,于当地医院行抗炎治疗后,症状有所缓解,为求进一步诊治,来我院就诊。专科检查:颌面部不对称,左侧颌后可见一肿物,约7.8cm×8.0cm大小,类圆形,边界不清,质地中等,活动度差,无波动,轻微触痛,皮肤色略红,皮温略高,开口度及开口型均正常,腮腺导管口无红肿,挤压未见分泌物溢出。辅
目的观察老年非小细胞肺癌患者凝血功能的变化及化疗对凝血功能的影响。方法分析2010年1月—2013年1月在本院接受治疗的老年肺癌患者(肺癌组)的临床资料,另选取40例老年健康体检者作为对照组。结果肺癌组共纳入43例,对照组40例。肺癌组PLT、PCT、PDW及MPV均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌组患者化疗后PT、TT、APTT、FIB、D-D、PC及FPS均显著低于化疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗结束后,肺癌组患者PT、TT及APTT呈现逐步升高的趋势。PT在化疗结束后第2、3及4周时显著高于化疗结束时(P<0.05);TT在化疗结束后第3、4周时显著高于化疗结束时(P<0.05);APPT在化疗结束后第3、4周时显著高于化疗结束时(P<0.05)。结论化疗能可逆性加剧老年肺癌患者本已存在的凝血功能亢进。
一、肿瘤EGFR靶标及靶向治疗的基本理解表皮生长因子受体(epidermal 也许 时间 growth factor receptor,EGFR)是一种跨膜糖蛋白,包括细胞外活化配体结合区、单跨膜亲脂区和细胞内酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)活性区,当配体如表皮生长因子、肿瘤生长因子α(转化生长因子α)等与之结合后,受体发生二聚化,使细胞内区结构发生改变,活化TK区,将三磷酸腺苷的γ磷酸基转移到酪氨酸残基上,发生自体磷酸化,进而活化下游信号蛋白底物及各种效应蛋白,发出有丝分裂信号,启动细胞分裂周期,最终导致DNA合成增加和细胞增殖。
Oesophageal

junctional adenocarcinoma is a challeng-ing and increasingly common disease. Optimisation ofpre-operative staging and consolidation of surgery inlarge volume centres have improved outcomes, howev-er the preferred adjunctive treatment approach remainsa matter of debate. This review examines the benefitsof neoadjuvant, peri-operative, and post-operative che-motherapy and chemoradiotherapy in this setting in anattempt to reach an evidence based conclusion. Recentfindings relating to the molecular characterisation ofoesophagogastric cancer and their impact on therapeu-tics are explored, in addition to the potential benefitsof fluoro-deoxyglucose positron emission tomography(FDG-PET) directed therapy.

脑缺血再灌注大鼠模型缺血半暗区脑组织及血液中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量明显升高,眼针可使其表达下调。 8.本课题揭示了眼针治疗缺血性脑血管病可能是通过抑制凋亡信号传导,从而抑制细胞凋亡,挽救缺血半暗区,从而对脑缺血再灌注损伤起保护作用。
目的 由于目前尚无特异有效的治疗方法,急性肺损伤(Acute

lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)的死亡率一直居高不下。最近,肾素-血管紧张素系统(Renin-angiotensin system,RAS)引起关注,有证据提示RAS与ALI/ARDS存在重要关联。为系统研究RAS与ALI/ARDS的关系,我们首先建立盲肠结扎穿孔术(Cecal ABT-263体内 ligation and puncture,CLP)诱导的ALI/ARDS动物模型,以观察ALI/ARDS中RAS系统的变化规律,并通过干预RAS系统观察动物病情和预后的改变;在此基础上,进一步研究RAS药物氯沙坦干预ALI/ARDS炎症反应通路的机制;同时,还观察ALI/ARDS模型的血管内皮细胞超微结构,并在体外实验验证氯沙坦干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用。期望通过这一系列的实验,为ALI/ARDS治疗探索新的途径。 研究内容和方法 第一部分: ALI/ARDS动物模型中RAS系统的变化 建立CLP诱导的ALI/ARDS动物模型,在手术后18小时观察小鼠的症状、血气分析、肺湿/干重比(W/D)和肺组织病理等指标;采用免疫组织化学、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和放射免疫等方法研究ALI/ARDS动物模型中RAS系统几种关键酶(ACE、ACE2和AngⅡ)的变化规律。 第二部分:RAS药物对ALI/ARDS的影响 小鼠ALI/ARDS模型复制成功后,分别给小鼠腹腔注射卡托普利(ACE拮抗剂)、重组小鼠ACE2(recombinant mouse ACE2,rm ACE2)和氯沙坦(AngⅡ的AT1受体阻滞剂),观察它们对ALI/ARDS动物的影响,在此基础上,着重观察RAS下游阻滞剂氯沙坦对ALI/ARDS的治疗效果。 第三部分:氯沙坦治疗ALI/ARDS的可能机制 收集假手术组、手术组和氯沙坦组的小鼠肺组织,分别提取肺组织细胞胞浆蛋白和胞核蛋白,采用Western blotting方法检测胞浆IκB-α表达的变化,采用电泳迁移率变动分析实验(Electrophoretic Mobility MK-1775分子量 Shift Assay,EMSA)检测胞核中NF-κB的表达变化;另外提取肺组织总蛋白,采用Western blotting方法检测肺组织中丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的变化(包括ERK1/2、p38和JNK)。 第四部分:氯沙坦对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 先用透视电镜观察ALI/ARDS肺血管内皮细胞的变化,提示ALI/ARDS病理变化中存在血管内皮细胞的变化;在此基础上,在体外培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC),培养成功后先用AngⅡ刺激细胞,采用流式细胞术观察细胞的凋亡率;然后再加入氯沙坦与AngⅡ共同作用于HUVEC,再次测定细胞的凋亡率,评价氯沙坦对血管内皮细胞的保护作用。

研究结果 第一部分: ALI/ARDS动物模型中RAS系统的变化 1、CLP能够诱导小鼠在手术后18小时出现典型的ALI/ARDS改变,手术组较假手术组小鼠肺水含量明显增多(W/D:6.08±0.64 vs 4.38±0.93,P
目的评价中药降压胶囊对老年单纯收缩期高血压(EISH)的疗效与作用机制。同时,探讨病证结合治疗模式的临床效应与作用途径。 方法(1)检索古代相关文献、近十年来老年高血压及老年单纯收缩期高血压的文献资料,整理分析西医、中医及中西医结合领域对老年高血压及老年单纯收缩期高血压的研究现状。(2)采用多中心、随机、双盲、对照的研究设计方法,将符合纳入病例标准的270例EISH患者分为三组,即中药降压胶囊组(简称中药组),降压胶囊联合尼莫地平组(简称联合组)和西药尼莫地平组(简称西药组)各90例。共241例患者完成试验,29例脱落,脱落率为10.7%,其中中药组脱落10人,联合组脱落14人,西药组脱落5人。试验疗程为4周,分析评价各组对患者临床症状、降低血压及改善生活质量的作用;观察各组治疗前后尿免疫球蛋白(IgG)、尿微量白蛋白(mALB)、β_2微球蛋白(β_2-MG)、转铁蛋白(TRF)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)五项联检指标的变化情况,分析各组对早期肾损害的防治作用。观察各组治疗前后血清一氧化氮(NO),血浆内皮素-1(ET-1)、血栓素B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-Keto-PGF_(1α))以及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)含量变化,探讨药物治疗作用的可能机制与途径。(3)以自发性高血压大鼠(SHR)模型为研究对象,将SHR66只,随机分为6组(每组11只):模型组(给予等量纯净水)、降压胶囊小剂量组(2g生药/kg,简称中药小剂量组)、降压胶囊大剂量(4g生药/kg,简称中药大剂量组)组、降压胶囊小剂量(2g生药/kg)+尼莫地平(5mg/kg)组(简称联合小剂量组)、降压胶囊大剂量(4g生药/kg)+尼莫地平(5mg/kg)组(简称联合大剂量组)、尼莫地平(5mg/kg)组(简称西药常量组)。连续灌胃8周。观察血压、左室重量指数(LVMI)、内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心肌血管紧张素1型(AT1)受体蛋白及mRNA的表达情况。

selleck公司 结果(1)老年单纯收缩期高血压属老年高血压的一个常见类型,具有随年龄增长收缩压逐渐升高、波动不稳、易发生心血管事件并严重影响生活质量的特点。中医药对老年高血压有较好的降压作用,尤其在改善症状、提高生活质量等方面有突出优势,但中西医结合的治疗模式,能明显取得优势互补临床效应。目前尚缺乏大样本符合循证医学原则治疗EISH的中医或中西医结合研究证据。 (2)降压胶囊治疗后能明显降低EISH收缩压,联合尼莫地平治疗有明显协同降压效应(P＜0.05),且联合用药降低收缩压作用明显优于单纯中药或单纯的西药治疗(P＜0.05)。降压胶囊对阴虚阳证候患者的降压效应明显优于非阴虚阳亢证候患者(P＜0.05):中西联合用药对阴虚阳亢证候患者的降压作用,又明显优于单纯中药或西药两组阴虚阳亢证候患者(P＜0.05)。降压胶囊及其联合尼莫地平两组对EISH患者24h收缩压及白天收缩压均较治疗前明显降低(P＜0.05):而联合用药对患者夜间收缩压也有明显降低(P＜0.05),同时,对白天收缩压的降低作用既明显优于单纯中药和单纯的西药组(P＜0.05)。降压胶囊及其联合尼莫地平两组均能明显改善患者的临床症状积分值(P＜0.

目前丹参酮类物质的生物合成技术也取得了瞩目的成就.此外丹参药理活性的研究主要集中于抗肿瘤、天然抗氧化、抗菌消炎、治疗心脑血管疾病等方面,且取得了很好的临床效果.这些研究为丹参的全面开发利用提供了参考.
Objective:To study the mechanism underlying the inhibitory effect of Qingluo Tongbi Granule(清络通痹颗粒,QTG) on osteoclast differentiation in rheumatoid arthritis in rats.Methods:Fibroblast and monocyte co-culture were used to induce osteoclast differentiation in adjuvant-induced arthritic(AIA) rats.Serum containing QTG was prepared and added to the osteoclasts,and activation of the tumor necrosis factor receptorassociated factor 6/mitogen-activated protein kinase/nuclear factor of activated www.selleck.cn/products/ve-821.html T cells,cytoplasmic1(TRAF6/MAPK/NFATd) pathways was examined.Results:The induced osteoclasts

were multinucleated and stained positive for tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP) staining.Serum containing QTG at 14.4,7.2 or 3.6 g/kg inhibited the FDA approved Drug Library cell assay activation of TRAF6,extracellular regulated protein kinase(ERK)1/2,c-Jun N-terminal kinase(JNK)and p38 and decreased the percentage of cells with nuclear NFATd in a dose-dependent manner,the high and middle doses exhibited clear inhibitory activity(P0.05).Conclusions:Serum containing QTG could generally inhibit the TRAF6/MAPK pathways and possibly inhibit the NFATd pathway.In addition,QTG may regulate other signaling pathways that are related to osteoclast differentiation and maturation.
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在对细胞外刺激因素进行应答时发挥着重要作用,介导多种细胞行为的变化。其中,p38信号通路是MAPK家族中关键通路之一,其介导细胞生长、发育、分化及死亡的全过程。丙泊酚除具有麻醉作用外,还可作用于一些MAPK,包括细胞外信号调节激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK,从而发挥抗肿瘤、抗炎、抗氧化和抗凋亡等积极作用。该文通过总结p38MAPK信号通路在丙泊酚对器官保护中所发挥的作用,为丙泊酚的临床器官保护作用机制提供一种新的研究思路。
心肌缺血再灌注损伤(MIRI)是指心肌细胞缺血后重新恢复血液供应可产生更严重的损伤。MIRI与心肌细胞凋亡密切相关,心肌细胞凋亡可能是MIRI发病机制中的重要环节之一,已成为当今研究的焦点。近年来,关于细胞凋亡的信号转导通路越来越受学者们关注,有多条细胞凋亡相关的细胞信号转导通路参与MIRI的病理生理过程。本文从MIRI时细胞凋亡相关的细胞信号转导通路进行综述,旨在为MIRI的防治提供理论基础。
目的:探讨巴马系小型猪冠状动脉(冠脉)微栓塞(CME)致心功能损伤与程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达的动态变化及关系。方法:60头巴马系小型猪经微导管左前降支注入微栓塞球构建冠脉微栓塞组;注射生理盐水构建假手术组,每组小型猪均为30只。每组小型猪随机分为0

有 h、3 h、6 h、9 h、12 h、24 h六个不同时间点观察(每个时间点小型猪均为5头)。应用心脏超声心动图检测心功能指标;组织病理切片苏木素-伊红(HE)染色和苏木素碱性复红苦味酸(HBFP)染色进行梗死区域测量;荧光定量多聚酶链反应(PCR)检测心肌组织PDCD4与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mR NA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织PDCD4与TNF-α蛋白表达。结果:超声心动图参数显示,冠脉微栓塞组除0

h、24 h外其余时间点左心室射血分数(LVEF)均较假手术组明显降低(P0.05)。荧光定量PCR结果显示,冠脉微栓塞组心肌组织PDCD4与TNF-αmR NA表达都是在3 h开始升高,9 h达高峰,12 h和24 h下降(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:PDCD4参与了冠脉微栓塞致心功能的损伤,并呈现出明显的时间变化规律,可能是通过调控心肌TNF-α的表达实现。
牙龈卟啉单胞菌(Pg)是慢性牙周炎的重要病原菌,其毒力部分来自细菌细胞壁及产物,如脂多糖、菌毛、荚膜多糖和牙龈蛋白酶。这些化学成分在诱导宿主先天和后天的免疫反应中起重要的作用,如诱导巨噬细胞的极化和炎性细胞因子的释放。极化的巨噬细胞对炎症的进展、组织的破坏和炎症的抑制、损伤组织的修复与重建等具有重要作用。该文就巨噬细胞的极化特点以及Pg对巨噬细胞极化的影响进行综述,为牙周病的防治寻找新的途径。
目的研究p38β丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)对矿化诱导液诱导的人牙髓细胞(h DPC)成牙本质向分化的影响。方法体外培养hDPC,Western blot检测hDPC矿化诱导0、3、7、14 d后p38β蛋白表达情况;构建3条慢病毒载体p38β鄄shRNA并分别转染hDPC,Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测p38β蛋白及基因表达;设立空白对照组、矿化诱导(OM)组、OM+空载体(NC)组、OM+sh鄄p38β组共4组。成牙本质向矿化诱导1、7、14 d,实时荧光定量PCR检测成牙本质向分化指标牙本质涎磷蛋白(DSPP)、碱性磷酸酶(ALP)的基因表达;Western blot检测成牙本质向分化指标DSPP蛋白的表达;成牙本质向矿化诱导14 d,茜素红染色检测矿化结节的形成情况。结果 Western blot结果表明正常牙髓组织中存在p38β蛋白;成功构建p38β稳定低表达的hDPCs(实时荧光定量PCR显示三条序列干扰效率分别为55.4%、68.3%、54.

674,P=0.005)。(3)通过AliBaba2.1转录因子预测软件预测EGF G61A位点前后序列的转录结合因子结合情况发现,G等位提供了更多的转录因子SP1的顺式作用原件。 结论: (1)EGF外显子区域的单核苷酸多态性位点:外显子1中的S16R、外显子8中的R431K、外显子14中的I708M、外显子15中的D784V,同HCC的发生之间不存在遗传学关联。 (2)EGF 5’调控区的G61A同肝癌的发生显著相关。A等位可能通过等位特异的方式,降低EGF基因的转录使表皮生长因子的表达量下降,使肝癌的发生风险降低。我们的结果提示EGF基因的遗传多态性在肝癌的发生中发挥重要的作用。
目的 恶性肿瘤发生远处转移是肿瘤患者病程进展、致残和致死的主要原因。侵袭性是指肿瘤细胞侵入邻近组织的能力,该过程是恶性肿瘤的主要特征,亦是其发生转移的第一步。与肿瘤细胞侵袭性和发生转移相关的机制极为复杂,目前人们已经对该过程中的一些蛋白水解酶和原癌基因有了初步认识,如与细胞微环境中细胞外基质降解相关的基质金属蛋白酶-2以及与肿瘤侵袭性生长相关的原癌基因c-met。另一方面,开发具有抗癌作用的天然小分子无机化合物是目前抗肿瘤药物研发的一个热点。本文旨于研究轻稀土化合物氯化镧对肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的作用,分别以与肿瘤侵袭和转移相关的蛋白水解酶和原癌基因为靶点,进一步阐明稀土对肿瘤细胞作用的作用机制,扩大稀土化合物的应用领域,为临床抗肿瘤药物的研发提供新方向。

CP-690550 价格 方法 (1)采用MTT法观察轻稀土化合物氯化镧对乳腺癌细胞MCF-7及人纤维肉瘤细胞HT-1080的毒性作用。 (2)采用侵袭性试验探讨氯化镧对人纤维肉瘤细胞HT-1080侵袭性的影响。 (3)通过明胶酶谱法和Western Blot测定低剂量氯化镧(≤20μmol/L)对人纤维肉瘤细胞HT-1080细胞基质金属蛋白酶-2表达和活性的影响。 (4)应用RT-PCR法,分别调查低剂量氯化镧对肿瘤细胞HT-1080细胞基质金属蛋白酶-2转录的影响(≤20μmol/L)以及对乳腺癌细胞MCF-7原癌基因c-met转录的影响(≤100μmol/L)。 (5)构建Luciferase基因报告系统,应用PCR技术合成MMP-2启动子区域的突变位点,探讨轻稀土化合物对人纤维肉瘤细胞株HT-1080 MMP-2的作用机制。 结果 (1)细胞毒性试验表明,轻稀土化合物氯化镧浓度低于50μmol/L时,氯化镧无论对MCF-7细胞株还是HT-1080细胞株的生长均无抑制作用。随着浓度增加,氯化镧对肿瘤细胞的增殖出现抑制作用,且抑制作用随浓度的增加而增强;但是当氯化镧浓度过大(＞400μmol/L)时,氯化镧对肿瘤细胞增殖的抑制作用不再出现浓度依赖性。此外,不同细胞对氯化镧的敏感性不同,人纤维肉瘤细胞株HT-1080对氯化镧的敏感性更高。 {Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|buy Anti-infection Compound Library|Anti-infection Compound Library半抑制浓度|Anti-infection Compound Library价格|Anti-infection Compound Library花费|Anti-infection Compound Library溶解度|Anti-infection Compound Library购买|Anti-infection Compound Library制造商|Anti-infection Compound Library查找购买|Anti-infection Compound Library订单|Anti-infection Compound Library mouse|Anti-infection Compound Library chemical structure|Anti-infection Compound Library分子量|Anti-infection Compound Library molecular weight|Anti-infection Compound Library数据表|Anti-infection Compound Library supplier|Anti-infection Compound Library体外|Anti-infection Compound Library细胞系|Anti-infection Compound Library concentration|Anti-infection Compound Library nmr|Anti-infection Compound Library体内|Anti-infection Compound Library clinical trial|Anti-infection Compound Library cell assay|Anti-infection Compound Library screening|Anti-infection Compound Library high throughput|buy Antiinfection Compound Library|Antiinfection Compound Library半抑制浓度|Antiinfection Compound Library价格|Antiinfection Compound Library花费|Antiinfection Compound Library溶解度|Antiinfection Compound Library购买|Antiinfection Compound Library制造商|Antiinfection Compound Library查找购买|Antiinfection Compound Library订单|Antiinfection Compound Library chemical structure|Antiinfection Compound Library数据表|Antiinfection Compound Library supplier|Antiinfection Compound Library体外|Antiinfection Compound Library细胞系|Antiinfection Compound Library concentration|Antiinfection Compound Library clinical trial|Antiinfection Compound Library cell assay|Antiinfection Compound Library screening|Antiinfection Compound Library high throughput|Anti-infection Compound high throughput screening| (2)通过侵袭性试验表明,在对肿瘤细胞生长无明显作用的浓度范围内(＜50μmol/L),氯化镧对肿瘤细胞的侵袭性有抑制作用,且抑制作用随氯化镧浓度的增加而增强。 (3)通过明胶酶谱法和Western Blot试验证实,对肿瘤生长无抑制作用的浓度范围(＜50μmol/L)的氯化镧可抑制pro-MMP-2的活性及含量,但是其对活化形式的MMP-2无抑制作用。 (4)应用RT-PCR法,进一步观察了低浓度氯化镧对原癌基因c-met和蛋白水解酶MMP-2基因转录的作用。低浓度氯化镧可以下调c-met以及MMP-2的基因转录,并且抑制作用随氯化镧浓度的增加而增强。

(5)通过Luciferase报告系统以及启动子突变的方法测定MMP-2的启动子活性,证实氯化镧通过作用于人纤维肉瘤细胞HT-1080 MMP-2启动子区的CREB结合位点,阻断了PKA/CREB通路而抑制该细胞MMP-2mRNA的转录并降低MMP-2的分泌,从而降低了肿瘤细胞的侵袭性。 结论 不同浓度的轻稀土化合物氯化镧对肿瘤细胞的作用不同,高浓度氯化镧(＞100μmol/L)可抑制肿瘤细胞的增殖,低浓度的氯化镧(＜50μmol/L)对肿瘤细胞的侵袭性有一定抑制的作用。同一浓度的氯化镧对不同肿瘤细胞的增殖作用不同。低浓度的氯化镧通过抑制与肿瘤侵袭性相关的蛋白水解酶(MMP-2)的转录和表达以及抑制与“侵袭性”生长相关的原癌基因c-met表达,降低了肿瘤的侵袭性。这为未来临床个体化治疗提供了初步依据,亦为扩大稀土资源在医药领域的应用提供了新方向。
目的:检测mTOR/P70S6K信号通路中mTOR和P70S6K在肝细胞肝癌组织(HCC)中的表达,探讨其在HCC发生、发展中的作用及临床意义。

方法:选取20例HCC组织及相应癌旁组织,10例正常肝组织。采用两步法提取总RNA, RT-PCR法检测mTOR及P70S6K mRNA在HCC组织和相应的癌旁组织及正常肝组织中的表达情况,并分析mTOR及P70S6K mRNA的表达与相关临床病理参数的关系。 结果: 1)mTOR mRNA在HCC组织中的表达水平(0.594±0.218)明显高于癌旁组织(0.437±0.156)及正常肝组织(0.383±0.081)(P
目的: 舌部鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是颌面外科较常见的肿瘤,其发病率,致死率位于口腔癌的首位,舌癌的恶性程度高,浸润性强并易早期发生淋巴结转移,预后较差,术后常继发畸形,对患者的生存质量造成极大的影响。自分泌运动因子受体(autocrine motility factor receptor,AMFR)能刺激下游区域的信号传导通路导致细胞运动的上调,致其随机和定向运动。肝细胞生长因子(heptaocyte Sorafenib growth factor,HGF),其受体是由原癌基因C-Met编码产生的跨膜蛋白,与人类许多肿瘤的生长,侵袭及转移密切相关。本实验通过免疫组化SP法检测正常舌体组织及舌癌中AMFR、C-Met的表达,并分析其表达与临床病理特征之间的关系。 材料与方法: 1.选取正常舌体组织(normal tongue tissue ,NOM )10例、TSCC 80例,收集性别、年龄、肿瘤部位、病理分级、淋巴结转移及临床分期等资料。 2.采用免疫组化SP法检测10例NOM、及80例TSCC石蜡切片中AMFR和C-Met的表达。正常舌体组织作对照。 3.统计分析NOM及TSCC中AMFR和C-Met表达的差异;分析AMFR和C-Met蛋白的表达与TSCC各临床病理参数之间的关系,探讨AMFR和C-Met表达水平之间的关系。 结果: 1.在TSCC组织中,AMFR阳性表达在癌细胞的细胞质和胞膜,有个别的病例偶见核阳性,阳性率为:76.25%,其中阳性(+):32例(40%);强阳性(++):29例(36.25%),在NOM中不表达。在TSCC中AMFR高表达与舌癌的TNM有关(P0.05)。 2.