脑缺血再灌注大鼠模型缺血半暗区脑组织及血液中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量明显升高,眼针可使其表达下调。 8.本课题揭示了眼针治疗缺血性脑血管病可能是通过抑制凋亡信号传导,从而抑制细胞凋亡,挽救缺血半暗区,从而对脑缺血再灌注损伤起保护作用。
目的 由于目前尚无特异有效的治疗方法,急性肺损伤(Acute
lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)的死亡率一直居高不下。最近,肾素-血管紧张素系统(Renin-angiotensin system,RAS)引起关注,有证据提示RAS与ALI/ARDS存在重要关联。为系统研究RAS与ALI/ARDS的关系,我们首先建立盲肠结扎穿孔术(Cecal ABT-263体内 ligation and puncture,CLP)诱导的ALI/ARDS动物模型,以观察ALI/ARDS中RAS系统的变化规律,并通过干预RAS系统观察动物病情和预后的改变;在此基础上,进一步研究RAS药物氯沙坦干预ALI/ARDS炎症反应通路的机制;同时,还观察ALI/ARDS模型的血管内皮细胞超微结构,并在体外实验验证氯沙坦干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用。期望通过这一系列的实验,为ALI/ARDS治疗探索新的途径。 研究内容和方法 第一部分: ALI/ARDS动物模型中RAS系统的变化 建立CLP诱导的ALI/ARDS动物模型,在手术后18小时观察小鼠的症状、血气分析、肺湿/干重比(W/D)和肺组织病理等指标;采用免疫组织化学、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和放射免疫等方法研究ALI/ARDS动物模型中RAS系统几种关键酶(ACE、ACE2和AngⅡ)的变化规律。 第二部分:RAS药物对ALI/ARDS的影响 小鼠ALI/ARDS模型复制成功后,分别给小鼠腹腔注射卡托普利(ACE拮抗剂)、重组小鼠ACE2(recombinant mouse ACE2,rm ACE2)和氯沙坦(AngⅡ的AT1受体阻滞剂),观察它们对ALI/ARDS动物的影响,在此基础上,着重观察RAS下游阻滞剂氯沙坦对ALI/ARDS的治疗效果。 第三部分:氯沙坦治疗ALI/ARDS的可能机制 收集假手术组、手术组和氯沙坦组的小鼠肺组织,分别提取肺组织细胞胞浆蛋白和胞核蛋白,采用Western blotting方法检测胞浆IκB-α表达的变化,采用电泳迁移率变动分析实验(Electrophoretic Mobility MK-1775分子量 Shift Assay,EMSA)检测胞核中NF-κB的表达变化;另外提取肺组织总蛋白,采用Western blotting方法检测肺组织中丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的变化(包括ERK1/2、p38和JNK)。 第四部分:氯沙坦对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 先用透视电镜观察ALI/ARDS肺血管内皮细胞的变化,提示ALI/ARDS病理变化中存在血管内皮细胞的变化;在此基础上,在体外培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC),培养成功后先用AngⅡ刺激细胞,采用流式细胞术观察细胞的凋亡率;然后再加入氯沙坦与AngⅡ共同作用于HUVEC,再次测定细胞的凋亡率,评价氯沙坦对血管内皮细胞的保护作用。
研究结果 第一部分: ALI/ARDS动物模型中RAS系统的变化 1、CLP能够诱导小鼠在手术后18小时出现典型的ALI/ARDS改变,手术组较假手术组小鼠肺水含量明显增多(W/D:6.08±0.64 vs 4.38±0.93,P
目的评价中药降压胶囊对老年单纯收缩期高血压(EISH)的疗效与作用机制。同时,探讨病证结合治疗模式的临床效应与作用途径。 方法(1)检索古代相关文献、近十年来老年高血压及老年单纯收缩期高血压的文献资料,整理分析西医、中医及中西医结合领域对老年高血压及老年单纯收缩期高血压的研究现状。(2)采用多中心、随机、双盲、对照的研究设计方法,将符合纳入病例标准的270例EISH患者分为三组,即中药降压胶囊组(简称中药组),降压胶囊联合尼莫地平组(简称联合组)和西药尼莫地平组(简称西药组)各90例。共241例患者完成试验,29例脱落,脱落率为10.7%,其中中药组脱落10人,联合组脱落14人,西药组脱落5人。试验疗程为4周,分析评价各组对患者临床症状、降低血压及改善生活质量的作用;观察各组治疗前后尿免疫球蛋白(IgG)、尿微量白蛋白(mALB)、β_2微球蛋白(β_2-MG)、转铁蛋白(TRF)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)五项联检指标的变化情况,分析各组对早期肾损害的防治作用。观察各组治疗前后血清一氧化氮(NO),血浆内皮素-1(ET-1)、血栓素B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-Keto-PGF_(1α))以及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)含量变化,探讨药物治疗作用的可能机制与途径。(3)以自发性高血压大鼠(SHR)模型为研究对象,将SHR66只,随机分为6组(每组11只):模型组(给予等量纯净水)、降压胶囊小剂量组(2g生药/kg,简称中药小剂量组)、降压胶囊大剂量(4g生药/kg,简称中药大剂量组)组、降压胶囊小剂量(2g生药/kg)+尼莫地平(5mg/kg)组(简称联合小剂量组)、降压胶囊大剂量(4g生药/kg)+尼莫地平(5mg/kg)组(简称联合大剂量组)、尼莫地平(5mg/kg)组(简称西药常量组)。连续灌胃8周。观察血压、左室重量指数(LVMI)、内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心肌血管紧张素1型(AT1)受体蛋白及mRNA的表达情况。
selleck公司 结果(1)老年单纯收缩期高血压属老年高血压的一个常见类型,具有随年龄增长收缩压逐渐升高、波动不稳、易发生心血管事件并严重影响生活质量的特点。中医药对老年高血压有较好的降压作用,尤其在改善症状、提高生活质量等方面有突出优势,但中西医结合的治疗模式,能明显取得优势互补临床效应。目前尚缺乏大样本符合循证医学原则治疗EISH的中医或中西医结合研究证据。 (2)降压胶囊治疗后能明显降低EISH收缩压,联合尼莫地平治疗有明显协同降压效应(P＜0.05),且联合用药降低收缩压作用明显优于单纯中药或单纯的西药治疗(P＜0.05)。降压胶囊对阴虚阳证候患者的降压效应明显优于非阴虚阳亢证候患者(P＜0.05):中西联合用药对阴虚阳亢证候患者的降压作用,又明显优于单纯中药或西药两组阴虚阳亢证候患者(P＜0.05)。降压胶囊及其联合尼莫地平两组对EISH患者24h收缩压及白天收缩压均较治疗前明显降低(P＜0.05):而联合用药对患者夜间收缩压也有明显降低(P＜0.05),同时,对白天收缩压的降低作用既明显优于单纯中药和单纯的西药组(P＜0.05)。降压胶囊及其联合尼莫地平两组均能明显改善患者的临床症状积分值(P＜0.