33(48h)和43.18μmol/L(72h),而对Aspc-1细胞的IC50达到19.65(48h)和13.32μmol/L (72h),均优于环巴胺；且对Aspc-1选择性更高。化合物16、17的抑制活性也优于环巴胺。初步构效关系表明,介芬胺的11位为亚甲基时活性最优,无论是羰基还是羟基取代活性均降低；藜芦胺的哌啶环接入大小合适的基团时会有助于活性提升。该结果为环巴胺类Hh通路抑制剂的结构优化提供了依据。
目的结肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一。目前，外科切除联合化疗和/或放射治疗仍然是针对结肠癌的主要治疗方法，但是仍有很高的肿瘤复发率。虽然辅助放化疗能够在一定程度上延长患者的生存期，但同时也伴随着严重的副作用，因此急需发展更有效的治疗结肠癌的策略。近年来，临床前数据表明肿瘤干细胞（cancer stem cell，CSC）起始了肿瘤的生长并且是肿瘤自我更新、分化、复发和转移以及放化疗耐受性的关键。根据肿瘤干细胞（CSC）理论，只有靶向清除CSC，才有可能治愈肿瘤。因此，本文以CD44为筛选标志，从小鼠结肠癌细胞系CT-26中分选出CD44+细胞作为小鼠结肠癌干细胞，探讨CD44+CT-26细胞裂解物和总RNA致敏的树突状细胞（dendritic Regorafenib 价格 cell，DC）是否能诱导靶向肿瘤干细胞的抗肿瘤免疫应答。

方法用免疫磁珠法分离获得CD44+CT-26细胞，用含20ng/ml bFGF、20ng/mlEGF、2%B27的无血清DMEM/F12培养基培养扩增。将CD44+CT-26的细胞裂解物或总RNA分别作为抗原负载小鼠骨髓来源的DC，获得Pro-DC和RNA-DC疫苗，免疫接种有CD44+CT-26细胞的BALB/c小鼠，进行免疫保护实验和免疫治疗实验，每2-3天测量肿瘤大小并观察瘤体生长及小鼠存活情况。取小鼠的脾脏，体外检测T细胞的细胞毒性以及IFN-γ分泌能力。 结果（1）免疫保护组：与PBS组和未致敏DC组相比，Pro-DC组和RNA-DC组的成瘤时间延迟且肿瘤生长缓慢，尤其是Pro-DC组在接种后第15天仍未长出肿瘤。Pro-DC组和RNA-DC组的肿瘤重量显著低于对照组和未致敏DC组（P<0.05）；生存周期分析发现，Pro-DC和RNA-DC组小鼠的生存期显著长于PBS组和未致敏DC组（P<0.05），第50天时未致敏DC组和PBS组小鼠已经全部死亡，至第60天实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的生存率分别为60%和50%；Pro-DC和RNA-DC组CTL对CD44+CT-26的杀伤作用及细胞上清液中IFN-γ的分泌量显著高于PBS组和未致敏DC组（P<0.05）；另外，与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫保护作用更加显著（P<0.05）。（2）免疫治疗组：与PBS组和未致敏DC组相比，经Pro-DC和RNA-DC治疗后，肿瘤的生长受到了显著的抑制。实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的肿瘤重量显著低于对照组和未致敏DC组（P<0.05）；Pro-DC和RNA-DC组小鼠的生存期显著长于PBS组和未致敏DC组（P<0.05），第50天时未致敏DC组和PBS组小鼠已经全部死亡，至第60天实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的生存率分别为60%和10%；Pro-DC或RNA-DC组CTL对CD44+CT-26的杀伤作用以及细胞上清液中IFN-γ的分泌量显著高于PBS组和未致敏DC组（P<0.05）；另外，与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫治疗作用更加显著（P
目的：前列腺癌（Prostatic

哪里 cancer,Pca）是西方国家最常见的男性恶性肿瘤，而近年我国该病发病率亦逐年上升，大部分患者最终会进展为非雄激素依赖的Pca，但目前尚无公认可以有效的治疗非雄激素依赖Pca的手段。因此，寻求可以有效治疗非雄激素依赖前列腺癌的新的治疗手段是目前临床迫切需要解决的问题。三氧化二砷（Arsenic trioxide，As203，ATO)已被证实对于治疗复发性或难治性急性早幼粒细胞白血病（APL）具有良好疗效。但某些二期临床试验结果发现单独用ATO治疗一些实体瘤，如转移性肾细胞癌或转移性黑色素瘤，其疗效相对有限。故寻找一种辅助药物，与ATO联合使用，使低浓度的ATO发挥高浓度的作用效果，并降低潜在的毒副作用，很有可能是一种改进ATO治疗某些实体肿瘤的可行有效的方法。Hedgehog（Hh）信号通路晚期前列腺癌中呈高表达。最近研究表明ATO能够通过抑制Hh信号通路下游GLI蛋白而抑制尤文肉瘤和生神经管细胞瘤的增殖；而Smo阻滞剂Cyclopamine（CYC）亦可通过对Hh信号通路的阻滞作用而抑制前列腺癌等肿瘤的生长。故本实验选取非雄激素依赖前列腺癌PC3细胞为研究对象，观察低剂量三氧化二砷联合Cyclopamine对PC3细胞的抑制作用及其可能的分子作用机制。 购买AZD8055 方法：1.运用免疫荧光及DAPI染色鉴定PC3细胞及PC3细胞内HH-GLI信号通路的表达情况。2.采用MTT比色法检测不同浓度ATO及Cyclopamine单独或联合使用对不同的时间点PC3细胞生长的抑制。3.应用裸鼠致瘤实验进一步验证ATO联合Cyclopamine对PC3细胞生长的抑制效果。4.Real-time PCR法检测ATO联合Cyclopamine对PC3细胞内Hh信号通路中重要分子的mRNA的表达的影响。5.检测ATO联合Cyclopamine对PC3细胞内细胞凋亡及细胞周期的影响。 结果：1.免疫荧光剂DAPI染色结果显示肿瘤增殖抗原Ki67、前列腺特异性膜抗原PSAM及HH-GLI1信号通路中重要的核内转录因子GLI1均在PC3细胞中呈高表达2.MTT结果显示ATO或Cyclopamine单独使用均能抑制PC3细胞的生长，呈现明显的剂量及时间依赖性；二者联合使用则优于单剂量、甚至二倍剂量的ATO或Cyclopamine，经Chou’s公式分析二者可显著协同抑制PC3细胞生长。3.