FL在不同发病阶段采取不同治疗方案:在早期阶段,主要为放射治疗;在疾病进展至中晚期时,进行联合化疗或免疫治疗。免疫治疗中,嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞(CAR-T)是从基因层面研究出来的精准靶向治疗的新方法,组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂与肿瘤细胞存活关系密切,使用肿瘤有疫苗可增强FL的抗肿瘤免疫,免疫调节剂调节肿瘤生存的免疫微环境并同传统化疗药物起到协同作用,新型单克隆抗体的研究将突破原有单克隆抗体的局限性而发挥更好疗效。上述治疗研究仍处于临床试验阶段,需进一步研究发挥治疗作用。本文就FL免疫治疗方面的新进展,如使用CAR-T细胞、HDAC抑制剂、肿瘤疫苗、免疫调节剂和新型单克隆抗体等进行治疗作一综述。
时间近年来,随着人类基因组计划的完成、绘制人类基因组甲基化可变位点图谱计划的展开、有关表观遗传学与肿瘤的发生发展及表观遗传治疗药物研究的深入,尤其是DNA甲基转移酶和组蛋白去乙酰化抑制剂等在肿瘤患者临床治疗的成功应用,表观遗传学逐渐成为肿瘤治疗研究的热点。本文综述了近年来基于表观遗传学的抗肿瘤药物药理学作用研究进展,以期为癌症的治疗和基础研究提供那个一些新的思路。
DNA双链断裂(DSB)是细胞受到电离辐射后最严重的DNA损伤,导致细胞凋亡、细胞周期阻滞以及DNA损伤修复。DNA损伤发生后,激活细胞内DNA损伤应答,启动DSB修复通路同源重组(HR)和非同源重组末端连接(NHEJ)。HR修复分为联会前期、联会期和联会后期,以姐妹染色单体为模板,进行无错误修复,是保护基因组完整性的主要机制。对IR导致的DSB HR和NHEJ具有互补关系,G2和S期HR是主要修复方式。

针对HER-2的靶向治疗不但在乳腺癌获得了成功,在胃癌也开展了一系列的临床研究。例如抗HER-2的曲妥珠单抗在晚期胃癌中的Ⅲ期临床试验获得成功,证明在胃癌中靶向HER-2治疗具有良好的临床应用前景。拉帕替尼是一个靶向HER-2和EGFR的双靶点小分子抑制剂,在晚期胃癌的Ⅱ期试验中,证实能明显延长HER-2阳性病人的生以及存时间。但是,Ⅲ期临床试验虽然有延长生存的趋势,但没有统计学差异的显著性。在获得疾病控制患者中,部分又很快进展。因此,探索原发耐药和获得性耐药是提高拉帕替尼疗效和个体化治疗的重要参考。既往许多证据表明,酪氨酸激酶受体旁通路激活引起下游PI3K/AKT/mTOR或Ras/Raf/MAPK通路激什么活可导致靶向HER-2的治疗耐药。本课题在高通量慢病毒筛选的基础上,从几个可能的耐药相关基因中挑选了胰岛素受体(insulin receptor, IR)和胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor1receptor, IGF1R)进行深入研究,探讨IR和I也许GF1R在HER-2阳性胃癌细胞对拉帕替尼耐药过程中所起的作用及其机制。 方法：N87、SNU216是HER-2阳性的人胃癌细胞系,均对拉帕替尼敏感。siRNA验证IR下调是否增加拉帕替尼在N87和SNU216中的毒性作用。药物协同试验用于验证抑制HER-2和抑制IR/IGF1R是否有协同作用。克隆形成试验用于验证胰岛素激活IR可否引起拉帕替尼在N87和SNU216中耐药。

结论：APE1蛋白的表达在乳腺癌组织及癌旁组织中存在明显差异，且在不同ER、HER-2状态，不同分子表型患者中也存在差异。APE1阴性表达者总生存时间长，APE1表达状态为乳腺癌患者的独立预后因素。APE1在乳腺癌细胞中的表达水平明显高于正常乳腺细胞，且与三阴表型密切相关。表明APE1是一种癌基因，检测APE1的表达水平对乳腺癌，特别是三阴乳腺癌的预后判断有一定的指导意义。 第二部分PAR无P-1抑制剂Olaparib对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响 目的：奥拉帕尼处理后检测其对各乳腺癌细胞株增殖及凋亡的影响。 方法：设置不同的浓度梯度及时间，奥拉帕尼分别处理正常乳腺细胞（MCF-10A）及乳腺癌细胞株（MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3、ZR-75-30、T47D），利用MTT及流式细胞技术检测药物对各细胞株的抑制增殖及凋亡作用。 结果：奥selleck合成拉帕尼对不同类型乳腺细胞株的IC50值的范围为11.206~32.164μM，对正常乳腺细胞的IC50值大于100μM。在浓度为50μM，处理48h时，流式细胞技术检测各细胞株的凋亡率为13.4%~95.74%。 结论：奥拉帕尼对不同类型乳腺癌细胞株的敏感性有所差异，对Her-2过表达型及三阴型较为敏感。第三部分奥拉帕尼对MDA-MB-231中APE1表达的影响及为什么RNAi 技术敲低APE1方法的建立 目的：通过免疫蛋白印迹法检测经奥拉帕尼处理后MDA-MB-231细胞中APE1的表达水平；RNAi技术敲低MDA-MB-231细胞中APE1表达。 方法：根据第二部分实验中所得的IC50值及最佳作用时间，利用免疫蛋白印迹法检测奥拉帕尼对MDA-MB-231细胞中APE1蛋白表达水平的影响；利用MLP-shRNA-APE1质粒载体转染MDA-MB-231细胞，荧光显微镜观察绿色荧光，免疫蛋白印迹法检测敲低效率。

将细胞同步化在有丝分裂期后,下调SLC39A6剪切变异体2表达后有丝分裂进程速度加快。采用X染色体免疫荧光原位杂交检测下调SLC39A6剪切变异体2引起染色体不稳定性变化增加,实时定量PCR和western检测SLC39A6剪切变异体2表达的变化具有周期性。 结论：SLC39A6参与Wortmannin半抑制浓度细胞有丝分裂检测点的调控并促进肿瘤基因组不稳定性的增加。 第二部分建立活体肿瘤细胞有丝分裂观测平台中文摘要 目的：肿瘤细胞染色体分裂异常是导致肿瘤基因组不稳定的根本原因,这种不稳定性促进了肿瘤的进展和恶化。本文旨在探讨H2B-RFP融合蛋白能够更好的观测活体没有肿瘤细胞有丝分裂过程。 方法：将携带H2B-RFP融合基因的质粒瞬时转染人宫颈癌细胞系Hela并利用抗性药物筛选得到阳性细胞克隆,利用激光共聚焦显微镜活体培养系统记录稳定筛选Hela细胞的细胞周期。 结果：得到稳定表达H2B- RFP的Hela细胞且其与亲本NU7441浓度Hela细胞相比对细胞周期的运行没有影响,并且可以展示Hela细胞有丝分裂的进程。 结论：H2B-RFP融合蛋白可以非常敏感的显示肿瘤细胞的染色体并跟踪活体状态下肿瘤细胞有丝分裂过程。 第三部分乳腺癌相关成纤维细胞分离培养及鉴定 目的：分离培养和鉴定乳腺癌相关成纤维细胞及其与之配对的正常乳腺成纤维细胞,并初步探讨两者生物学性状的差异。

侵袭和转移是宫颈癌患者死亡的主要原因。宫颈癌的侵袭和转移是一个复杂的多步骤过程,但其确切机制目前尚未明了。目前,侵袭和转移已成为宫颈癌研究的焦点。 c-Met是肝细胞生长因子(Hepatocyte gorwth factor, HGF)的酪氨酸激酶受体。在生理和病理情况下,c-Met通过与其配体结合发挥多种作用,包括细胞增殖和细胞运动。HGF/c-Met系统在肿瘤NU7441数据表发展中同样扮演重要角色。骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是一种分泌型细胞外基质钙结合磷酸化糖蛋白,其含有特异的精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸粘附序列,在生物体内具有重要作用。但是OPN的高表达通常意味着肿瘤的转移能力的增强,通过与其特异受体整合素和CD44结合增强肿瘤细胞迁移,侵袭和转移。目前国内外文献未见二者在宫颈鳞癌研究中的联合而且报道,本文通过蛋白水平检测c-Met、OPN在宫颈鳞癌的表达情况,探讨c-Met、OPN在宫颈癌的发生发展,浸润和转移中的作用。 材料与方法 1实验分组 组织标本来源于郑州大学第二附属医院病理科2007年3月～2009年9月手术切除并经病理证实的宫颈鳞癌50例,另取36例宫颈上皮内瘤样病变组织(CIN)、12例正常宫颈组织(子宫肌瘤行子宫Dabrafenib半抑制浓度全切者的宫颈组织)作对照。 2实验方法 应用免疫组化S-P法检测c-Met、OPN在宫颈鳞癌组织、宫颈上皮内瘤变组织及正常宫颈组织中的表达情况。结合临床病理特征,分析二者在宫颈鳞癌发生发展及侵袭转移中的作用。3统计方法 实验数据应用SPSS 16.0版软件包进行统计分析。计数资料样本率之间的比较采用Pearson X2检验和确切概率法,c-Met和OPN的相关性采用Pearson相关分析,以a=0.05为检验水准。

纳米粒子以其独特的尺度效应以及微尺度上的特殊的物理化学特性,近年来在各个领域有着广泛的应用,尤其是把纳米粒子作为一种药物载体应用在医药领域里。二氧化硅纳米粒子大量应用于在工业农业以及医药行业。本硕士论文的前两部分以斑马鱼幼鱼做为模式生物评价的平台,通过用不同浓度梯度与粒径(15nm与50nm)的二氧化硅纳米粒子处理斑马鱼受精卵,通过评价其发育毒性与神经毒性来评价二哪里氧化硅纳米粒子引入的粒径效应与浓度效应所带来的对斑马鱼受精卵发育以及神经行为的影响。在这两部分中牛血清白蛋白组分五(BSA-V),用来包被不同粒径(15nm与50nm)的二氧化硅从而得到不同直径并且表面带有不同电荷的纳米粒子蛋白晕复合物,同时牛血清白蛋白组分五也降低了纳米粒子在溶液中的聚沉。对于受精卵发育的影响,我们以出膜率,死亡率,畸形率以寻找更多及阿尔西兰染色呈现的软骨畸形为检测指标。动态光散射实验结果证实将纳米粒子包被有牛血清白蛋白组分五是一个控制纳米粒子粒径与电荷的有效方法。孵化率的结果显示其对二氧化硅纳米粒子复合物的浓度有着依赖效应。半数致死率(LC50)显示了从受精后54小时到受精后120小时死亡率的增加。斑马鱼受精后54小时是评价纳米粒子蛋白晕复合物的一个新颖且重要的时间点那个。结果显示不同粒径的纳米粒子被蛋白包被后形成蛋白晕复合物并有不同的表面电荷与毒性效应。研究结果显示对于发育毒性,50nm纳米粒子复合物比15mn的纳米粒子复合物毒性更大。同时软骨畸形更进一步表明了发育毒性的结果。此外,对于神经的影响我们主要以睡眠觉醒行为的改变为基础,定义了一系列神经行为学的参数来检测不同粒径(15nm与50nmm)与不同浓度(50-1000μg/mL)的二氧化硅纳米粒子蛋白晕复合物对斑马鱼神经行为的影响。

肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor, HGF）是一种多功能的蛋白。c-Met为HGF的受体，是一种原癌基因的蛋白产物。它是一种具有生长因子受体结构和功能性质的跨膜酪氨酸激酶。一旦结合至其配体，该受体发生自我磷酸化可刺激其内在的酪氨酸激酶活性，从而引起细胞的迁移、增殖和侵袭等行为的改变。已在多种人类的肿瘤中发现c-Met基Obeticholic Acid核磁共振因的过表达。HGF/c-Met通路已被证实影响着许多恶性肿瘤的发生和发展。在骨髓瘤病人的血清和骨髓中发现HGF浓度明显高于正常人，并且发现这跟病人的预后呈明显的负相关。之前有研究显示，c-Met及其配体HGF在多株骨髓瘤细胞系和原代骨髓瘤细胞中高表达。此外，有研究指出HGF可促进骨髓瘤细胞的增殖和迁移。 综上，我们推测阻断HGFCP-868596/c-Met信号通路也许对多发性骨髓瘤的治疗具有重要的意义。NK4是一种HGF的拮抗剂，由N末端的发夹结构和4个kringle结构域组成。NK4一旦结合至c-MET上，可竞争性拮抗HGF所诱导的c-MET酪氨酸磷酸化作用，从而抑制HGF所介导的细胞增殖、迁移和侵袭。此外，NK4还具有抑制成纤维细胞生长因子（BFGF）和血管内皮生BVD-523长因子（VEGF）所诱导的血管生成作用。NK4除了HGF拮抗活性外的抗血管生成活性可能与其结构类似血管抑制生长因子的4个kringle结构域有关。NK4这种具有抑制肿瘤细胞和肿瘤血管生成的多重功能，暗示了其在多发性骨髓瘤患者治疗的潜在价值。在本课题，我们初步探讨了Ad-NK4对多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226生物学行为的影响及可能的机制，旨在为NK4在多发性骨髓瘤治疗中的潜在临床应用提供理论基础和实验依据。

3 LBH589+Vx-680对Ba/F3-P210-T315I细胞的增殖抑制和促凋亡效应可能是通过抑制Aurora A激酶实现的。
目的通过检测胃癌组织、癌旁不典型增生组织和正常胃粘膜组织中Aurora-A、Aurora-B的表达情况,探讨它们在胃癌的发生、发展过程中是否具有协同作用,为筛选肿瘤标志和胃BMS-777607临床试验癌的分子治疗靶位提供理论基础。 方法采用免疫组化检测40例正常胃粘膜组织,25例癌旁不典型增生组织和40例胃癌组织中Aurora-A和Aurora-B的表达水平,及采用免疫印迹法检测22例胃癌及癌旁不典型增生组织中Aurora-A、Aurora-B蛋白的表达水平,分析两者在不同分化selleck怎么样程度的胃癌组织中表达的差异性及其相关性。 结果 1.免疫组化结果显示,40例正常粘膜中Aurora-A蛋白全部阴性表达(0/40)；25例非典型增生组织中蛋白阳性表达15例(15/25),阳性表达率60%；而在40例癌组织中阳性表达30例(30/40),阳性表达率75%,高于非典型Palbociclib分子量增生组织(P<0.05)；而非典型增生组织Aurora-A的阳性表达明显高于正常粘膜(P<0.01)。癌组织与正常组织间差异非常显著(P<0.01),与非典型增生组织间差异显著(P<0.05)；而非典型增生组织Aurora-A的阳性表达明显高于正常粘膜(P<0.01)。癌组织与正常组织间差异非常显著(P<0.01),与非典型增生组织间差异显著(P0.05)。

5、mi R-135b对宫颈癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移作用的分子机制研究(1)根据micro RNA作用靶点预测软件Target Scan,发现FOXO1的3’UTR有与mi R-135b潜在的结合位点,预测FOXO1可能为mi R-135b的作用靶基因;(2)转染anti-mi R-135b后,细胞内FOXO1的m www.selleckchem.cn/products/KU-55933.htmlRNA及蛋白表达均明显增多;(3)p Mir-FOXO1-3’UTRWT野生型组中,与转染anti-mi R-NC组相比,转染anti-mi R-135b组荧光素酶活性比率明显升高;而在p Mir-FOXO1-3’UTR MUT突变型组中,anti-mi R-NC组与anti-mi R-135selleckb组的荧光素酶活性比率无明显差异;(4)与对照组相比,实验组细胞增殖能力增强,p21、p27的m RNA及蛋白表达水平下调,而cyclin D1的m RNA及蛋白表达水平上调;实验组cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9的相对没有表达量较对照组均明显减少;实验组Bax蛋白的相对表达量较对照组明显减少,Bcl-2蛋白的相对表达量较对照组明显增多;实验组线粒体内细胞色素C的相对表达量较对照组明显增多,胞浆内细胞色素C的相对表达量较对照组明显减少;实验组MMP-2及MMP-9的相对表达量较对照组均明显增多。结论:本研究表明FOXO1为mi R-135b作用的靶基因,且其作用靶点位于FOXO1的3’UTR。

HDACIs结构中具有相同功能区域：金属结合区、连接区和表面识别区。通过对不同功能区域进行修饰获得更多的HDACIs衍生物,从而筛选出对肿瘤细胞具有特异性的抑制剂。本论文结合分子对接方法对一系列新型HDACIs进行设计与合成,并对HDACIs与酶的作用机制进行了初步的分析。 根据在美国上市用来治疗T-细胞淋巴瘤的HDACIs类抗癌药品SAHA的结构和作用机理,本SRT1720细胞系论文基于L-a-氨基辛二酸结构设计了金属结合区为异羟肟酸、短链脂肪酸和单酰胺的HDACIs系列,通过替换表面识别区域的疏水性基团,考察HDACIs的抑制活性与结构关系。本实验采用液相合成法合成了短链脂肪酸系列化合物3a-3h,异羟肟酸系列化合物5a-5c和单酰胺系列化合物6d-6fo高效液相色谱、质谱和核磁共振确定合成化合物的结构。 合http://www.selleckchem.cn/products/gsk1120212-jtp-74057.html成的14个目标化合物3a-3h,5a-5c和6d-6f对HDACl和HDACs的抑制活性结果显示,化合物5a-5c和6d-6f对酶的抑制水平均在纳摩尔级。MTT法检测目标化合物对人乳腺癌细胞(MCF-7)、人宫颈癌细胞(Hela)和人肝癌细胞(hepG2和SMMC-7721)的抗增殖活性,表明异羟肟酸系列化合物5a-5c对肿瘤细胞显示出此网站更好的抑制活性,而化合物5a-5c和6d-6f对肝癌细胞hepG2的抑制活性要好于SMMC-7721细胞。在100μM时,短链脂肪酸系列化合物对SMMC-7721细胞的抑制作用显著,与其它种类细胞相比大约提高了25%左右。 为了考察抑制剂与酶相互作用特点,我们选择HDAC2进行了分子对接。所有的化合物与HDAC2的作用方式相似,5个亚甲基的连接区很好的占据了酶的活性口袋通道,抑制剂与酶表面形成了很好的疏水作用和氢键。