将细胞同步化在有丝分裂期后,下调SLC39A6剪切变异体2表达后有丝分裂进程速度加快。采用X染色体免疫荧光原位杂交检测下调SLC39A6剪切变异体2引起染色体不稳定性变化增加,实时定量PCR和western检测SLC39A6剪切变异体2表达的变化具有周期性。 结论：SLC39A6参与Wortmannin半抑制浓度细胞有丝分裂检测点的调控并促进肿瘤基因组不稳定性的增加。 第二部分建立活体肿瘤细胞有丝分裂观测平台中文摘要 目的：肿瘤细胞染色体分裂异常是导致肿瘤基因组不稳定的根本原因,这种不稳定性促进了肿瘤的进展和恶化。本文旨在探讨H2B-RFP融合蛋白能够更好的观测活体没有肿瘤细胞有丝分裂过程。 方法：将携带H2B-RFP融合基因的质粒瞬时转染人宫颈癌细胞系Hela并利用抗性药物筛选得到阳性细胞克隆,利用激光共聚焦显微镜活体培养系统记录稳定筛选Hela细胞的细胞周期。 结果：得到稳定表达H2B- RFP的Hela细胞且其与亲本NU7441浓度Hela细胞相比对细胞周期的运行没有影响,并且可以展示Hela细胞有丝分裂的进程。 结论：H2B-RFP融合蛋白可以非常敏感的显示肿瘤细胞的染色体并跟踪活体状态下肿瘤细胞有丝分裂过程。 第三部分乳腺癌相关成纤维细胞分离培养及鉴定 目的：分离培养和鉴定乳腺癌相关成纤维细胞及其与之配对的正常乳腺成纤维细胞,并初步探讨两者生物学性状的差异。