347%、0.784%、42.973%、73.448%及58.591%。3.rt-pcr扩增结果:shh、ptch1、smo、gli1mrna在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达明显增多(p0.05)。临床病理特征的关系:中低分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1mrna平均表达水平均高于高分化胰腺癌组织平均表达水平,差异具有统计学意义(p<0.05)。westernblot实验结果:分别检测shh、ptch1、smo、gli1蛋白在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达均明显增多(p0.05)。临床病理特征的关系:中低分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1蛋白平均表达水平均高于高分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1蛋白平均表达水平,差异具有统计学意义(p<0.05);中低分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1蛋白平均表达水平均高于高分化胰腺癌组织ptch1蛋白平均表达水平,差异具有统计学意义(p0.05)。预后因素的分析:单因素分析:22纳入个因素中,性别、分期、淋巴结转移、术后化疗、术后胰瘘发生及smo基因的高表达6个为显著性因素(p<0.05),将上述6个因素代入cox回归方程,结果示:分期、术后化疗和术后胰瘘的发生为影响术后患者预后的独立因素(p<0.05),其中分期、术后胰瘘的标准回归系数为正值,表明其与患者术后死亡呈正相关,而术后化疗为负值,说明其为胰腺癌患者术后预后的保护因素。结论:1.胰腺癌中的确存在sp细胞,其表型为cd133十和cd44+cd24-esa+,具有肿瘤干细胞的生物学特性。2.针对hh信号通路关键基因smo设计了3条sirna片段,成功构建了携带这3条片段的慢病毒表达载体,通过转染sw1990细胞后对smo表达的抑制率筛选出最为适于后续研究的smosirna慢病毒表达载体,这不仅为本研究后续研究的顺利开展奠定了良好的实验基础,也为针对hh信号通路靶向干扰的基因治疗研究提供了一定实验证据。3.shh、ptch1、smo、gli1mrna在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达明显增多,而且在低分化胰腺癌组织平均表达水平高于高分化胰腺癌组织平均表达水平;与患者年龄、肿瘤直径、tnm分期、侵犯血管和神经、淋巴结转移无关。shh、ptch1、smo、gli1蛋白在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达明显增多,以上四个蛋白在低分化胰腺癌组织中平均表达水平高于高分化胰腺癌组织平均表达水平;胰腺癌组织中蛋白表达与胰腺癌的分化程度显著有关,与患者年龄、肿瘤直径、tnm分期、侵犯血管和神经、淋巴结转移无关。影响胰腺癌预后的因素中分期、术后胰瘘与患者术后死亡呈正相关,而术后化疗为胰腺癌患者术后预后的保护因素。
目的：对伊马替尼（格列卫）治疗慢性粒细胞白血病的疗效及生存分析。方法：66例CML患者口服伊马替尼治疗后，定期检测血常规、染色体核型、bcr-abl融合基因，评估其疗效、总生存（OS）率和疾病无进展（PFS）情况。结果：中位伊马替尼治疗时间为26.5（6-112）个月。1.慢性期患者累积所获得的完全血液学缓解率（CHR）、主要细胞遗传学缓解率（MCyR）、完全细胞遗传学缓解率（CCyR）和主要分子学缓解率（MM0R）分别是94.5%、87.3%、78.2%和69.1%。与加速期及急变期患者评估结果比较，差异有统计（P＜0.05）。慢性期患者中，低危组与高危组之间累积达到的MM0R差异存在统计学意义（P=0.047）。2.慢性期的患者1年、2年和4年总的OS率分别是（97.7±1.1）%、（96.2±3.8）%、（90.1±6.8）%，疾病无进展（PFS）率分别是（95.3±3.3）%、（83.0±6.5）%、（76.6±8.6）%。加速期和急变期患者在6个月、1年、15个月的OS率为（91.7±8）%、（75±2.5）%、（66.7±3.6）%。1年和2年的PFS率是（75.0±15.3）%、（60±18.2）%。慢性期的患者达CCyR、MM0R较之加速期和急变期患者之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：伊马替尼（格列卫）治疗慢性粒细胞白血病慢性期患者可获得较高的遗传学缓解和分子学缓解，明显延长生存时间，但是对加速期和急变期疗效则不理想，伊马替尼耐药仍是现在临床治疗中面临的主要问题。
有关宫颈癌是否存在Hedgehog信号通路及EMT(epithelial

通常 Alisertib 价格 mesenchymal transition上皮间质转化)相关因子的异常表达以及对宫颈癌的发生,侵润及转移的影响,目前相关报道甚少。本研究通过以不同浓度非甾体生物碱cyclopaine阻断Hedgehog言号通路,观察宫颈癌Hela细胞中Hedgehog信号通路关键因子Gli-1和EMT相关因子Slug表达受抑制后,宫颈癌细胞生物学行为的改变,探索其作为宫颈癌Hedgehog-EMT信号通路治疗新靶点的可能性。

目的： 宫颈癌Hela细胞中观察Hedgehog信号传导通路关键因子Gli-1及EMT相关因子Slug的表达,探索Hedgehog信号传导通路和EMT相关因子对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响。 http://www.selleckchem.cn/products/BEZ235.html 方法： 1. MTT法和软琼脂克隆形成实验,检测宫颈癌Hela细胞的细胞体外增殖能力和细胞集落形成能力。 2. RT-PCR的方法检测宫颈癌Hela细胞中Gli-1和Slug基因mRNA的表达。3. Western-Blot方法检测宫颈癌Hela细胞Gli-1和Slug蛋白的表达。 结果： 1.MTT和软琼脂克隆形成实验结果显示,随着Hedgehog信号传导通路抑制剂cyclopamine药物浓度的增加,细胞增殖率及细胞集落的形成能力下降,具有显著差异(p
目的结合上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)与肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)学说,初步研究EMT是否能使涎腺腺样囊性癌细胞的干细胞相关标记的表达产生变化,并讨论其意义。 方法(1) TGF-β1诱导培养ACC-M细胞发生EMT的形态学动态观察：体外培养涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株ACC-M,经TGF-β1诱导后连续观察其细胞形态的变化；(2)TGF-β1诱导培养后ACC-M细胞EMT及CSCs相关标记物表达的变化：实验分两组,实验组ACC-M细胞培养时加入TGF-β1使其浓度达到10g/ml,对照组加入等量PBS液；流式细胞术检测培养0h、24h、48h后ACC-M细胞的EMT相关标记物E-cad、N-cad、vimentin,以及肿瘤干细胞相关标记物0ct-4的表达情况；实验结果经SPSS11.0软件统计,采用重复测量数据方差分析中的广义线性模型(General Linear Model,GLM)进行数据分析。 结果 1.

2±48.9、936.6±93.7、727.0±75.9、747.3±63.1、957.3±55.3,心肌细胞凋亡率(%)分别为25.5±3.2、71.8±5.5、42.8±6.1、54.1±4.1、82.8±9.7,与H/R组比较,HPC组、TGF-β1-Pre组的LDH活性、心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.05),HIF-1α蛋白表达水平升高(P0.05)。结论:不论在常氧条件还是在缺氧环境下,TGF-β1均可以增加HIF-1α的蛋白表达水平,并且在缺氧复氧诱导所致的心肌细胞损伤中发挥抗凋亡作用,这种作用与调控HIF-1α的蛋白水平有关。
直接重编程是指将一种终末分化的细胞直接转变成另一种终末分化的细胞,这一技术的产生为细胞移植在临床中的应用提供了新的细胞来源。在成神经细胞分化的研究中主要依靠病毒载体,而病毒载体本身具有潜在的安全隐患,使该技术的应用受到限制,纳米粒具有安全、高效等优点,已经受到越来越多的关注。本文重点围绕神经细胞的直接重编程展开研究,通过制备乙二胺修饰的阳离子化紫菜多糖,并将其作为基因载体携神经相关转录因子,将小鼠成纤维细胞直接重编程为神经细胞,主要分为四个部分:第一章综述本章对基因治疗中载体的发展进行了简要综述,比较了不同载体的优缺点,对各载体的应用作了简单介绍;并对可用于治疗神经系统疾病的细胞来源,不同来源细胞的优缺点以及细胞来源途径的发展趋势及面临的问题进行了简要叙述,为本学位论文设计思想的提出及后续实验工作的开展奠定基础。第二章阳离子化紫菜多糖的制备及表征本项目研究以紫菜多糖为对象,采用高碘酸钾氧化法对紫菜多糖进行氧化,再利用乙二胺及精胺两种阳离子化试剂分别对氧化后的紫菜多糖进行阳离子化,得到乙二胺阳离子化紫菜多糖(Ed-PYP)和精胺阳离子化紫菜多糖(Sm-PYP),采用傅里叶变换红外光谱分析仪对两种阳离子化的多糖进行结构检测,采用Zeta电位粒径仪对其进行表征,为进一步研究阳离子化紫菜多糖在基因载体中的应用打下基础。第三章乙二胺阳离子化的紫菜多糖作为基因载体的初步探究以阳离子化多糖为载体,成纤维细胞为种子细胞,通过琼脂糖凝胶电泳对Ed-PYP/pDNA复合物表征,采用MTT实验对其进行毒性检测,实验结果初步表明其具有载基因能力。通过绿色荧光蛋白(EGFP)及ELISA分别从可视化角度及蛋白水平来评价Ed-PYP/pDNA复合物的体外转染效率,结果表明在Ed-PYP/pDNA质量比为40:1,其体外转染效率为最佳且优于PEI及Lip2000。通过质粒DNA的荧光标记物YOYO-1以及多种特异性抑制剂考察Ed-PYP/pDNA纳米粒(40:1)的穿膜机制及胞内转运机理。结果表明,Ed-PYP/pDNA复合物是通过网格蛋白以及小窝蛋白介导的內吞途径进入胞内,而其在胞内的转运过程是由内涵体-溶酶体系统、细胞骨架结构、中间纤维结构以及动力蛋白多系统参与的。第四章成纤维诱导分化为神经的研究根据前文研究结果,将Ed-PYP与神经相关转录因子的复合物按最佳比例(40:1)混合制成纳米粒(Ed-PYP/pABF、Ed-PYP/pABT)用于转染成纤维细胞,拟对其进行成神经诱导分化,经琼脂糖凝胶电泳、TEM、Zeta电位粒径仪等手段对其进行表征,结果与预实验吻合。通过细胞形态观察及ELISA检测表明诱导第14天时效果最佳。通过免疫荧光以及蛋白免疫印迹进一步鉴定诱导后的成纤维细胞,结果表明,阳离子化紫菜多糖携神经相关转录基因可将成纤维细胞直接重编程为神经细胞。本研究为细胞移植治疗神经系统相关疾病提供了丰富的细胞来源。
Sall4(Spalt-like

AZD6244核磁共振 selleck激酶抑制剂 transcription factor 4)是一种C2H2型锌指蛋白转录因子,其对干细胞系的建立和多能性维持有重要作用。Sall4可以在组织中广泛表达,它有多个可变剪切体,在人和小鼠上有SALL4A和SALL4B两个剪切体(Ma

et al.,2006;Rao et al.,2010),SALL4B与SALL4A相比缺失了第二外显子的大部分区域,其功能对多能性的维持起着非常重要的作用。Otx2(Orthodenticle BYL719临床试验 homeobox 2)属于Otx转录因子超家族成员(Finkelstein et al.,1990;Simeone et al.,1992;Simeone et al.,1993),该家族成员在感光细胞和延髓脑区的早期发育中起到了重要作用(Matsui et al.,1989;Gronwald et al.,1988)。有文献报道,Otx2蛋白参与调控小鼠初始态多能干细胞与激发态多能干细胞之间的转变过程,该调控对平衡小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)的自我更新和多向分化潜能起着至关重要的作用(Dario et al.,2012)。我们的研究旨在克隆猪SALL4基因的两种剪切体SALL4A和SALL4B,研究SALL4不同剪切体对OTX2基因的调控关系。本研究证明了猪SALL4不同剪切体的存在,还证明了SALL4对OTX2基因的直接调控的关系,丰富了猪多能干细胞调控网络信息,为研究猪干细胞多能性和重编程调控机制奠定基础。本研究主要获得的结果如下:1.

3%）患者携带EGFR突变；女性EGFR突变高于男性，不吸烟患者高于吸烟患者；三种主要腺癌亚型中，乳头状为主型EGFR突变率高于腺泡样为主型和实体型为主腺癌；EGFR状态与化疗疗效无关，EGFR突变是EGFR

TKI（sTyrosine kinase inhibitors）疗效的预测因子；多因素分析显示EGFR突变是预后独立因素，EGFR突变患者预后优于野生型患者。 第二部分：检测430例肺腺癌患者的ALK重排状态，分析ALK重排与临床病理特征、治疗疗效及预后的关系，并评价FISH、Ventana IHC及RT-PCR三种方法检测ALK重排的作用。430例患者中，ALK阳性率为10.7%，年轻患者中多见，实体型为主腺癌和腺泡样为主型多见，EGFR野生型患者中多见。ALK重排与性别、吸烟状态、分期无关。ALK阳性患者对EGFR 没有 TKIs无效，ALK状态与化疗疗效及预后无关。采用FISH和Ventana IHC检测430例患者ALK状态，采用FISH、Ventana IHC和RT-PCR检测200例患者，Ventana IHC和FISH一致性好，敏感性和特异性分别为100%、98.2%，与FISH一致性为98.4%。RT-PCR的敏感性和特异性分别为95.7%、87.0%，与FISH的一致性为89.0%。三种方法检测结果显示RT-PCR敏感性更高。 第三部分：检测332例肺腺癌患者的KRAS状态，分析KRAS基因状态与临床病理特征、治疗疗效及预后的关系。332例患者中，24例（7.2%）携带KRAS突变，吸烟患者KRAS突变率高于不吸烟患者。KRAS不能作为判断TKI疗效、化疗疗效及预后的预测因子。332例肺腺癌患者EGFR、ALK、KRAS的频率分别为44.9%、9.6%、7.2%，肺腺癌患者三种基因的异常共计60.5%。 本文研究结果表明EGFR是肺腺癌患者最重要的驱动基因，EML4-ALK是仅次于EGFR的第二个重要的驱动基因，KRAS在肺腺癌患者中的意义和价值较小，还有待于对其通路及靶向药物作更加深入的研究。肺腺癌患者应首先进行EGFR检测，EGFR野生型患者检测ALK重排，如有条件可同时检测EGFR突变和ALK重排，KRAS突变检测的价值较小。EGFR突变患者应首选EGFR 那个 TKIs治疗。 本文研究发现检测ALK重排的三种方法中，Ventana IHC与FISH一致性高，RT-PCR敏感性更高，能够鉴别不同的变异体或融合伴侣。鉴于Ventana IHC与RT-PCR指导选择克唑替尼治疗的价值仍缺乏循证医学证据支持，还需前瞻性临床试验验证或更多的临床数据的积累。因此，在当前情况下，如有条件，最好采用三种方法或至少两种以上方法进行检测ALK重排。
目的：通过体外细胞实验研究microRNA-21和ERK1/2MAPK信号传导通路在食管鳞状细胞癌中的作用及作用机制；通过体内实验研究miR-21和ERK1/2在80例食管鳞状细胞癌患者肿瘤组织及相对应的癌旁正常组织中的表达,分析二者之间的关系并探讨miR-21和ERK1/2与食管鳞状细胞癌患者临床病理学资料的关系及临床意义。方法：Lipofectamine2000转染miR-21mimics、inhibitor、随机序列、miR-21过表达质粒；U0126处理Eca109细胞,抑制ERK1/2MAPK信号传导通路活化；细胞计数和MTT检测细胞增殖；细胞划痕实验检测细胞迁移；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡；qRT-PCR检测miR-21和ERK1/2mRNA;

Western-blot免疫印迹法检测总ERK1/2和磷酸化ERK1/2；原位杂交技术检测和免疫组化方法分别检测80例食管鳞状细胞癌及癌旁正常组织中miR-21和ERK1/2的表达。结果：1)检测食管鳞状细胞癌细胞系EC9706. Eca109和KYSE510中miR-21的表达,miR-21中量表达的Ecal09选为研究细胞。将携带绿色荧光素标记的miR-21-I, miR-21-M,随机序列转染至Eca109细胞中,转染效率可达90%以上,miR-21-Ⅰ组中miR-21表达下调至0.15倍(P0.05)、19.69%(48h, P0.05)、9.6%(48h, P0.05)、43.32%(48h, P0.05)、14.93%(48h, P<0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,miR-21-M组减少了82.61%(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞周期,miR-21-Ⅰ组G1期增长了6.98%(P<0.05),S期缩短了33.33%(P<0.05),G2期缩短了16.04%(P<0.05),而miR-21-M组G1期缩短了30.26%(P<0.05),S期显著增长了136.60%(P<0.05),G2期增长了75.93%(P0.05)、23.17%(48h, 而且 P>0.05)、43.08%(72h, P<0.05);与U0126组相比,U0126+miR-21组细胞增殖能力显著增高：与miR-21组相比,U0126+miR-21组细胞增殖能力显著被抑制。平板克隆实验发现U0126组细胞克隆形成时间变晚,直径变小,形成数目减少了15.783%(P<0.05)；与U0126组相比,U0126+miR-21组细胞克隆形成数目增加了14.96%(P<0.05)；与miR-21组相比,U0126+miR-21组细胞克隆形成数目降低了12.11%(P<0.05),59.50%(48h,P<0.05);与U0126组相比,U0126+miR-21组显著提高；与miR-21组相比,U0126+miR-21组显著降低。流式细胞仪检测细胞凋亡,U0126组增加了357.24%(P<0.05),miR-21组减少了78.61%(P<0.05)；与U0126组相比,U0126+miR-21组细胞凋亡减少了76.14%(P<0.05)；与miR-21组相比,U0126+miR-21组细胞凋亡增加了410.13%(P<0.05)；流式细胞仪检测细胞周期,U0126组G1期增加了6.42%(P<0.05),G2期减少了18.45%(P<0.05),S期减少了26.15%(P<0.05)；与U0126组相比,U0126+miR-21组细胞周期中G1期减少了6.36%(P<0.

2±0.6)%和(23.9±0.5)%,套锁纤维舒张百分率高于钩状纤维(t=6.05, P=0.026);(2)促胰液素抗血清可分别阻断促胰液素对套锁纤维和钩状纤维舒张效应,细胞舒张百分数分别为(7.5±0.9)% (t=40.2, P=0.001)和(11.2±1.0)%(t=21.6, P=0.002),两者比较差异有显著性(t=6.39, P=0.024);腺苷酸环化酶激动剂Forskolin分别增强促胰液素对套锁纤维和钩状纤维舒张效应,细胞舒张百分数分别为(40.0±2.3)%(t=4.8, P=0.041)和(30.7±1.8)%(t=4.7, P=0.040);cAMP抑制剂分别阻断促胰液素对套锁纤维和钩状纤维舒张效应,细胞舒张百分数分别为(17.2±1.8)%(t=5.14,

P=0.036)和(14.7±4.3)%(t=4.76, P=0.041);(3)促胰液素使套索纤维与钩状纤维[35S]GTPγS结合率明显升高(52.8±19.5)%(t=3.33, P=0.029)和(44.9±20.9)%(t=3.23, P=0.032),两者比较无明显差异(t=0.83, P=0.455);(4) Gαs抗体可明显抑制促胰液素对套锁纤维和钩状纤维的舒张效应,细胞舒张百分数分别为(9.9±2.33)%(t=7.78, P=0.016)和(8.7±1.9)%(t=4.38, P=0.048);Gαi3和Gαq/11抗体对促胰液素引起套锁纤维舒张效应无明显影响,细胞舒张百分数分别(27.7±4.5)%(t=0.36, P=0.753)和(28.2±2.0)%(t=0.65,

P=0.582);对钩状纤维亦无明显影响,细胞舒张百分数分别为(22.6±1.2)%(t=0.718, P=0.547)和(21.5±4.6)%(t=0.758, P=0.528)。表明与促胰液素耦联的G蛋白类型是Gαs蛋白。 结论:促胰液素受体在人LES套锁纤维和钩状纤维均有表达;促胰液素引起套锁纤维和钩状纤维舒张的规律明显不同,套锁纤维舒张反应强于钩状纤维。部分说明介导促胰液素引起套锁纤维和钩状纤维舒张的信号转导通路为: 那个 因为 Gαs蛋白耦联于腺苷酸环化酶,催化三磷酸腺苷生成环一磷酸腺苷,后者参与平滑肌细胞的舒张。
钩端螺旋体(简称钩体)病是由致病性问号钩体(Leptospira interrogans)感染引起的全球性人兽共患病,也是洪涝、地震等自然灾害中重点的防疫和监控的传染病之一。问号钩体可直接经人或动物皮肤或黏膜迅速侵入宿主体内,随着血流播散至各脏器进行繁殖并导致病变,以黄疸、出血、肾衰竭为其典型的临床症状。迄今为止,尚未发现问号钩体能产生外毒素,已报道的一些细胞毒性因子和弱毒性的内毒素样物质难以解释问号钩体感染所致的病理改变,故其致病机制至今不明。 细胞凋亡是一种主动的、高度有序的死亡过程,涉及一系列基因和蛋白质的参与,其中caspase家族蛋白、MAPK家族蛋白等在凋亡的信号传导中扮演着极其重要的角色。业已发现,许多病原微生物能够诱导宿主细胞凋亡,并以此影响疾病的发生发展进程。有研究表明问号钩体可诱导体外培养的单核-巨噬样细胞凋亡,在豚鼠体内可引起肝细胞凋亡,但其诱导凋亡机制尚不明了。由于诱导宿主细胞凋亡不仅可能与问号钩体毒力有关,还可能涉及问号钩体免疫逃避及宿主体内生存,故深入了解问号钩体诱导细胞凋亡机制对于阐明其致病性有重要意义。 研究目的:探讨问号钩体感染对不同类型宿主细胞的影响及其诱导宿主细胞凋亡的信号传导机制,以期为钩端螺旋体病致病机制的阐明提供实验依据。 研究方法:采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法,检测钩端螺旋体对不同细胞的毒性作用;采用流式细胞术(Annexin V/PI双染法)定量检测问号钩体感染对不同细胞凋亡和坏死的诱导作用;透射电子显微镜观察问号钩体诱导J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的形态学变化;采用caspase荧光底物和荧光分光光度计检测问号钩体感染的J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞中caspase的活性变化;western blot法检测问号钩体感染对J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞中PARP、Lamin

Natural产品 Library A/C的裂解及FADD表达的影响;酶联免疫法(ELISA)检测问号钩体感染的J774A.1细胞中JNK和p38MAPK的磷酸化激活情况;应用caspase广谱或特异性抑制剂结合流式细胞术、荧光分光光度计、western blot法,检测这些抑制剂对问号钩体诱导的细胞凋亡和caspase信号传导系统的抑制作用;应用JNK和p38MAPK特异性抑制剂结合流式细胞术、荧光分光光度计、western blot法,检测JNK和p38MAPK在问号钩体诱导J774A.1细胞凋亡中的作用。 结果:(1)问号钩体感染抑制J774A.1、A549和小鼠腹腔巨噬细胞的细胞活性,具有浓度和时间依赖性。问号钩体感染对人脐静脉内皮细胞(EVC304和EVC-EC-C)没有细胞毒性作用。(2)问号钩体诱导J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞凋亡,具有浓度和时间依赖性。与J774A.1细胞相比,小鼠腹腔巨噬细胞对问号钩体的凋亡诱导作用更加敏感。问号钩体以时间依赖方式诱导A549细胞发生坏死,而对人脐静脉内皮细胞(EVC304和EVC-EC-C)无细胞凋亡或坏死诱导作用。(3)Caspase家族抑制剂(Z-VAD-fmk)以剂量依赖方式抑制问号钩体诱导的J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞凋亡。(4)问号钩体诱导J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞内caspase-3、-6、-8、-9的活化、caspase-3、-6底物PARP、Lamin A/C的裂解及FADD蛋白表达上调,并呈时间依赖性效应。(5)Caspase-8抑制剂可以抑制效应caspase-3、-6的活化及其底物的裂解,并进而抑制细胞凋亡,caspase-9抑制剂则对效应caspase-3、-6的活化、caspase-3、-6底物的裂解及细胞凋亡均无抑制作用,说明caspase-8作为启始caspase介导了问号钩体诱导的J774A.1和小鼠腹腔巨噬细胞凋亡,caspase-9可能通过caspase-3的反馈机制而激活,线粒体细胞色素c-caspase-9途径不参与问号钩体诱导的J774A.

05),而其磷酸化p-p38MAPK却发生了明显变化。正常对照组和PBS注射侧几乎无p-p38的表达,LPS注射后30min,p-p38即有少量的表达;1h表达量增加;6h表达量达高峰;12h后表达量逐渐下降。与PBS对照侧相比,LPS注入黑质导致TH阳性细胞数下降至38%;SB203580预处理可以显著增加TH+细胞数达63%(P<0.05)。结论:p38MAPK信号通路参与了LPS诱导小胶质细胞激活介导DA能神经元变性,可通过阻断信号通路来减轻LPS诱导DA能神经元变性,为PD治疗提供新的思路。
目的研究妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中p-p38MAPK及TN7-α的表达情况。方法常规HE染色观察胎盘形态学变化:采用SP法对56例妊娠期高血压疾病患者和30例正常孕妇的胎盘组织进行免疫组化染色,观察各组p-p38MAPK和TNF-α的定位、分布和表达量的差异以及两者的相关性。结果妊娠期高血压疾病组胎盘组织时可细胞滋养细胞增生,合体细胞结节、纤维素样坏死显著增多等病理变化。各组均可见p-p38MAPK和TNF-α的表达,但妊娠期高血压疾病组表达量较正常孕妇组显著升高(P<0.01)。结论p-p38MAPK和TNF-α可能通过某些直接或间接途径,相互作用,参与妊娠期高血压疾病的发生发展。对p-p38MAPK和TNF-α的研究,有可能找到治疗妊娠期高血压疾病的新方法。
心肌成纤维细胞是心肌合成胶原的主要场所。应激与机械牵张使心肌细胞表达细胞因子。促炎性细胞通过心肌成纤维细胞与心肌细胞的旁分泌作用产生细胞因子,并引起神经-体液变化,通过不同的信号转导通路激活相应基因表达改变引起心肌成纤维细胞的增殖、胶原合成和心肌细胞外基质蛋白的表达,从而参与心肌重构过程。而多种细胞因子均能激活基质金属蛋白酶(MMPs),并通过金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)共同调控MMPs。心肌重构就是两者之间动态平衡被打破而出现的病理过程。

本文的目的是要有选择性地综述食品和肠粘膜、Toll样受体、细胞因子网络和免疫系统的相互作用。越来越多的研究结果显示,少量的食物蛋白、多肽、脂肪、低聚糖和其他生化物质可以诱导或抑制两种-发炎细胞因子和抗炎细胞因子两者之一,从而进一步地控制先天或后天获得性免疫系统、神经生理和代谢网络。而且越来越充分的证据表明,发炎和抗炎细胞因子之间的平衡和联系与中医中药中所说的“阴”“阳”之间的协调与平衡十分相似。中国人一直用“阴”“阳”来分类食品和药品,而且他们坚信一个人可以通过保持他们的食品和中草药的食入和“阴”“阳”平衡来改善其健康状况,治病防病。所以,本文在这些广泛的实验依据的基础上提出了一个理论模型,用来解释食品是如何通过对细胞因子网络的作用来调控免疫网络,并进而影响人体健康的。
阿尔茨海默病(AD)是一类神经退行性疾病,tau蛋白过度磷酸化形成的神经原纤维缠结为其主要病理特征之一,是AD发病的重要因素。促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)是一类脯氨酸依赖的蛋白激酶,在AD病人体内参与诱导tau蛋白的过度磷酸化。MAPK的三条途径ERK、JNK、p38都参与诱导tau蛋白过度磷酸化,且与Aβ、氧化应激、炎性因子及蛋白磷酸酯酶等因素相关,由此阐述MAPK在AD进程中的重要作用,并提示MAPK可成为AD治疗中的新靶点。
核转录因子NF-κB是一种多功能转录因子家族,它广泛存在于人体组织和细胞中,参与到机体炎症反应、免疫反应、氧化反应、细胞凋亡等细胞的生理、病理过程中。本文从小梁网、视网膜神经节细胞和视乳头损害3方面着手,对近年来核转录因子NF-κB与青光眼关系的研究进展作一综述。

有丝分裂原蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一。P38MAPK属于MAPK的一个亚族,是广泛存在于细胞浆内的含有丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白质激酶。它在糖尿病肾病(DN)的形成中起着非常重要的作用,糖尿病状态下多种因素的作用激活P38MAPK,促进肾脏细胞肥大,ECM积聚,导致肾小球硬化和肾小管间质纤维化。故深入研究P38MAPK在DN发病中的作用,有助于阐述DN的发病机理,为开发防治DN的新药提供科研依据。

热休克蛋白(heatshockproteins,HSPs)是一类进化上高度保守,广泛存在于自然界原核、真核细胞中的蛋白质。HSPs在正常细胞中呈基础性表达,维持细胞的基本形态和功能;它在应激环境下的细胞中,可参与细胞的损伤和修复,发挥应激保护作用。新近的研究发现,HSPs在细胞凋亡中发挥重要作用。
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点击此处 所以 ist蛋白是属于碱性的螺旋-环-螺旋蛋白家族中的高度保守的转录因子,在胚胎的发生发展中发挥重要作用。Tw BAY 73-4506化学结构 ist被认为是癌基因蛋白,影响肿瘤细胞的凋亡。Tw ist作为上皮-间质转变(ep ithelial-m esenchym altransition,EMT)过程中的关键调控因子,对肿瘤的侵袭和转移有重要影响。
目的探讨香烟烟雾浓缩物(CSC)对人类支气管上皮细胞系(16-HBE)表达4-羟基壬烯醛(4-HNE)的影响以及银杏内酯 B 的干预作用;并观察4-HNE 对中性粒细胞的趋化作用。方法采用免疫细胞化学和 Western blot 方法。(1)不同浓度(1、10μg/ml CSC)CSC 刺激16-HBE 细胞4h后4-HNE 加成蛋白的表达水平,设正常对照组(无血清培养基代替 CSC);(2)10μg/ml CSC 刺激不同时间(1、4、8、12、24、30h)后,16-HBE 中4-HNE 加成蛋白的水平,设正常对照组(无血清培养基代替 CSC);(3)用100μmol/L 银杏内酯 B 孵育16-HBE 后,CSC 刺激1、4、8、12h,检测4-HNE 加成蛋白表达的变化,设正常对照组(无银杏内酯 B 孵育);(4)以趋化实验检测0.1、1、10μmol/L 4-HNE 对兔中性粒细胞的趋化作用。结果(1)1、10μg/ml CSC 刺激4h 后,16-HBE 细胞表达4-HNE 加成蛋白水平(免疫化学为2.12±0.38、2.69±0.42,Western blot 为100.2±6.3、72.3±6.1)均较正常对照组显著增加(免疫化学为1.25±0.37,Western blot 为122.4±4.