研究结果1.成功构建了 GBP1基因稳定敲除的DU145、PC3、SKOV3和OVCAR3细胞系模型,命名为 DU145 GBP1 KO、PC3 GBP1 KO、SKOV3 GBP1 KO 和OVCAR3 GBP1 KO细胞;2.GBP1基因敲除细胞和亲本细胞相比,呈现出增殖能力减低,细胞周期抑制,迁移能力下降,细胞药寻找更多物敏感性提高,细胞能量代谢处于氧化磷酸化和糖酵解均受抑制的状态。第二部分GBP1对前列腺癌和卵巢癌细胞体内成瘤能力影响的相关研究研究方法1.裸鼠成瘤实验检测GBP1基因敲除后肿瘤细胞体内成瘤能力的变化。2.苏木素-伊红(HE)染色观察裸鼠肿瘤的组织形态学变化。3.免疫组织化学(IHC)染色检测Elacridar分子量裸鼠肿瘤组织中GBP1蛋白的表达情况。研究结果1.裸鼠荷瘤后,DU145 GBP1 KO、PC3 GBP1 KO、SKOV3 GBP1 KO 和 OVCAR3 GBP1 KO组细胞在体内成瘤生长速度相较于对照组细胞更为缓慢,成瘤体积较小,SKOV3 GBP1 KO和OVCAR3 GBP1 KO通常组细胞的裸鼠成瘤率也较低。2.HE 染色发现 DU145 GBP1 KO、PC3 GBP1 KO、SKOV3 GBP1 KO 和 OVCAR3 GBP1 KO组肿瘤组织细胞异型性及核分裂相减少。3.IHC染色观察到裸鼠肿瘤组织中DU145 GBP1 KO、PC3 GBP1 KO、SKOV3 GBP1 KO和OVCAR3 GBP1 KO组的GBP1表达水平明显低于对照组。

多因素分析结果显示IPI评分>2(P<0.001)、Hp感染(P=0.026)是PFS的独立预后不良因素。结论GML发病人群以中老年为主,40~60岁为其最好发年龄段。起病隐匿,在临床症状和内镜表现方面没有特异性。该疾病在治疗后缓解率高,早期通过根除幽门螺杆菌可以实现完全缓解,IPI评分>2、Hp感染是PFS的独立预后不良因素。
目的探讨自身免疫性溶血性贫血(AuCB-839细胞系toimmune hemolytic anemia,AIHA)相关性淋巴瘤的临床特点。方法收集自2009年1月1日至2018年12月31日于广西医科大学第一附属医院诊治的AIHA和淋巴瘤患者,甄别出AIHA相关性淋巴瘤患者20例,回顾性分析其临床资料。结果(1)本组共收集到非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)2Selleck204例,AIHA相关性NHL(AIHA/NHL)20例,AIHA/NHL占同期NHL的0.91%。(2)AIHA/NHL患者在各NHL亚型中的发病率从高至低分别为血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)7.32%、边缘区B细胞淋巴瘤(marginal zone B-cell购买Tozasertib lymphoma,MZBL)6.25%、B细胞性淋巴瘤(未能进一步分类)(B-Cell lymphoma,unclassified,BCL-U)4.26%、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤(chronic lymphoblastic leukemia/small lymphoblastic lymphoma,CLL/SLL)2.50%、套细胞淋巴瘤(Mantle cell lymphoma,MCL)2.30%。

4 western blotting实验结果提示HCT116细胞、HCT116/L-OHP细胞、经过全反式维甲酸作用后的耐药细胞三组中LC-3、Beclin1、Bcl-2蛋白的表达量下调(P<0.05),Bax、P62蛋白的表达量上调(P<0.05)。结论 1全反式维Erastin甲酸能够抑制HCT116/L-OHP细胞活力,且抑制作用呈剂量依赖性;2全反式维甲酸能够逆转HCT116/L-OHP细胞的耐药性,通过下调它的自噬性,诱导其凋亡;3综上可知调控耐奥沙利铂的人类结肠癌HCT116/L-OHP细胞的自噬性,可作为CB-5083体外增强癌细胞对化疗药敏感的新方法。图8幅;表4个;参163篇。
一、目的结肠癌是全球最常见的消化道肿瘤之一,发病率和死亡率均居高不下,严重影响人们的健康和生活。近年来,长链非编码RNAs(lncRNAs)在肿瘤的进展中引起了越来越多的关注可能。浆细胞瘤可变异位基因1(PVT1)是一个已知的长链非编码RNA,其在多种肿瘤中发挥类似癌基因的作用。有研究表明PVT1在结肠癌组织及细胞系中高表达,但是PVT1在其中的作用机制尚不十分明确。本研究拟探寻PVT1对miR-30d-5p的调控机制,及其在结肠癌发生发展的作用,为寻找新的结肠癌标记物和治疗靶点提供理论依据。

自噬抑制剂干预组大鼠预先腹腔注射3-甲基腺嘌呤(3-MA,20 mg/kg);抑制剂干预1 h后,AAⅠ干预组腹腔注射给予相应剂量的AAⅠ。药物干预连续9 d。末次给药后,取血、分离肝脏。生化分化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,JNK-IN-8DMSO溶解度并计算比值;光镜和透射电镜下观察肝组织形态学变化。PCR检测肝组织Beclin 1、LC3、p53的mRNA表达水平;免疫组化检测Beclin 1、LC3、p53的蛋白表达水平。结果(1)与正常组相比,AAⅠ低剂量组大鼠血清AST水平显著升高很少(P<0.05),AAⅠ高、低剂量组AST/ALT比值明显升高(P<0.05,P<0.01);与自噬抑制剂组相比,自噬抑制剂+AAⅠ高剂量组与自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组AST/ALT比值均明显升高(P<0.01)。(2)HE染色观察显示,AA临床试验Ⅰ高、低剂量组可见肝细胞肿胀,且AAⅠ高剂量组的损伤程度更为显著;自噬抑制剂+AAⅠ高剂量组出现肝细胞出血性坏死,损伤程度较AAⅠ高剂量组明显加重。透射电镜观察显示,AAⅠ高、低剂量组线粒体肿胀,AAⅠ高剂量组亦出现脂肪变性;自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组线粒体肿胀;自噬抑制剂+AAⅠ高剂量组可见内质网肿胀,隐见自噬小体。

肝癌被誉为“癌中之王”,是最常见的恶性肿瘤之一。中国每年新发肝癌患者约占全球一半以上,死亡率在所有恶性肿瘤中位列第二位,严重威胁人民的生命和健康。肝癌起病非常隐匿,早期无明显症状。约80%的肝癌患者首诊就已进入中晚期,5年生存率几乎为零,而早期肝癌患者经过治疗,5年生存率可达60%以上。因此,早诊早治是对抗肝癌的重要手段。甲胎蛋selleck激酶抑制剂白(Alpha fetoprotein,AFP)作为一种血清标志物,是诊断肝癌的常用指标。然而,AFP检测的灵敏度较低,仅有60%～70%的早期肝癌患者AFP值呈阳性。同时,常规的影像学检查,如B超和CT难以发现肿瘤直径小于2 cm或密度近似肝实质的早期肝癌。因此,早期肝癌诊断仍面临较高的假阴性率及漏诊率。随着点击此处科学的发展和进步,以液体活检(Liquid biopsy)这种侵入式小、灵敏度高的肿瘤诊断技术应运而生。其中,循环miRNA分子标志物检测已被写入2019版《原发性肝癌诊疗规范》,并被纳入肝癌早期检测和诊断临床应用。然而,miRNA是一类长度较短的RNA单链分子,且学术界尚未确定一种合适的miRNA内源性参照基Y-27634 molecular weight因,极大地影响了其定量结果的准确性,也是一直限制miRNA标志物在肝癌早期诊断中广泛应用的重要因素。近年来,随着等温扩增技术的快速发展,其在核酸分子检测效率和灵敏度方面展现出较大优势,特别适合miRNA类小分子的检测。同时,微流控芯片技术的兴起,极大地推动着以数字核酸扩增检测(Digital nucleic acid detection,dNAD)技术为代表的“第三代”基因扩增技术的发展。

采用实时荧光定量PCR技术测定各组患者病灶组织中PTEN基因外显子突变及PTEN mRNA水平。进而分析卵巢癌患者的PTEN基因突变及不同病理状态下PTEN mRNA表达水平,最终通过绘制ROC曲线,评估PTEN mRNA水平对卵巢癌的诊断效能。结果 58例卵巢癌组织中,共检出35例携带PTEN基因突变,均为外显子5突变,多分布在中分化、低分化癌中。经对比,观察组的PTEN可能 mRNA水平显著低于对照组(t=6.391,P<0.001)。不同年龄分层下,卵巢癌患者的PTEN mRNA水平无显著性差异(t=0.334,P=0.691)。不同分化类型及病理组织类型分层下,卵巢癌患者的PTEN mRNA水平分布具有显著统计学差异(F=7.891、7.998,P<0.001)。临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的卵巢癌患者PTEN mRNA水selleck产品平显著高于Ⅲ～Ⅳ期患者(t=6.143,P<0.001)。ROC曲线结果显示,PTEN mRNA水平诊断卵巢癌的AUC为0.873(P<0.05),最优截断点的诊断灵敏度和特异度分别为85.71%、71.23%。结论卵巢癌患者常伴有PTEN基因突变,且PTEN mRNA水平可能因分化类型、病理组织类型及临床分期的分布而异,其对卵巢癌的诊断具有重要价MS-275购买值,有望成为卵巢癌新的治疗靶点。
目的分析血清糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)和人附睾蛋白4(HE4)水平检测对老年卵巢癌患者的诊断和鉴别诊断价值。方法纳入51例老年卵巢癌患者(卵巢癌组)、33例卵巢良性病变患者(良性病变组)、30例健康体检女性(对照组)。比较3组研究对象血清CA19-9、CA125和HE4水平,并比较不同病理类型的老年卵巢癌患者血清CA19-9、CA125和HE4水平。

对细胞周期的检测表明,随着给药浓度增加,HepG2细胞的SubG1凋亡峰逐渐累积。Hoechst 33528染色实验表明B4G2可以造成染色质凝集固缩。透射电镜观察细胞发现,B4G2给药后细胞在形态学上出现明显的凋亡现象。流式细胞仪检测Annexin V-FITC/PI染色的细胞显示,B4G2诱导细胞出现早期凋亡和半抑制浓度晚期凋亡都呈现剂量依赖性。Western blot免疫印迹法检测凋亡关键蛋白,发现caspase3、caspase8、caspase9和PARP都有明显的剪切活化,但caspase的抑制剂Z-VAD-FMK不能逆转B4G2诱导的凋亡。JC-1染色显示,B4G2可造成线粒体膜电位去极化,进而PU-H71研究购买引起凋亡前体蛋白细胞色素C透膜释放到胞浆中去。B4G2还可以促进细胞内ROS和钙离子水平的升高,抗氧化剂NAC可以抑制二者的升高,逆转线粒体膜电位的降低,拮抗B4G2诱导的凋亡。同时PT孔的抑制剂MgCl2也可以拮抗细胞凋亡。进一步研究表明,B4G2可以诱导细胞发生线粒体自噬,且自噬抑制剂购买Luminespib可以使细胞凋亡率进一步升高。结论B4G2对HepG2细胞具有较强的增殖抑制作用,其作用机制为B4G2诱导了ROS的累积和钙依赖性PT孔的开放,从而诱导细胞发生线粒体凋亡。B4G2还可以诱导线粒体自噬,且自噬能拮抗凋亡,对细胞起保护作用。
线粒体为真核细胞的重要细胞器之一,作为细胞的”能量工厂”合成三磷酸腺苷,参与细胞生长、分化、增殖、凋亡、信号传导等细胞活动。

小结oxLDL上调PCSK9表达,促进HUVECs焦亡;PCSK9通过UQCRC1/ROS途径介导oxLDL诱导HUVECs焦亡。第二章褪黑素通过circ＿0000033/miR-214-3p/PCSK9途径调控血管内皮细胞焦亡目的前期研究发现MT具有拮抗oxLDL诱导血管内皮细胞焦亡抗A通常S作用,但其作用机制的研究缺乏系统性,因此本部分拟通过分析oxLDL和MT处理HUVECs后的全转录组,筛选差异表达circRNA、miRNA和差异表达基因,系统地探索oxLDL上调PCSK9促HUVECs焦亡的分子机制。以PCSK9为靶基因,从差异miRNA中得LDN-193189到以PCSK9为靶基因的miRNA,再追溯与miRNA靶向结合的circRNA,寻找MT抗血管内皮细胞焦亡的circRNA-miRNA-PCSK9途径,并结合线粒体功能变化,较为系统地探索其作用机制。方法培养HUVECs,进行全转录组分析。分为3组对照组、oxLDAZ 628订单L处理组、oxLDL+MT预处理组,将细胞处理24h后,提取RNA。随后,经过质检和上机预处理,使用华大集团DNBseq平台进行全转录组基因测序,采用Pearson相关系数分析样本间相关性,华大基因Dr.TOM系统进行差异基因及富集分析,KEGG通路分析所有差异基因参与的细胞生物学过程,筛选差异表达circRNA、miRNA和差异表达基因。

[结论]IL-9在结肠癌组织中明显低表达,且与结肠癌的进展及预后密切相关,提示IL-9可能具有抗肿瘤作用。IL-9可抑制小鼠皮下移植瘤的生长并延长小鼠的生存时间;IL-9可增强抗肿瘤免疫反应,并可通过调节肿瘤微环境中免疫细胞亚群的分布而发挥抗肿瘤作用。
[目的]本研究使用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,检测B7-H6 mRNA在3-MA结肠癌中的表达水平。并探讨该基因在结肠癌进展与靶向治疗中的临床意义。[方法]利用结肠癌细胞株与正常结肠组织细胞株,通过qPCR以及流式细胞术分析上述细胞株上B7-H6在mRNA以及蛋白水平上的差异,并通过免疫组化分析B7-H6蛋白在结肠癌组织中的表达水平。以65例结肠癌组织和15例癌旁组织为研究对象,使用qPCRYH25448检测B7-H6mRNA表达水平,并结合临床资料,利用卡方检验分析B7H6mRNA表达水平与病理参数,包括年龄、性别、病理类型、临床分期、肿瘤外形、N分期以及肿瘤浸润程度等的相关性。采用Kaplan-Meier法(生存期分析)比较不同B7-H6mRNA表达水平患者预后的关系以及比较不同病理参数患者的生存期关系。[结ARN-509半抑制浓度果]1.正常结肠细胞株上B7-H6 mRNA水平介于两结肠癌细胞株之间,且两结肠癌细胞株蛋白水平差异非常大,一株呈现高表达一株则未检测到表达,芯片分析结果显示,癌旁组织与结肠癌组织中的B7-H6mRNA表达水平并无显著性差异(P=0.3303)。2.生存期分析发现,与B7-H6mRNA低表达组相比,B7-H6mRNA高表达组结肠癌患者预后生存期显著降低,差异具有统计学意义(P=0.008)。

目的探讨血清心血管调节肽(salusin-β)和单核趋化蛋白-1(MCP-1)表达与高血压患者发生冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的相关性。方法回顾性选择2016年1月至2018年6月于我院接诊的65例高血压合并冠心病患者(高血压合并冠心病组)和75例单纯高血压患者(单纯高血压组),选择同期体检健康者60例为对照组。比较3组受试者的基线资料、血Ispinesib体外清salusin-β、MCP-1表达。比较不同冠状动脉病变(SNYTAX)评分及不同病变类型的高血压合并冠心病血清salusin-β、MCP-1表达。结果与对照组比较,高血压合并冠心病组和单纯高血压组患者的体质指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、吸烟、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLPX-478购买-C)、salusin-β、MCP-1均增高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)降低(P<0.05),与单纯高血压组比,高血压合并冠心病组的TC、LDL-C、salusin-β、MCP-1均增高,HDL-C降低(P<0.05)。高血压合并冠心病组中,高、中危亚组血清salusin-β、MCP-1高于低危亚组,高危亚组血清salus半抑制浓度in-β、MCP-1高于中危亚组(P<0.05);不稳定型心绞痛亚组、心肌梗死亚组血清salusin-β、MCP-1高于稳定型心绞痛亚组(P<0.05),心肌梗死亚组血清salusin-β、MCP-1高于不稳定型心绞痛亚组(P<0.05)。血清salusin-β、MCP-1呈正相关(P<0.05)。TC、LDL-C、HDL-C、salusin-β、MCP-1均是高血压发生冠心病的影响因素(P<0.05)。