2.根据人MYCN基因信息设计并构建四个靶向MYCN的干扰质粒,筛选鉴定后与pLenti6.3/V5 Dest载体重组,并行慢病毒包装构建成为Lenti-EGFP-MYCN-miR’幔病毒表达载体,感染高表达MYCN和ALK的人神经母细胞瘤细胞,应用荧光定量PCR和Western blot检测四个Lenti-E购买Inhibitor LibraryGFP-MYCN-miR慢病毒表达载体对MYCN mRNA和蛋白表达的沉默效应,筛选出最佳干扰靶序列慢病毒表达载体。3.通过Blasticidin药物抗性筛选获得MYCN干扰稳转人神经母细胞瘤细胞株,并应用荧光定量PCR, Western blot检测MYCN干扰稳转株MYCN mRNTalazoparib供应商A和蛋白表达水平,鉴定稳转株成功建立。4.体外实验中,应用CCK-8检测MYCN干扰稳转株MYCN基因敲减后人神经母细胞瘤细胞增殖水平,Transwell小室结合结晶紫染色检测细胞侵袭能力。5.体外实验中,MYCN敲减与TAE684联合作用下,应用流式细胞术检测人神经母细胞瘤细胞凋亡水17-AAG说明书平,应用Western blot检测MYCN,ALK蛋白和Bcl-2, Bax, Cleaved Caspase -3蛋白表达情况,并分析其可能机制。6.应用高表达MYCN和ALK的人神经母细胞瘤细胞系建立人源性神经母细胞瘤荷瘤裸鼠模型,检测MYCN敲减与TAE684联合作用下肿瘤生长情况,并应用Western blot检测肿瘤组织MYCN,ALK蛋白表达水平。