02±7.61%,与25ng/ml的抵抗素诱导相比,50ng/ml及100ng/ml的抵抗素组的血小板活化率更高,具有统计学意义(P=0.028及0.036),200ng/ml的抵抗素组的血小板活化无统计学差别(P=0.077)。2)抵抗素(50ng/ml)与ADP(10uM)诱导的血小板活化率差值无统计学意义(51.74±5.2% vs 52.96±2.88%, P=0.621)。抵抗素与ADP联合作用后的血小板P-选择素的表达率比单独抵抗素或ADP作用无明显升高(55.51±3.91% vs 51.74±5.2%, 52.96±2.88%, P值分别为0.224及0.203)。3)抵抗素(50ng/ml)比凝血酶(0.05U/ml)对血小板的活化作用更强(51.74±5.2% vs 45.08±2.7%,P=0.028)。抵抗素联合凝血酶作用后血小板的活化率比凝血酶组的明显增高(45.08±2.7% vs 50.41±3.59%, P=0.02)。4)与抵抗素组(50ng/ml)比较,SB203580预处理后,抵抗素对血小板的激活率明显降低(25.22±8.34% vs 51.74±5.2%, P
背景 肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)是一种慢性功能性肠道疾病,发病率呈上升趋势,IBS的主要特点是内脏敏感性增高,但其神经生物学机制尚不完全清楚,故对其发病机制研究有较重要意义。新近研究表明,神经胶质细胞在内脏痛反应中可能起较为重要作用,尤其是脊髓中支配左半结肠的骶髓后联合核(Dorsal

还有 commissual nucleus, DCN)中神经胶质细胞与IBS内脏高敏感性可能具有密切相关性,也成为目前研究的热点问题。 目的 本实验采用旋毛虫感染大鼠成功制作IBS大鼠模型,通过对模型大鼠的①结肠扩张刺激,观察脊髓背角中NMDAR(N-methyldaspartate receportes, NMDAR)、CGRP(Calcitoningene-related peptide, CGRP)和DCN中小胶质细胞的变化；②给予椎管内插管注射小胶质细胞上MAPK-38特异性抑制剂SB203580,观察脊髓背角中MAPK-P38、ERK以及DCN中小胶质细胞的变化,为进一步研究IBS内脏敏化的神经生物学机制提供理论依据。 方法 用旋毛虫悬液灌胃建立IBS模型,采用电生理学方法观察正常大鼠和IBS大鼠腹直肌肌电的变化；采用免疫荧光组织化学方法观察两者骶髓后角中NMDAR、CGRP、MAPK-P38、ERK以及骶髓后联合核中的小胶质细胞的表达情况。

结果 IBS结肠刺激组大鼠腹直肌肌电、大鼠骶髓后角中NMDAR、CGRP表达以及DCN中的小胶质细胞活化程度较正常大鼠及IBS未刺激组均显著增强(P<0.01)。IBS大鼠予以结肠扩张性刺激,其骶髓后角中P38、ERK表达较正常大鼠明显升高,同时OX42表达明显增高,二者相比差异显著(P<0.01),而当给予抑制剂SB203580后P38表达明显下降,同时OX42水平降低(P0.05)。 一般 结论 IBS内脏高敏感性可引起骶髓DCN中小胶质细胞的变化,其反应与小胶质细胞存在密切关系。IBS的内脏敏化可能是通过DCN中小胶质细胞的MAPK-P38信号转导途径实现的。
目的：牙周炎是人类最普遍的口腔疾病之一,它不仅是牙列缺损乃至缺失的主要原因,也是某些全身疾病如糖尿病、心血管疾病、妊娠并发症的危险因素。近一百年来,对牙周疾病的研究不断深入,其致病机理仍有诸多未解之谜,以往研究已经证实咬合创伤可参与牙周炎的发生与发展,并直接影响牙周组织的改建与修复。牙周膜成纤维细胞作为牙周膜中的主要感受性细胞和效应性细胞,在适宜的周期性应力作用下,可发生增殖、迁移、分化和凋亡,参与组织的适应性改建。本研究拟在成功构建成纤维细胞体外培养一力学刺激模型的基础上,采用流式细胞术及RT-PCR等先进检测技术,从分子和基因水平探讨周期性张应力诱导成纤维细胞凋亡的相关机制,初步阐明P38MAPK信号通路在周期性张应力诱导成纤维细胞凋亡中的作用,明确周期性张应力、细胞凋亡及P38MAPK信号通路三者的关系,为全面诠释咬合创伤的致病机理以及探寻咬合创伤干预治疗的关键靶点提供理论依据和新的思路。

方法：以体外培养的成纤维细胞为实验对象,采用多通道细胞牵张应力加载系统,分别对待测细胞施加0h,6h,12h,24h周期性张应力。实验分为加力组(0h,6h,12h,24h)及加力+SB203580组(0h,6h,12h,24h)共八组。细胞所受力值大小以加力板底部硅胶膜的拉伸形变率(%)表示,拉伸形变率越大,表示成纤维细胞所受张应力越大。本实验细胞所受形变率为12%,频率为6循环/分钟,即每循环包括5秒钟牵张和5秒钟松弛。通过流式细胞术分析细胞的凋亡率,RT-PCR检测Bax蛋白的表达情况。加力之前对细胞施加P38MAPK特异性抑制剂SB203580,然后再对细胞施加相同的张应力之后再检测细胞的凋亡率及Bax蛋白的表达情况。应用SPSS10.0统计软件对实验数据进行统计学分析。 结果： 1.细胞培养获得了性状稳定的成纤维细胞,并成功构建了成纤维细胞体外培养-力学刺激模型。 可能 2.形变率为12%、频率为6循环/分钟的周期性张应力可诱导成纤维细胞的凋亡,成纤维细胞的凋亡率随加力时间的延长而增加,达到最高峰后开始下降,24小时内仍高于未加力组(p<0.05)；阻断p38MAPK信号通路后,凋亡基因bax的表达量降低(p
目的：翼外肌在错(?)畸形的发展及诊疗的各个阶段中起着重要作用,可以受到外环境改变的刺激而发生适应性改建。本研究在成功构建成肌细胞体外培养—力学刺激模型的基础上研究P38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用。 方法：本实验将实验细胞分为对照组和抑制剂组。对每组细胞分别施加0小时,6小时,12小时和24小时的周期性张应力。加力设备采用多通道细胞牵张应力加载系统,加力的力值设定为15%,每分钟10循环,每循环包括3s牵张,3s松弛。应用Hoechst33258和光学显微镜检测细胞凋亡的形态学变化；RT-PCR和流式细胞术检测细胞凋亡情况；Western Blot检测信号通路中P38MAPK蛋白P-P38MAPK蛋白的表达变化情况。实验结果应用SPSS17.0软件分析处理。 结果：光学显微镜可见持续张应力的作用下,骨骼肌成肌细胞发生不同程度的凋亡。Hoechst 33258检测观察到细胞受力后细胞核固缩并出现凋亡小体。RT-PCR和流式细胞术结果显示随加力时间的延长细胞凋亡率增加(P<0.