基于大鼠肝脏组织代谢组数据建立的PLS-DA模型,计算出三个主成份,模型能够很好地区分炎症期、硬化期和肝癌期三个阶段；

9.基于大鼠肝癌组织和肿瘤邻近组织代谢组数据建立的OPLS模型,发现牛磺酸结合胆汁酸是最重要的代谢产物； 10.人血浆的代谢组与上述50个不同代谢产物相比,共有29个可以配对上； 11.用这29个代谢产物所建立的PLS-DA模型,能够很好地区分肝炎、肝硬化及肝细胞癌病人； 12.二元logistic回归进行计算,方程式显示如下(1,2)：5个代谢产物进入最后的肝癌预测方程。这些产物包括：二氢(神经)鞘氨醇(Measured mass:301.2980,X1),棕榈酰肉碱(Measured mass:399.3351,X2),一种胆汁酸衍生物(Measured mass:356.2711,X3),溶血磷脂酰胆碱(LPE(22：5),Measured mass:569.3475,X4),以及溶血磷脂酰乙醇胺(LPC(16：0),Measuredmass:453.2856,X5),5个代谢产物组合后的ROS曲线下面积为0.951； 13.5个代谢产物在肝癌病人血浆相对浓度与肝炎病人及肝硬化病人相比,除了胆汁酸衍生物在HCC与肝硬化之间差异没有统计学意义,均有显著差异。 [结论] 本研究采用液相色谱—质谱联用分析技术(LC-MS),对DEN诱导的大鼠肝癌动物模型血浆及肝脏组织进行代谢组学研究,筛选出区分肝癌与非肝癌的50个代谢产物,与肝炎、肝硬化及肝癌病人的血浆代谢组数据比较,最终寻找到5个潜在代谢标志物：二氢(神经)鞘氨醇,棕榈酰肉碱,一种胆汁酸衍生物,溶血磷脂酰胆碱,以及溶血磷脂酰乙醇胺。研究结果为寻找肝癌分子标志物、肝癌代谢相关通路研究及肝癌的诊断提供了新的思路与方法。 selleck化学药品液面控制 第二部分Hedgehog信号通路在肝内胆管癌发生发展中的作用 ZD6474临床试验 [研究目的] 肝内胆管癌(Intrahepatic Cholangiocarcinoma,ICC),又称胆管细胞癌或周围型胆管癌,是来自肝内二级分支以下胆管树上皮的肿瘤。在世界范围内,肝内胆管癌是仅次于肝细胞癌的第二大肝脏恶性肿瘤,占原发性肝脏恶性肿瘤的10%-20%,其发病率近年来呈上升趋势。肝内胆管癌具有发生隐匿、恶性程度高、发展迅速、手术切除率低、复发转移早、临床预后差等特点,严重影响病人的生活质量及生存率。以往对这类非肝细胞起源的肝脏恶性肿瘤的发生与发展过程缺乏系统的了解,研究水平也相对滞后。因此针对临床肝内胆管癌诊治中的难点进行深入研究,尤其是研究其发生、发展以及复发、转移的机制,以寻找新的有效的肝内胆管癌特异性治疗方法十分必要。

Hedgehog(Hh)基因是编码一系列分泌蛋白的基因家族,1980年首先在果蝇中被发现。Hh信号转导通路最早被发现对胚胎发育过程中的细胞分化和增殖起重要作用。近年来通过对其信号转导途径深入研究,发现Hh通路的异常在人类肿瘤的形成中也有极其重要的作用。HH基因在不同组织中过度表达以及靶基因突变,均可导致细胞特异性的组织增生,参与肿瘤的发生和发展。Hh通路与肿瘤的关系最早在Glioma中被证实,其与脑部神经瘤的形成联系密切,后又发现Hh信号异常与基底细胞癌、肺癌、前列腺癌、口腔癌和消化道肿瘤等的形成均有重要关系。 Hh信号通路在肝脏发育、细胞分化以及肿瘤发生上均起重要作用,本实验拟分析Hh信号通路相关分子在肝内胆管癌组织及肝内胆管癌细胞系中的表达,体内外调节Hh信号通路观察其对肝内胆管癌细胞系生物学特性的影响,并分析Hh信号通路下游转录分子Gli1、Gli2表达水平与肝内胆管癌病人临床病理资料及预后的相关性。以上工作有助全面揭示肝内胆管癌发生、发展的分子机制,深化对Hh信号通路的认识,为寻找肝内胆管癌新治疗靶点提供线索和思路。 购买AG-014699 [研究方法] 1. Real-time PCR检测正常肝内胆管上皮组织与对肝内胆管细胞癌组织中Hh通路信号分子的mRNA表达水平； 2.免疫组织化学检测正常肝内胆管上皮组织与对肝内胆管细胞癌组织中Hh通路信号分子的蛋白表达水平； 3.体外用小分子化合物改变Hh信号通路的活性,观察其对肝内胆管癌细胞系生物学特性的影响； 4.体内用小分子化合物改变Hh信号通路的活性,观察其对肝内胆管癌细胞系生物学特性的影响；

5.Hh通路信号分子与肝内胆管癌病人临床病理资料及预后资料的统计分析。 [结果] 1.Hh信号通路在肝内胆管癌组织中异常激活：Hh信号通路配体shh和ihh分别有87.8%和78.0%表达升高,受体ptchl有87.8%表达升高,下游分子smo有85.4%表达升高,下游转录分子gli1、gli2及gli3分别有65.9%、87.8%及36.6%表达升高,下游靶分子hhip、bcl2和c-myc分别有17.1%、75.6%和82.9%表达升高； 2.Hh信号通路在肝内胆管癌细胞系QBC939、RBE及HCCC-9810中也异常激活； 3.在体外用Hh信号通路特异性抑制剂KAAD-Cyclopamine能够抑制QBC939、RBE和HCCC-9810的增殖,且其抑制程度与KAAD-Cyclopamine呈剂量依赖性； 4.在体内Cyclopamine能够明显抑制QBC939细胞种植肿瘤的大小； 5.肝内胆管癌组织中Hh信号通路下游转录分子Gli1蛋白高表达的病人更易发生肝内转移,预后更差； 6.肝内胆管癌组织中Hh信号通路下游转录分子Gli2蛋白高表达的病人更易发生肝内转移和血管侵犯,预后更差； 7.单因素分析发现发现血清CA19-9>37units/ml、最大肿瘤直径>5cm、伴有肝内转移、淋巴结转移、血管侵犯、T3/4、TNMⅢ/Ⅳ期和Gli1、Gli2蛋白在肿瘤组织中高表达的肝内胆管癌病人总体生存率更低； 8.