神经酰胺-石墨烯氧化物纳米颗粒抑制乳腺癌细胞(Luminal A型)的肿瘤生物学行为

目的探讨石墨烯氧化物纳米颗粒负载NBDC6-神经酰临床试验胺(NPP/C)对乳腺癌细胞(Luminal A型)的抗肿瘤作用。方法制备NPP/C为实验组, 以荧光标记的神经酰胺(NBDC6-Ceramide)为对照组, 转染人乳腺癌细胞(MCF-7), 荧光显微镜观察转运效率, 细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆平板检测细胞增殖能力, Transwell迁移实验检测细胞移动能力, 流式细胞术检测细胞凋亡, 蛋白质印迹法(Western blot)检测相关凋亡蛋白, 裸鼠皮下成瘤测量肿瘤增殖能力。组间比较采用t检验分析。结果 NPP/C转运释放的神经酰胺效能明显高于NBD C6-Ceramide。CCK-8显示实验组和对照组细胞在不同时间吸光度(A)值分别为0.20±0.03比0.17±0.04(t=1.039, P0.05), 0.41±0.05比0.26±0.02(t=4.335, P0.05), 0.52±0.04比0.38±0.03(t=4.363, P0.01)和1.25±0.06比0.59±0.07(t=8.128, P0.01)。细胞克隆平板结果示两组细胞数分别为(577.3±41.0)个和(962.7±74.5)个(t=-7.850, P0.01)。Transwell也许迁移实验提示实验组细胞移动能力明显低于对照组。流式细胞学检测两组细胞凋亡率分别为(79.29±8.44)%和(20.51±17.35)%(t=5.284, P0.01)。Western blot检测实验组中凋亡相关蛋白一般Caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达显著高于对照组, 而B细胞淋巴瘤因子2(bcl-2)表达显著低于对照组(P0.05)。裸鼠体内验证, 两组皮下移植瘤体积分别为(942±73) mm3和(1 472±109) mm3(t=8.265, P0.01);实验组移植瘤中增殖细胞核抗原Ki-67表达显著低于对照组, 而半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达高于对照组(P0.05)。结论 NPP/C纳米颗粒可抑制乳腺癌细胞(luminalA型)的增殖和迁移能力。

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