方法使用超速离心的方法对人乳腺癌BT549细胞培养液中的外泌体进行提取和纯化,以通用透射电子显微镜观察外泌体的形态和大小,蛋白免疫

方法使用超速离心的方法对人乳腺癌BT549细胞培养液中的外泌体进行提取和纯化,以通用透射电子显微镜观察外泌体的形态和大小,蛋白免疫印迹实验鉴定外泌体的标志蛋白,以CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测外泌体对BT549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果透射电子显微镜下外泌体的形状为椭圆形,外包被一层磷脂膜,直径40~110 nm;蛋白免疫印迹实验结果显示外泌体内标志蛋YH25448浓度白TSG101以及外标志蛋白CD63均明显富集;CCK-8实验结果显示共培养24 h后,实验组的BT549细胞增殖力较对照组明显增强(F=12.99~50.95,P<0.001);细胞划痕实验结果显示外泌体明显促进了BT549细胞的迁移(t=8.93,P<0.01);Transwell实验结果显示实验组BT549细胞迁移数较对照组明显增多(t=4.77,P<0.购买ARN-50901)。结论乳腺癌细胞来源的外泌体能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,表明肿瘤来源外泌体可作为交叉信号的传递平台,在促进肿瘤的生长和肿瘤转移方面发挥自分泌作用。
目的建立裸鼠乳腺癌细胞三阴性转移模型,并用超声造影观察三阴性乳腺癌细胞在裸鼠体内的增强情况。方法将乳腺癌模型小鼠随机分为试验组和对照组,每组10~20只。试验组在用药前1、3、5天给予联合用药,对照Ilomastat半抑制浓度组给予生理盐水溶液。常规超声和大体超声观察裸鼠三阴性乳腺癌细胞状态。接种后6周,尾静脉注射SonoVue超声造影剂,瘤周皮下注射超声造影剂。最后对原发性肿瘤和三阴性乳腺癌细胞进行病理检查。结果A组裸鼠种植后第7天肿瘤形成率为7/7,B组裸鼠种植后第5天肿瘤形成率为5/5;两种方法,实验组肿瘤形成后的第七天,Peak值均显著降低,与对照组差异显著。实验组B中第3、5、7天的Peak值与第1天给药前的Peak值的差值与对照组B间均有统计学意义。

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