所得生物碱单体成分对人结肠癌HT-29细胞有一定的抑制作用,其中马钱子碱作用最强,伪士的宁次之。马钱子碱与伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞具有显著的抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;还可影响线粒体膜电位的变化,使线粒体膜电位降低,诱使HT-29细胞在G1期发生阻滞,可通过上调p53、caspase3、parp、caspase9蛋白表达水平,下调bcl-2蛋白表达更多水平来诱导细胞凋亡。
目的通过益气健脾活血法对线粒体凋亡的调控作用研究,探寻益气健脾活血法防治T2DM骨骼肌细胞病变的作用靶点及作用规律,揭示其治疗机制,为益气健脾活血法的临床应用提供科学依据,也为中医药防治T2DM骨骼肌病变提供新的研究思路。方法将SPF级SD大鼠,随机分为2组,每组20只,即空白组和中药组,中药组给予参芪复方Ulixertinib3mL(2mg生药/mL)中药浸膏灌胃。正常组给予等体积生理盐水灌胃,每日2次,连续3天。于末次灌胃1h后腹主动脉取血,室温静置2h,4℃离心,取血清,56℃水浴30min灭活,-80℃冻存备用。取第4代大鼠L6肌细胞胰酶消化后,加DMEM(含10%FBS)培养液于离心管中,吹打,混匀。细胞密度接近70%时,更换无血清培养基继续培养2购买Thiazovivin4h,使细胞同步化。每6孔细胞为一组,分组与刺激方法如下取第4代大鼠L6肌细胞接种于T75培养瓶,细胞密度接近70%时,更换无血清培养基继续培养24h,使细胞同步化。分组干预方法如下(1)HBM高糖模型组;(2)HRM高糖对照组;(3)HLS5%中药含药血清组;(4)HMS10%中药含药血清组;(5)HHS15%中药含药血清组;(6)HBL罗格列酮组;(7)CTRL空白对照组。上述干预液配制完成后,0.22μm过滤。