使用蛋白质印迹法检测miR-26b对mESCs中3个关键转录因子的蛋白表达影响。用体外模型观察转染pcDNA-pre-miR-26b对mESCs形态的影响。结果 mESCs中,miR-26b的前体在miR-26簇群表达最高。MEF中所有miR-26前体均上调,其中pre-miR-26b上调幅度最大(上调约10倍)。成熟的miR-26b在EB形成CB-839过程中从第2天到第6天明显上调,并且成熟miR-26b在MEF中的表达水平明显高于其在mESCs中的表达水平。miR-26b的过表达抑制mESCs增殖,并显示miR-26b过表达诱导mESCs于细胞周期的G1期阻滞,miR-26b不影响mESCs的凋亡。ALP染色结果表明miR-26b导致mESCs中ALP活性降低。过Compound C小鼠表达miR-26b导致mESCs中多能性标志物(Oct4、Sox2和Nanog)的表达水平降低。体外模型研究miR-26b对mESCs分化的影响,在miR-26b诱导的第4天观察到了分化的细胞。结论此研究证实miR-26b对mESCs多能性的调控作用。
目的研究干扰A型激酶锚定蛋白12(AKAP12)对人或者乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响,并初步探讨其机制。方法采用携带干扰AKAP12核苷酸序列(shRNA-AKAP12)、空白对照(shRNA-NC)的慢病毒转染乳腺癌MCF-7细胞。Western blot检测转染后细胞AKAP12蛋白表达;CCK-8实验、克隆形成检测增殖能力;Western blot检测细胞周期相关蛋白激酶抑制蛋白(p21、p27)以及细胞周期进展蛋白CyclinD1表达。