转染后的细胞以RT-PCR、免疫组织化学法加以鉴定,并分析其碱性磷酸酶活性和矿化结节的形成率。在这些永生化的细胞株当中,有一株名为iMDP-3的细胞,显示出高的增殖率及分化和形成矿化结节的能力,但同时保留了与原代培养的细胞相似的基因型和表型特征。此外,iMDP-3细胞还有高的转染效率且能够为BMP2刺激所诱导并作出回应。综上我们得出结论,建立这样一种稳定的小鼠牙乳头间充质细胞株,或许什么能用以牙齿细胞分化和牙本质形成的机制研究。 3. BMP2调控DSPP基因转录经由Dlx3-Osx-GCN5信号通路介导 本研究中我们发现BMP2可通过上调iMDP-3磷酸化激酶Erk、Akt的活性诱导转录因子Dlx3,Osx和组蛋白乙酰化酶GCN5的磷酸化,进而促进三种蛋白发生核转位。利用凝胶阻滞迁移实验(EMSA)、抗体超迁移和寡核苷酸竞争抑制实验以及染也许色质免疫共沉淀(ChIP)实验证明Dlx3、Osx能与DSPP基因启动子上特定结合位点相互作用。进一步研究表明,过表达Dlx3和Osx可增强iMDP-3细胞中DSPP启动子转录活性。免疫共沉淀(Co-IP)结果显示Dlx3、Osx、GCN5之间存在蛋白与蛋白的相互作用。Re-ChIP实验证实GCN5可与RNA聚合酶II共同结合于DSPP启动子。Western和 blot及ChIP实验提示BMP2可通过GCN5乙酰化DSPP核心启动子组蛋白H3并重塑染色质。综上结果表明BMP2调控DSPP基因表达和成牙本质细胞分化经由Dlx3-Osx-GCN5号通路所介导。
胃癌(GC)是严重危害人类健康的常见肿瘤之一,在全球癌症死亡率仅次于肺癌居第二位,胃癌发病率存在明显的地域差异,在部分亚洲国家、欧洲中部、美国中部和南非发病率较高,尤其是日本、韩国和中国东亚三国为高发地区,其发病总数约占全球总数的2/3。