Rab23对鳞癌Sa3细胞生长增殖的影响 1)选取口腔鳞癌Sa3细胞株,构建稳定过表达和干涉Rab23的Sa3细胞株;Western blot实验检测Rab23表达。结果显示:过表达Rab23组融合蛋白转染成功,干涉Rab23组,其表达较空载体组下降; 2)平板克隆形成实验检测Rab23对Sa3细胞增殖的影响。结果显示:过表达Rab23组较对照组相比,细胞增殖能力降低,干涉Rab23组较空载体组相比细胞增殖能力明显提高; 3)流式细胞仪检测Rab23对Sa3细胞周期的影响。结果显示:过表达Rab23可引起Sa3细胞G1期阻滞,影响细胞周期进程; 4) CCK8实验检测Rab23对Sa3细胞生长的影响。结果显示:与对照组相比,过表达Rab23组细胞生长能力降低,干涉Rab23组生长能力增高。
2. Rab23抑制鳞癌Sa3细胞生长增殖机制的初步探讨 1) Western blot检测Rab23对Hedgehog信号通路分子Gli1、Gli2表达的影响。结果显示:稳定转染过表达Rab23组和干涉Rab23组其Hedgehog信号通路重要的转录因子Gli1、Gli2表达水平与对照组和空载体组相比未见明显变化; 2) Western blot检测Rab23对细胞Erk1/2、p-Erk1/2表达的影响。结果显示:过表达Rab23组和干涉Rab23组较对照组和空载体组相比Erk1/2表达水平无明显变化;与对照组相比,过表达Rab23组p-Erk表达水平降低,而干涉Rab23组较空载体组相比p-Erk表达水平升高。 3) Western blot检测Rab23对细胞周期相关蛋白表达的影响。结果显示:CyclinE在各组细胞中的表达水平未见明显变化;与对照组相比,过表达Rab23组Cyclin D1表达水平降低,而干涉Rab23组较空载体组相比Cyclin KPT-330细胞系 D1表达水平升高。 主要结论: 1) Rab23对鳞癌Sa3细胞的生长增殖具有抑制作用; 2) Rab23可能不通过Hedgehog信号通路来抑制鳞癌Sa3细胞的生长增殖; 3) Rab23抑制鳞癌Sa3细胞生长增殖可能是通过调控Erk MAPKs信号通路发挥作用; 4) Rab23下调鳞癌Sa3细胞周期蛋白Cyclin D1的表达引起Sa3细胞G1期阻滞,从而对细胞周期进程产生影响。
目的: 建立Walker-256大鼠移植性肝癌模型后切除肿瘤并植入自制门静脉泵,经泵灌注不同剂量Licartin并联合灌注化疗(FOLFOX方案),评价这种联合用药方案的安全性、有效性和可行性,从而为这种新疗法的临床应用提供实验理论基础。
Selleck MAPK inhibitor 材料与方法: 选取雄性SD大鼠100只,将含有大量Walker-256中瘤细胞的浓缩腹水种植于大鼠肝脏的左外叶。一周后通过CT扫描,选取瘤体直径在2.0-3.0cm的大鼠,切除肿瘤后植入自制门静脉泵。7天后将存活大鼠随机分为A、B、C三组。A组(小剂量Licartin+PVIC组):通过门静脉泵灌注Licartin (2.5mCi/kg)+灌注化疗(FOLFOX方案);B组(大剂量Licartin+PVIC组):通过泵灌注Licartin(5.0mCi/kg)+灌注化疗(FOLFOX方案);C组(PVIC组):通过泵行灌注化疗(FOLFOX方案)。每次手术前后均观察大鼠一般情况,抽血查血常规、肝肾功能和甲状腺功能。行CT扫描了解肿瘤生长和转移情况,A、B组行SPECT扫描检测核素分布情况。大鼠死亡后切取肝、肺和其他转移灶行病理学检查。观察所有大鼠生存资料进行生存分析。 结果: 通常 本研究共进行了肝癌种植术、肝癌切除和门静脉泵植入术及经门静脉泵灌注术三次实验,术程基本顺利,麻醉满意,术后恢复情况良好。整个实验过程中大鼠体重呈现下降趋势。
注射法种植肝癌简单易行,成瘤率为95.7%。切除肿瘤并植入门静脉泵后术后一周共46只大鼠行灌注术(其中A组18只,B组18只,C组10只)。 灌注术后血常规检查提示术后7dA组和B组WBC计数明显降低,而且B组WBC计数又低于A组和C组(P=0.043),C组计数基本正常。术后14d计数均基本回归正常。RBC计数和PLT计数变化不大(P>0.05)。 肝功能检查显示灌注术后Id AST和ALT计数都明显上升(P值分别是0.024和0.104),A组和B组计数高于C组,而且B组ALT计数还高于A组(P0.05)。肾功能检查发现BUN和Cr计数在灌注术前后基本无大变化(P>0.05)。 甲状腺功能检查发现A组和B组术后7d FT3、FT4计数明显低于术前(P值均<0.001),TSH明显高于术前(P<0.001),B组甲状腺功能损伤明显高于A组(P0.05)。 术后5min SPECT扫描显示未见核素在肝脏内明显浓聚,甲状腺内富集大量核素。术后21d对于肿瘤明确复发的大鼠行SPECT扫描显示核素在肝肿瘤区域大量富集。 肝癌种植术后一周行CT扫描发现63%的大鼠瘤体直径在2.0-3.0cm之间。灌注术后21d CT扫描发现B组复发和转移最少,A组次之,C组最多,但是分组治疗和TNM分期二者之间并没有关系(P=0.371)。 病理学检查见肝肿瘤核分裂象增多,异型性明显,瘤细胞弥漫密集分布。免疫组化检查显示AFP阴性,CEA阴性,Hepa阴性,Glypican-3阴性(局灶±),Ki-67阳性(比例约40%)。 所有大鼠都在灌注术后48天内死亡。生存状况分析显示三组大鼠的MST分别为27d、39d和24d,其中B组生存时间长于A组和C组(P
目的:原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)是一种常见的恶性肿瘤。目前对于肝癌的发病机制仍不清楚。近年来,由于干/祖细胞学说的提出,有学者认为肝癌可能起源于肝干/祖细胞。本文选择ATP结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette superfamilyG2,ABCG2)为干细胞标志物,探讨ABCG2在肝细胞癌、癌旁组织及正常肝组织中的表达,及其与患者临床病理特征之间的关系及其预后作用。 方法:收集桂林医学院附属医院肝胆胰外科2009年5月~2012年7月手术切除的60例肝细胞癌(HCC)、60例癌旁和7例正常肝组织标本,其中男性42例,女性18例,年龄30~68岁,中位年龄50.