05)；而第三周LIF组与假手术组比较及与PD组比较差异具有显著统计学意义(P0.05)。 2免疫荧光方法清楚显示：除正常对照组外,其余第3周三组小鼠脑组织内均出现免疫荧光阳性的内源性神经干细胞激活表达,均主要分布在核团周围。 3半定量RT-PCR方法显示：正常组、假手术组、LIF组、PD组实验后第1周及第2周GP130mRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);而第三周LIF组与假手术组比较及与PD组比较差异具有显著统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较差异也有统计学意义(P
髓样分化因子88(Myeloid Differentiation Factor88, MyD88)的经典作用是通过与TLR/IL-1R的TIR结构域相结合,引起NF-κB和丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinases, MAPKs)的活化,导致炎症因子的释放。近年的研究发现,MyD88在一些实质瘤的肿瘤细胞中表达增加,可能通过促炎症反应作用和非炎症作用促进肿瘤的进展。在本课题中,我们检测了MyD88在肝癌组织中的表达水平,分析了MyD88表达水平在肿瘤病人预后判断中的价值,利用体外实验和动物体内实验探讨了MyD88在肝癌细胞增殖和转移中的作用及其作用机制。

selleck化学药品 通过对110例肝癌标本的癌组织和临近的癌旁组织免疫组织化学染色发现,MyD88在肝癌中的表达量增加：通过分析MyD88和临床指标之间的关系,证实MyD88的表达量和肝癌病人的临床病理分期、复发呈正相关；通过分析MyD88和肝癌病人预后之间的关系,证实MyD88表达量高的病人,预后比较差,统计学分析证实MyD88是一个独立的影响病人预后的因素。 为了研究MyD88对肝癌细胞增殖的影响,我们进行了平板克隆和裸鼠体内成瘤实验,实验证实MyD88可以促进细胞克隆数目的增加和裸鼠移植瘤的生长。为了研究MyD88对肝癌细胞凋亡的影响,我们进行了流式细胞术和TUNEL凋亡检测实验,流式检测证实MyD88可以抑制肝癌细胞的凋亡,这一实验结果在裸鼠移植瘤和肝癌标本中得到了进一步的验证。转移是恶性肿瘤的一种重要的生物学特征,也是肿瘤病人死亡的重要原因。为了研究MyD88对肝癌细胞转移的影响,我们进行了细胞迁移、侵袭实验和裸鼠体内成瘤实验,细胞迁移和侵袭实验证实MyD88可以增加肝癌细胞的迁移和侵袭能力,裸鼠体内成瘤实验证实MyD88可以促进裸鼠肺部转移灶的形成。综上所述,MyD88可以通过影响肝癌细胞的增殖、凋亡和转移水平来促进肝癌的进展。 为了研究MyD88在肝癌生长和转移中发挥作用的机制,我们进行了Real-time PCR、ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)、NF-κB荧光素酶活性分析、凝胶电泳迁徙率改变实验(EMSA)和Western Blotting实验,证实了MyD88除了可以通过依赖TLR/IL-1R信号通路调节肿瘤进展相关基因的表达和NF-κB的活性,也可以通过不依赖TLR/IL-1R信号通路调节肿瘤进展相关基因的表达和NF-κB的活性。为了研究MyD88不依赖TLR/IL-1R调节NF-κB活性的机制,我们进行了NF-κB荧光素酶活性分析实验,并给予了LY294002(PI3K/Akt抑制剂)、U0126(Erk1/2抑制剂)或者SB203580(p38抑制剂),实验表明MyD88可以通过PI3K/AKT和p38/ERK调节NF-κB的活性。同时,Western

Blotting实验证实MyD88可以通过不依赖TLR/IL-1R通路调节AKT和p38/ERK的活性。 总之,通过临床标本的分析,我们首次阐明了MyD88在肝癌中的高表达及其与病人预后不良之间的关系。通过体内外实验，我们阐明了MyD88可以通过影响肝癌细胞的增殖、凋亡和转移水平来促进肝癌的进展。通过对机制的探讨,我们阐明了MyD88可以不通过TLR/IL-1R信号通路调节NF-κB的活性以及肿瘤转移和发展相关基因的表达。我们的研究结果可望为肝癌病人预后判断以及肝癌的生物治疗提供了新靶点。
组织或器官纤维化是许多疾病致残、致死的主要原因,严重威胁着人们的健康与生命。目前针对纤维化病变的治疗手段极为有限,处于研究中的抗纤维化化合物很多,但进入临床的十分稀少。作用于多(?)点的吡非尼酮(PFD)的上市标志着抗纤维化药物的研究取得了很大挂展。因此,作用于多靶点纤维化药物的研究成为抗纤维化药物研究的重要发展方向。

因为 MAPK抑制剂 吡非尼酮作用于纤维化过程不同环节中的多个靶点,是目前唯一以纤维化适应症上市的药物,课题组前期筛选到了吡非尼酮的ne-better药氟非尼酮(AKF-PD),已经完成临床前研究。由于强的首过作用,它们的作用强度均不够理想。鉴于该类化合物具有很好的临床应用前景,以此为基础的进一步研究具有重要意义。 本课题在前期研究的基础上,以保持吡非尼酮多靶点作用特点,(?)进代谢快的缺点为目标,设计了一系列新结构的化合物,以其获得(?)学和药动学方面性质优良的先导化合物,为开发新型抗纤维化药物提供候选化合物。并通过部分化合物的药效学研究,探讨高活性、多靶点作用的化合物结构特征,为抗纤维化药物的设计提供有价值的信息,为了解纤维化疾病的病理机制进行有益探索。 本课题以吡非尼酮为先导化合物,设计合成了苯基吡啶酮类化合(?)和苄基吡啶酮两个系列共52个吡啶酮类化合物。完成了目标化合物的结构确证,采用MTT法检测了目标化合物对NIH3T3细胞增殖的抑制活性。结果表明：设计的化合物活性均高于阳性对照药物氟非尼酮,选取4个化合物进行了大鼠体内活性测试和动物急性毒性实验,其中化合物3r与2j显示了很好的成药性 本课题初步归纳了设计合成的两系列吡啶酮类化合物抗纤维化活性的构效关系。结果表明：吡啶酮5-三氟甲基取代后活性明显升高；-苄基取代活性优于1-苯基取代；1位苯基取代基通过氨烷基链连接杂环后活性显著上升；苄基系列中杂环与苯环以氨丙基链连接为好,(?)位取代活性较高；而苯基系列苯环与杂环以氨乙基链连接为佳。在苯环上为非杂环取代的化合物中,侧链长短与活性关系不明显。 本课题在前期工作的基础上系统地合成了两个系列的吡啶酮类化合物,评价了目标化合物的抗纤维化活性,得到了2个成药性较好的化合物；本课题首次研究了吡啶酮类似物的抗纤维化活性构效关系,为进一步研究具有更高抗纤维化活性的新型多靶点化合物提供了重要信息和打下一了坚实基础。
目的：通过建立闭合性脑损伤动物模型,研究脑损伤后白细胞介素1β、丝裂原活化蛋白激酶p38及血管细胞间粘附分子-1在脑组织中的不同时相表达的特点及法医学意义。方法：将75只清洁级SD大鼠随机分成正常对照组、手术对照组及损伤后0.