05）。 5Western blot结果显示，与Vehicle组相比，H-AS在24h和72h可明显降低胞浆HMGB1、TLR4及胞核NF-κB的蛋白表达，结果有统计学差异（P＜0.05）；L-AS组在24h和72h可降低胞浆HMGB1、TLR4及胞核NF-κB，但无统计差异学（P＞0.05）。 http://www.selleckchem.cn/products/CP-724714.html 6与免疫组化和Western blot结果一致，H-AS在24h和72h可明显降低TLR4及NF-κB的mRNA表达，结果有统计学差异（P＜0.05）；L-AS组在24h和72h可降低胞浆TLR4及NF-κB在mRNA水平的表达，但无统计学差异（P＞0.05）。而HMGB1在基因表达水平无统计学差异。 结论：阿利吉仑对缺血再灌注小鼠有较好的神经保护作用，可改善脑缺血损伤后的神经功能缺失，减轻脑水肿，减小脑梗死体积，同时缺血再灌注损伤后的脑组织的HMGB1、TLR4及NF-κB的表达变化与脑组织损伤程度一致，提示脑缺血再灌注后HMGB1/NF-κB通路参与了缺血后损伤；阿利吉仑可下调TLR4表达、抑制HMGB1、NF-κB的转位，从而减轻缺血后的过度炎症反应，实现缺血后的神经保护作用。

第二部分阿利吉仑对局灶性脑缺血再灌注损伤小鼠的抗氧化作用及其相关机制研究 目的：观察脑缺血再灌注损伤后ERK/HO-1通路的表达变化以及SOD活性和MDA含量的变化，研究阿利吉仑对脑缺血再灌注损伤所致的氧化应激反应的作用，探讨阿利吉仑抗氧化作用的相关机制。 方法：选用成年雄性C57/BL小鼠为研究对象，应用改良线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型。随机将C57/BL小鼠分为5组：假手术组（Sham），溶剂对照组（Verhicle），阿利吉仑低剂量组（L-AS），阿利吉仑高剂量组（H-AS），阿利吉仑+PD98059组（AS+PD98059)。Sham组：假手术前连续5天以灌胃方式给予等量生理盐水，每日一次；Vehicle组：术前连续5天以灌胃方式给予等量生理盐水，每日一次；小剂量阿利吉仑干预组(L-AS)：术前连续5天以灌胃方式给予阿利吉仑10mg/Kg，每日一次；大剂量阿利吉仑干预组(H-AS)：术前连续5天以灌胃方式给予阿利吉仑25mg/Kg，每日一次；阿利吉仑+PD98059组（AS+PD98059)：术前连续5天以灌胃方式给予阿利吉仑25mg/Kg，每日一次，术后立即腹腔注射50mg/kg

PD98059。各组取材前进行神经功能评分，干湿重法测定脑组织含水量，TTC染色评价脑梗死体积，检测超氧化物歧化酶（SOD）的活性，丙二醛（MDA）含量的变化情况，分别用免疫组化，Western-blot和RT-qPCR的方法检测缺血脑组织中ERK、HO-1蛋白和mRNA水平的变化。 结果： 1Sham组中未见小鼠神经功能缺损，神经功能缺失评分为0分；Vehicle组在24h和72h神经功能缺损评分均较严重，L-AS组在24h和72h与Vehicle组相比可降低神经功能缺损，但差异无统计学意义（P＞0.05），H-AS组在24h和72h与Vehicle组相比可明显降低神经功能缺损，差异有统计学意义（P＜0.05），H-AS对神经功能缺损的这种改善作用可被ERK抑制剂PD98059阻断，差异有统计学意义（P＜0.05）； TNF-alpha抑制剂s 2与Vehicle组相比，L-AS组在24h和72h可降低脑含水量，但是差异无统计学意义（P＞0.05），H-AS组在24h和72h与Vehicle组相比可明显降低脑含水量，差异有统计学意义（P＜0.05），H-AS对脑水肿的降低作用可被ERK抑制剂PD98059阻断，差异有统计学意义（P＜0.05）； 3与Vehicle组相比，L-AS组在24h和72h可减小脑梗死体积，但是差异无统计学意义（P＞0.05），H-AS组在24h和72h与Vehicle组相比可明显降低脑梗死体积，差异有统计学意义（P＜0.05），H-AS对脑梗死体积这种减小作用可被ERK抑制剂PD98059阻断，差异有统计学意义（P＜0.05）。 Abl activity 4免疫组化结果显示，与Vehicle组相比，缺血后24h和72h，H-AS组在24h和72h均可明显升高p-ERK、

HO-1的阳性细胞数，差异有统计学意义（P＜0.05）；L-AS组在24h和72h可升高p-ERK、HO-1的阳性细胞数，但是差异无统计学意义（P＞0.05），H-AS对p-ERK、HO-1阳性细胞数的升高作用可被ERK抑制剂PD98059阻断，差异有统计学意义（P＜0.05）。 5Western blot结果显示，与Vehicle组相比，H-AS在24h和72h可明显升高p-ERK、 HO-1的蛋白表达，差异有统计学意义（P＜0.05）；L-AS组在24h和72h可升高p-ERK、HO-1的蛋白表达，但差异无统计学意义（P＞0.05），H-AS对p-ERK、HO-1蛋白的升高作用可被ERK抑制剂PD98059阻断，差异有统计学意义（P＜0.05）。 6与免疫组化和Western blot结果一致，H-AS在24h和72h可升高ERK、HO-1的mRNA表达，差异有统计学意义（P＜0.05）；L-AS组在24h和72h可升高ERK、HO-1的mRNA表达，但差异无统计学意义（P＞0.05），H-AS对p-ERK、HO-1mRNA的升高作用可被ERK抑制剂PD98059阻断，差异有统计学意义（P＜0.05）。 7与Vehicle组相比，H-AS可明显增加SOD，减低MDA的含量，差异有统计学意义（P＜0.05）。L-AS组可增加SOD，减低MDA的含量，差异有统计学意义（P＜0.