目的观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达及VSMC的迁移,探讨p38信号通路在这一过程中的作用,为血管重建性疾病的研究提供实验依据。方法 PDGF-BB不同浓度和不同时间刺激体外培养的大鼠VSMC,用放线菌素D、SB202190(MAPK/p38特异性抑制剂)处理PDGF-BB诱导的VSMC。细胞划痕实验检测细胞迁移,运用Real-time RT-PCR检测MMP-2基因表达水平,Western blot检测p38的活性变化。结果 PDGF-BB可促进VSMC迁移,SB202190可抑制PDGF-BB诱导的VSMC迁移。不同浓度PDGF-BB(10μg/L~50μg/L)作用VSMC
0.5 h,MMP-2基因表达明显增加,其中以20μg/L较显著;用20μg/L PDGF-BB作用VSMC 0.5 h~4 h,可显著上调MMP-2基因表达,以0.5 h较显著。用放线菌素D和SB202190预处理后MMP-2基因表达降低。PDGF-BB可激活VSMC中磷酸化p38水平,SB202190可抑制p38的磷酸化以及相应的MMP-2基因表达。结论 p38参与了PDGF-BB诱导的VSMC迁移及MMP-2基因表达。
目的探讨猕猴桃根多糖(Actinidia chinensis Planch polysaccharid,ACPS)对人胃腺癌细胞(SGC-7901)增殖和凋亡的影响,及对SGC-7901细胞磷酸化p38(p-p38)蛋白表达的影响。方法采用CCK-8检测不同浓度ACPS对SGC-7901细胞的24、48、72 INCB018424细胞系 h的抑制作用;流式细胞技术检测各浓度ACPS作用48 h后SGC-7901细胞凋亡的发生率;Western
blot法检测各浓度ACPS作用SGC-7901细胞后前体半胱氨酰天冬氨酸酶-9(pro-caspase-9)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)和p-p38蛋白量的表达,以及p38特异性抑制剂预处理细胞后pro-caspase-9、PARP和p-p38蛋白量的表达。结果与对照组比较,1、2.5、5、10 mg/mL ACPS作用胃癌SGC-7901细胞后吸光度下降(P<0.05);同时药物剂量越高,作用时间越长,吸光度越低(P<0.01),增加PARP剪切蛋白的表达(P
目的观察体外模拟低剪切力对血管内皮细胞产生的氧化应激性损伤并探讨其可能机制。方法用平行板流动腔装置于体外模拟低剪切力作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞60 OTX015研究购买 min后,用MitoSOX检测线粒体内活性氧簇(ROS)含量,用TUNEL及DAPI染色标记凋亡的细胞。低剪切力作用不同时间后,用Western Pomalidomide溶解度 blotting检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS),P38,细胞外调节蛋白激酶(ERK),c-Jun及其磷酸化蛋白的表达水平,并分别用P38,ERK和c-Jun的抑制剂作用细胞后检查eNOS的负性调节位点Thr495的表达。结果体外模拟低剪切力可以明显诱导血管内皮细胞的氧化应激性损伤伤,呈时间依赖性激活eNOS、P38、ERK及c-Jun蛋白的磷酸化,但对总蛋白的合成无影响。ERK抑制剂可有效抑制eNOS-Thr495的活化并逆转LSS诱导的细胞内超氧化物歧化酶(SOD)减少。结论体外模拟低剪切力诱导的细胞氧化应激性损伤与促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路活化有关,ERK/eNOS的活化参与低剪切力调节的氧化应激。
【目的】研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)选择性抑制剂SB202190对卡英酸(KA)致痫大鼠学习、记忆能力的影响及其与海马神经元凋亡的关系的探讨。【方法】40只大鼠随机分为4组:假处理组、模型组和SB202190低、高剂量组(剂量分别为7.5
mg/kg,30 mg/kg),对各组大鼠进行行为学观察,应用Morris水迷宫试验,检测大鼠学习和记忆能力,同时通过BL-420F生物机能实验系统描记脑电图的变化,采用TUNEL检测细胞凋亡并计算凋亡率,应用免疫组织化学染色及Westernblotting方法检测与凋亡有关的因子:Bcl-2、Bax和Caspase-3。【结果】假处理组无发作;模型组给KA后均出现3～5级癫痫发作;与模型组相比,低、高剂量SB2021902组发作程度明显减轻,表现为1～3级;Morris水迷宫试验:定位航行试验:SB202190两个剂量组逃避潜伏期同模型组比较均明显缩短(P<0.05),以高剂量组显著;空间探索试验:同模型组比较,SB202190两个剂量组第一象限停留时间均延长(P<0.05),穿环指数均增加(P<0.05),以高剂量组显著;模型组较假处理组Bax、Caspase-3因子表达明显增强(P<0.01),同时Bcl-2因子表达明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增加,而与模型组比较,SB202190两个剂量组使这些结果发生相反改变(P<0.