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“< 正>多发性骨髓瘤(MM)是好发于老年人的恶性血液病,其发病率仅次于非霍奇金淋巴瘤,位居血液肿瘤的第2位[1]。显然,MM成为威胁老年人健康的主要疾病之一。近年来沙利度胺、雷那度胺及硼替佐米等新药与造血干细胞移植的应用,MM的预后有了明显的改善。然而,几乎所有MM最终仍将出现耐药,表现为难治与复发。研究表明蛋白很少激酶B(Akt)活化不仅参与了MM发”
“目的:将Bcr-Abl及Bcr-Abl T3151突变克隆入pcDNA3.1(-)真核表达载体,为研究靶向降解受体型酪氨酸激酶BCR-Abl,抑制肿瘤细胞生长提供研究基础。方法:pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl质粒构建:分别设计引物,通过分段PIvacaftor购买CR将BCR-ABL克隆入pcDNA3.1(-)。首先通过PCR扩增出Bcr-a片段,将其克隆入pcDNA3.1(-)的NheI/XhoI之间;接着将PCR扩增出的Abl-c片段克隆入KpnI/HindIII之间,最后XhoI/KpnI双酶切pGD210,将酶切下片段插入pcDNA3.1(-)5FU的相应位点即可。酶切鉴定及测序正确后,转染293T细胞,Western blot验证质粒的表达。pcDNA 3.1(-)-Bcr-Abl T3151的突变质粒:首先设计引物,第一步以pcDNA3.1(-)-BCR/ABL为模板,以Abl-c-u和ba-M1为引物扩增出A-1:560 bp。第二步,相同模板,以ba-M2和ba-M-down为引物扩增出A-2:870 bp。