F1代模型中,选取0和8 0mg/kg组与健康雄鼠受孕,正常分娩得F2代且常规饲养至56日龄后提取卵巢颗粒细胞;流式细胞术和透射电

F1代模型中,选取0和8.0mg/kg组与健康雄鼠受孕,正常分娩得F2代且常规饲养至56日龄后提取卵巢颗粒细胞;流式细胞术和透射电镜检测细胞凋亡情况;qRT-PCR和Wb检测Bcl2、Bax、Caspase 3、Caspase 8表达水平;qRT-PCR检测miR-16-5p可能、miR-181b-5p、miR-92a-2-5p表达水平。结果 F1代模型中,综合三方面提示,最终筛选出可能与妊娠期镉暴露致F1代成年大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关的31个miRNAs。经生物信息学分析提示31个miRNAs的靶基因生物学过程主要归类于转寻找更多录调控、细胞增殖、细胞凋亡等方面。与对照组相比,miR-92a-2-5p、miR-16-5p、miR-181b-5p、miR-628和miR-1-3p表达水平均显著上调。体外实验中,与COV434+Cd组相比,COV434-tudmiR-16和COV434-tudmiR-92a组Bcl2 mRNA和蛋白水平显著上调;细胞凋亡率显著下调;细胞核多呈均匀分布蓝色;共转染miR-92a和野生型Bcl2 3′UTR区荧光表达质粒,其荧光素酶活性显著下降。F2代模型中,透射电镜观察两组细胞均核膜完整、核仁清晰,细胞膜规整,线粒体丰富,但8.0mg·kg~(-1)组出现明显线粒体肿胀。

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