方法建立检测HBV pgRNA和DNA的探针法双重荧光定量PCR体系,通过DNA凝胶电泳、定量PCR等实验考察该检测体系的特异性和灵敏度,验证以该方法测定HepG2.2.15细胞及其培养上清中HBV pgRNA和DNA的可行性及准确度。结果建立的探针法双重荧光定量PCR体系具有较好的特异性和灵敏度,测定不同稀释倍数的细胞培养上清时,在稀释倍数和测定结果间具有较selleck化学药品好的相关性。但该方法更适用于测定细胞培养上清中的HBV pgRNA和DNA,而不适用于测定细胞样本。结论本实验建立的方法能够避免核酸提取物中由于HBV DNA污染造成HBV RNA定量不准的问题,并且在一管PCR反应中同时实现了HBV pgRNA和DNA的双重检测,极大提高了检测效率,具有潜在的临床应用价值。
胶质瘤是SBE-β-CD璁㈠崟中枢神经系统常见的恶性肿瘤,手术与放疗、化疗联合是主要治疗方案。替莫唑胺是一线化疗药物,可显著延长胶质瘤患者的生存时间。然而,胶质瘤的总体预后仍不理想,其中一个重要原因是存在肿瘤对替莫唑胺的耐药现象。研究表明胶质瘤对替莫唑胺产生耐药的影响因素包括DNA修复系统、细胞自噬、肿瘤干细胞、肿瘤微环境,等。微小RNA(miRNA)作为一类重要Dihydrotestosterone花费的转录后调控因子,可影响包括肿瘤化疗耐药在内的多项生物学行为。文中就近年来miRNA在胶质瘤对替莫唑胺耐药中的作用及机制研究进展做综述。
本研究利用花粉管通道法，将高粱无融合生殖系SSA-1 (Shanxi sorghum apomict-1)的全基因组DNA导入水稻‘辽盐28号’、‘辽盐6号’两个品种，子代的遗传性状发生了明显变化，经过连续自交选择和鉴定，获得了27个表型稳定的D_(4)代株系。