HPA通过降解HSPG的硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)侧链而破坏了组织的完整性,并且促进多种活性分子(生长因

HPA通过降解HSPG的硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)侧链而破坏了组织的完整性,并且促进多种活性分子(生长因子、细胞因子等)的释放,所以对肿瘤的浸润、转移及肿瘤血管的生成都有着重要的作用。本研究的目的在于筛选获得特异性较好的抗HPA单克隆抗体,通过初步体外实验研究抗HPA单抗与紫杉醇联用后对乳腺癌细胞的查找更多增殖及侵袭能力的影响。为研制抗肿瘤转移的药物奠定基础,为研究HPA在肿瘤发生发展中的作用机制以及在肿瘤诊断、治疗、预后中的作用提供材料。选择紫杉醇与抗HPA单抗联用,为乳腺癌在临床治疗中奠定理论基础。 方法:本实验用已制备的原核表达HPA50kDa蛋白质为抗原,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤细胞融合www.selleckchem.cn/products/AZD2281(Olaparib).html技术制备抗HPA单克隆抗体,经捕获型ELISA和试纸条测定小鼠抗体亚类,用PEG6000沉淀、分子筛层析对抗体进行纯化,通过间接ELISA和Western Blot进行单克隆抗体特异性鉴定。通过MTT法、流式细胞术-PI单染、细胞划痕试验、Transwell法探讨紫杉醇与抗HPA单克隆抗体联用后对乳Torin 1腺癌细胞的增殖及侵袭能力的影响。 结果:(1)原核表达HPA50kDa蛋白质在经过透析、浓缩及蛋白浓度测定后,作为抗原免疫5只BALB/c小鼠,三次免疫后通过间接ELISA检测,3号和4号小鼠效价较高,达到了达到1:64000以上,选用4号小鼠进行实验。 采用细胞融合技术,取4号小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞用PEG融合,通过HAT筛选杂交瘤细胞,融合率约为90%,阳性率约为82%。

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

*

You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>