2007年日本学者Soda等首次发现EML4-ALK(棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶)融合基因,研究发现其与EGFR和K-ras的突变可能存在不共存现象,提示该基因可能是非小细胞肺癌特异性较高的又一分子靶点。目前针对EML4-ALK基因的融合位点结构研究较少,而其融合机制仍不清楚。本课题的研究目的在于通过对H2228细胞株中EML4-ALK融合基此网站因的融合位点的结构分析,初步探讨EML4-ALK基因的融合方式和可能的融合机制。同时,我们亦通过对正常人群和原发性肺癌患者人群中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因-308位点单核苷酸多态性的检查,初步对TNF-α基因-308位点单核苷酸的多态性与原发性肺癌相关性进行研究。方法:本课题分为两部分:第一部分采用巢式PCR扩增EML4-ADabrafenibLK融合基因并对扩增产物进行测序,然后进行序列拼接,进一步应用NCBI-BIAST(National Center for Biotechnology Information)及CENSOR系统分析该基因融合位点的序列结构和发生融合的可能机制。第二部分应用高通量Taq Man-MGB探针技术对TNF-α-308G/A位点,即rs18Cobimetinib00629位点进行基因分型,分析比较447例健康对照者和250例原发性肺癌患者的基因类型。采用SPSS 18.0软件对数据资料进行统计分析。结果:1.通过对融合基因的分析,发现在断裂点附近存在三个Alu重复序列,并发现ALK序列断裂点附近存在MIR序列。断裂点周围存在大量正向重复序列CTGT,及X元件的互补序列CCAGC,这些序列有可能促进DNA断裂和末端接合,并激发附近ALU序列的重组,并发现两个SNP位点。