结果Hochest33258/PI荧光染色可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡形态学特征。100、200、400μmol/L ISA处理组SH-SY5Y细胞的凋亡率均明显高于对照组(F=111.30,P<0.05)。随着ISA浓度的升高,表达活化Caspase-3的细胞数逐渐增加(F=5.622,P<0.05)。Western blot检测到其下游作用底物ICAD被降也解。结论ISA能诱导SH-SY5Y细胞凋亡,该作用可能通过激活Caspase-3来实现。”
“目的足细胞骨架及相关蛋白的异常是引起以足细胞损伤为特征的局灶节段肾小球硬化(focal segmental glo-merular sclerosis,FSGS)的原因之一,而雷公藤甲素在FSGS的治疗中有着积极意义。文中旨在观察雷公藤甲素对足细Pfizer Licensed Compound Library价格胞的保护和治疗作用,进一步探讨其作用机制。方法以50 ng/ml白细胞介素13(IL-13)诱导小鼠足细胞系(heat-sensitive mousepodocytes,HSMP)建立足细胞损伤模型,保护实验予雷公藤甲素(3 ng/ml)或/和地塞米松(1μmol/L)预处理足细胞30 min,治疗实验则在IL-13作用足细胞24 h后,换信号通路雷公藤甲素或(和)地塞米松干预72 h。免疫荧光法分析足细胞骨架相关蛋白F-actin和细胞间连接蛋白ZO-1的变化情况,Western blot方法检测细胞内信号通路STAT6的磷酸化水平。结果足细胞骨架蛋白F-actin和ZO-1的染色结果显示:雷公藤甲素和地塞米松均可明显阻断和治疗IL-13诱导的足细胞损伤,F-actin的表达得以部分恢复,细胞骨架重排,ZO-1表达增强,连续性得以恢复,两者联合使用无明显协同作用。